Scielo RSS <![CDATA[Acta bioquímica clínica latinoamericana]]> http://www.scielo.org.ar/rss.php?pid=0325-295720060004&lang=es vol. 40 num. 4 lang. es <![CDATA[SciELO Logo]]> http://www.scielo.org.ar/img/en/fbpelogp.gif http://www.scielo.org.ar <![CDATA[Sin prisa y sin pausa]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400001&lng=es&nrm=iso&tlng=es <![CDATA[Carta del Prof. Dr. Pablo M. Jacovkis]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400002&lng=es&nrm=iso&tlng=es <![CDATA[Carta de la Dra. Alicia Rovó]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400003&lng=es&nrm=iso&tlng=es <![CDATA[La proteína quimioatractante de monocitos correlaciona con la angiogénesis en melanomas metastásicos]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400004&lng=es&nrm=iso&tlng=es Se analizaron biopsias de melanoma metastásico humano para elucidar la relación entre la expresión de la quimioquina MCP-1/CCL2 (monocyte chemoattractant protein-1), la angiogénesis y la agresividad del tumor. Se encontró que esta quimioquina se expresa en el 100% de los casos, con heterogeneidad en el porcentaje de células positivas dentro del tumor. Estos tumores presentaron gran cantidad de macrófagos infiltrantes, particularmente asociados a las áreas de más activa angiogénesis. Se obtuvo correlación positiva entre el porcentaje de células que expresan MCP-1 y el grado de vascularización. Asimismo, se encontró asociación entre una mayor angiogénesis y la proliferación tumoral evaluada como índice mitótico. Estos resultados sugieren que el aumento en la vascularización podría ser predictivo de metástasis más agresivas, donde la expresión de MCP-1 estaría estrechamente vinculada al desarrollo de vasos a través del reclutamiento de macrófagos.<hr/>Biopsies from human metastatic melanomas were analyzed in order to elucidate the relationship between MCP-1/CCL-2 (monocyte chemoattractant protein-1) chemokine expression by tumor cells, angiogenesis and aggressiveness in tumor development. The chemokine was expressed in 100% of the cases, with heterogeneity in the percentage of positive cells within the tumor mass. Tumors presented an important infiltration of macrophages, particularly associated to areas of active angiogenesis. Microvascular development, assessed by immunohistochemistry, correlated with the high percentage of cells expressing MCP-1/CCL-2. There was also significant correlation with vascularization and mitotic index. These results suggest that vascularization could be predictive of more aggressive melanoma metastasis, where the MCP-1/CCL-2 expression would be closely associated to vessel development through macrophages recruitment. <![CDATA[Fibrinógeno plasmático, su relación con el peso, lípidos y el hábito de fumar en individuos sanos]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400005&lng=es&nrm=iso&tlng=es Los niveles de fibrinógeno plasmático (Fg) son considerados un importante factor de riesgo para la enfermedad cardiovascular en hombres y mujeres con y sin enfermedad coronaria pre-existente. El Fg es también un importante factor de riesgo para la muerte coronaria cuando se asocia con otros factores y uno de los más importantes es el hábito de fumar. Con el fin de tener una base adecuada, en nuestro medio, para la evaluación de poblaciones de riesgo, se determinó el rango de referencia del Fg, por el método de Clauss, en 2.059 individuos adultos sanos. Se relacionó con los niveles plasmáticos de colesterol total (Ct), HDL colesterol (HDL), LDL colesterol (LDL), triglicéridos (TG) y glucosa (Gl), con el peso corporal (P), las tensiones arteriales sistólica (TAS) y diastólica (TAD) y el hábito de fumar. El nivel de Fg fue significativamente más elevado en los individuos fumadores que en los no fumadores. En los primeros se encontró una correlación directa entre los niveles plasmáticos de Fg y el número de cigarrillos/día, P, Col T, LDL, Gl, TAS y TAD (p < 0,05) y una correlación inversa con HDL (p < 0,05). En los individuos no fumadores no se hallaron diferencias significativas respecto de la población general.<hr/>Plasma fibrinogen levels (Fg) were found to be an important risk factor for coronary heart disease in men and women, with and without pre-existing coronary heart disease. Fibrinogen is also important as a risk factor for coronary death in association with other factors, the most important of which is smoking. Fg was measured in 2.059 healthy adults by the Clauss assay. Establishing the reference value of plasma fibrinogen levels and comparing it with total cholesterol (tChol), HDL cholesterol (HDL), LDL cholesterol (LDL), triglycerides (TG) and glycaemia (Gl), body weight (W), systolic arterial pressure (SAP) and diastolic arterial pressure (DAP) and smoking was set as an objective in our environment. Fibrinogen levels were higher in smokers than in no smokers. There was direct correlation with the number of cigarettes/day, W, tChol, LDL, Gl, SAP and DAP (p < 0.05) and inverse correlation with HDL (p < 0.05). No differences were found in nonsmokers compared to the general population. <![CDATA[Aplicación de un método de electroforesis capilar al estudio de la glicosilación de albúmina in vitro]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400006&lng=es&nrm=iso&tlng=es Los azúcares reductores como la glucosa pueden reaccionar no enzimáticamente con los grupos amino libres de las proteínas generando productos de glicosilación avanzados (AGEs). El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un método de electroforesis capilar de zona (ECZ) para estudiar albúmina glicosilada in vitro. Se realizaron incubaciones de albúmina bovina y suero humano con glucosa (0,5 M) durante 12, 24 y 60 días. Como inhibidor de la glicosilación se utilizó aminoguanidina (AG; 0,5 M). Al finalizar la incubación la albúmina sérica fue separada por precipitación fraccionada y redisuelta en buffer fosfato-salino. La detección de AGEs fluorescentes (lexcitación=338 nm, lemisión 20 °C; ldet=200 nm) se observó prolongación de los tiempos de migración y ensanchamiento de los picos con el aumento del tiempo de incubación. Estos parámetros se redujeron sólo parcialmente en presencia de AG. En conclusión, la ECZ presenta mayor sensibilidad para discriminar estadios intermedios del proceso de glicosilación, resultando un método complementario al análisis por fluorometría utilizado para el estudio de AGEs.<hr/>Reducing sugars (such as glucose) can interact non-enzymatically with free amino-groups of proteins to form advanced glycation endproducts (AGEs). The objective of this work was to study the process of albumin glycation in vitro by Capillary Zone Electrophoresis (CZE). Bovine albumin (BSA; 50 mg/mL) and human serum (HS) were incubated with glucose (0.5 M) at 37 °C for 12, 24 and 60 days. Aminoguanidine (AG) was used as inhibitor (0.5 M). Afterwards, HS-albumin was separated by precipitation and redissolved in phosphate-saline buffer. Fluorescent AGEs (lexcitation=338 nm, lemission=442 nm) were detected after 12, 24 and 60 days of incubation. Fluorescence increased proportionally to the incubation times and AG was effective to inhibit the formation of fluorescent compounds. By CZE (boric acid 350 mM; pH 9,9; fused-silica gel capillary 50 µm x 50 cm; 25 kV; 90 µA; 20 °C; ldetection=200 nm) longer migration times (MT) and wider peaks (PW-50) were observed, as the incubation time was prolonged. MT and PW-50 were partially reduced in the presence of AG. It can be concluded that CZE is a highly sensitive method to detect intermediate products during the protein glycation process. This procedure can be considered complementary to the fluorometric analysis used in AGEs' study. <![CDATA[Factores procoagulantes en pacientes con cáncer]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400007&lng=es&nrm=iso&tlng=es El objetivo del presente estudio fue determinar los niveles de factor tisular (FT) y procoagulante del cáncer (PC) en pacientes con enfermedades neoplásicas para intentar establecer: 1) si existe asociación entre la presencia de estos marcadores y el origen del tumor; 2) si los niveles de estas proteínas procoagulantes se correlacionan con los estadíos I/II o III/IV de la enfermedad; 3) si los tratamientos con quimioterapia modifican los niveles séricos del FT y PC y, finalmente 4) evaluar si estos procoagulantes podrían comportarse como marcadores predictivos en el desarrollo de trombosis. Se incluyeron 61 pacientes con diferentes tipos de cáncer: pulmón (n=14), mama (n=19), digestivo (n=13) y génitourinario (n=12) y controles normales (n=20). Los resultados demostraron una sensibilidad y especificidad del 87,9% y 85%, respectivamente, para el PC y del 72,4% y 100% para el FT. Los pacientes con cáncer génitourinario presentaron los valores más altos de ambos procoagulantes coincidiendo con la mayor prevalencia de trombosis objetivada clínica y radiológicamente. Ninguno de los procoagulantes evaluados permitió diferenciar estadío I-II de III-IV de la enfermedad. Por otra parte, el tratamiento con quimioterapia no modificó, con significancia estadística, los niveles de ambos procoagulantes. Un seguimiento clínico y de laboratorio en función del tiempo y del tratamiento sería importante para establecer el valor pronóstico de los niveles de estos procoagulantes y su propensión a desarrollar trombosis en pacientes con cáncer.<hr/>The objectives of the present study were to determine the tissue factor (FT) and cancer procoagulant (PC) levels in patients with neoplasic diseases in order to establish: 1) if there is association between the presence of both markers and the tumor origin; 2) if the levels of these procoagulant proteins are correlated with stages I/II or III/IV of the disease; 3) if treatment with chemotherapy modifies the FT and PC serum levels and, finally 4) to evaluate if these procoagulants could be used as predictive markers in thrombosis development . Sixty-one patients with different types of cancer were included: lung (n=14), breast (n=19), digestive (n=13) and genitourinary (n=12) and normal controls (n=20). The results demonstrated a sensitivity and specificity of 87.9% and 85% for PC and of 72.4% and 100% for FT, respectively. Patients with genitourinary cancer displayed the highest values of both procoagulants in agreement with the greatest prevalence of thrombosis observed in this group. None of them enabled differentiation between stages I-II and III-IV of the disease. On the other hand, the chemotherapy treatment did not modify the levels of any procoagulant. A clinical and laboratory follow-up based on the treatment would be important in order to establish the value of these procoagulants levels and their propensity to develop thrombosis in cancer patients. <![CDATA[Banco Público de Sangre de Cordón Umbilical: etapa inicial del Programa No Relacionado en Argentina]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400008&lng=es&nrm=iso&tlng=es La sangre de cordón umbilical (SCU) ofrece una fuente rica de células progenitoras hematopoyéticas para trasplante de médula ósea (TMO). En el año 1996 comenzó en este Hospital un Programa Relacionado de Banco de SCU. Este Programa permite que familias con un niño que padece una enfermedad tratable con TMO almacene la SCU de un hermano por nacer para su futuro uso. Recientemente, el Programa No Relacionado ha sido aprobado y recibió apoyo financiero para adquirir nuevo equipamiento. Este Programa tiene como objetivo colectar y preservar unidades de SCU donadas de manera altruista, que quedan disponibles para su uso en TMO alogeneicos en pacientes que no poseen otro donante compatible. Desde agosto de 2005 a enero de 2006 se han inscripto 110 donantes y realizado 96 colectas. El procesamiento de 70 unidades mediante un sistema automatizado permitió recuperar un 76,4 ± 7,4% de las células nucleadas totales (CNT) iniciales. Las unidades presentaron 0,8 ± 0,3 x 109 CNT finales y un recuento de células CD34+ de 2,79 ± 2,57 x 106. El análisis molecular de los antígenos de histocompatibilidad mostró la presencia de alelos característicos de esta población (A68, B3519, DR08) junto con alelos menos frecuentes en la población de Argentina. El funcionamiento de este Banco nos permitirá aumentar la oferta internacional de unidades con perfil HLA latinoamericano-hispano, fenotipo escaso en los registros existentes en la actualidad.<hr/>The umbilical cord blood (UCB) is a rich source of hematopoietic progenitor cells (HPC). The Unrelated Program has been recently established and it has received financial support by the Ministry of Health to acquire new equipment. This Program was aimed at collecting and preserving UCB from altruistic donors. The units are potentially used for allogeneic bone marrow transplantation in those patients who lack a suitable compatible donor. From August 2005 to January 2006 110 donors have been enrolled and 96 units collected. Units processed (n=70) yield a mean recovery of 76.4 ± 7.4% of the total nucleated cell (TNC) collected with a final count of 0.8 ± 0.3 x 109 TNC and 2.79 ± 2.57 x 106 CD34+ cells per unit. By HLA analysis, those variants common in the Argentine population (A68, B3519, DR08) along with the less frequently found alleles were detected. This Program will make it possible to increase the availability of units from Hispanic-Latin American background that are scarce in registries from other countries. <![CDATA[Enterococos vancomicina resistentes: colonización en pacientes hospitalizados, en Rosario, Argentina]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400009&lng=es&nrm=iso&tlng=es Los enterococos vancomicina resistentes (EVR) han emergido como importantes patógenos en todo el mundo. En Rosario, se produjo un brote en 2000, luego de lo cual se los ha detectado en distintos centros hospitalarios de la ciudad. La mayoría de los aislados presentaron el fenotipo Van-A y correspondieron a Enterococcus faecium aunque se ha aislado también Enterococcus faecalis. Es posible la trasmisión nosocomial de estas bacterias por las manos o guantes a partir de pacientes infectados o colonizados. El objetivo del trabajo fue determinar el nivel de colonización fecal de pacientes hospitalizados en áreas críticas de cuatro instituciones asistenciales de esta ciudad. Se tomaron muestras de materia fecal o hisopado anal de pacientes con riesgo de colonización, internados en áreas críticas. Se aislaron 60 E. faecium y 2 E. faecalis con el fenotipo Van-A y 2 Enterococcus gallinarum con resistencia constitutiva, con el fenotipo Van-C. Todos los aislamientos de E faecium y E faecalis mostraron CIMs para vancomicina > 256 ug/mL y fueron sensibles a Linezolid.<hr/>Vancomycin-resistant enterococci (VRE) have emerged as important pathogenic bacteria all over the world. The first outbreak of infections due to VRE occurred in Rosario in 2000 due to Enterococcus faecium with the Van-A phenotype. As the use of contact isolation precautions for VRE-colonized and infected patients was recommended in order to prevent the spread of vancomycin resistance, a study to determine the level of fecal colonization among patients hospitalized in critical areas was conducted. Samples of rectal swabs were obtained from patients hospitalized in intensive care units of four hospitals in Rosario looking for VRE. Sixty-four cases of colonized patients with VRE were detected among the 565 patients studied. Sixty E. faecium, and two Enterococcus faecalis with the Van-A phenotype, and two Enterococcus gallinarum with the Van-C phenotype were isolated. All the E. faecium and E. faecalis isolates showed MIC > 256 ug/mL against vancomycin, and were susceptible to Linezolid. <![CDATA[Perfil lipídico, apolipoproteínas y fibrinógeno en adultos portadores de VIH o con SIDA: Estudio preliminar]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400010&lng=es&nrm=iso&tlng=es El objetivo de este trabajo fue analizar el perfil lipídico y la concentración plasmática de apolipoproteinas (A-I y B) y fibrinógeno en un grupo de adultos portadores de VIH o con SIDA con tratamiento antirretroviral de alta eficacia (HAART). Se estudiaron 41 pacientes (19 VIH+ y 22 con SIDA) entre 26 y 44 años de edad. Se determinó el peso corporal P (kg) y la talla T (m), calculándose el índice de masa corporal (IMC, P/T²). Las muestras de sangre obtenidas en ayunas fueron recogidas en tubos con EDTA y sobre plasma se determinó la concentración de colesterol total (CT), HDL y triglicéridos (TG) (mg/dL), por método enzimático-colorimétrico; la fracción LDL fue calculada a partir de la ecuación de Friedewald. Las apolipoproteínas A-I, B (ApoA-I y ApoB ) y el fibrinógeno (F), se determinaron por inmunodifusión radial cuantitativa sobre placas (Diffuplate, Biocientífica SA) (mg/dL). Un 20% y 44% de los pacientes VIH+ y con SIDA, respectivamente, presentaron sobrepeso. Los resultados obtenidos en este grupo de pacientes, con tratamiento antirretroviral de alta eficacia, evidencian algunas alteraciones en el perfil lipídico y en los niveles de fibrinógeno y apolipoproteína B. Se enfatiza la necesidad de una terapéutica nutricional adecuada con objeto de realizar una apropiada selección de alimentos que puedan ejercer un efecto favorable sobre los lípidos plasmáticos para, de esta manera, compensar los efectos de la medicación.<hr/>The aim of this paper was to analyze the lipid profile, plasma levels of apolipoproteins and fibrinogen in a group of HIV+/AIDS adults. The study was performed on 41 patients (19 HIV+ and 22 AIDS), between 26 and 44 years old. Body weight, W (kg) and height, H (m) were determined, and the Body Mass Index calculated (W/H2). Blood samples were collected from fasting patients. Plasma cholesterol (TC), HDL and LDL, triglycerides, fibrinogen and apolipoproteins were determined. Some patients from both groups showed overweight concomitant with increased levels of fibrinogen and apolipoprotein B levels and decreased HDL values. Fibrinogen and Apo B measurements seem to be more sensitive than TC and LDL determinations. These findings support previous studies on HIV+/AIDS-infected infants, and stress the importance of incorporating fibrinogen and apolipoprotein B in the periodic nutritional control of these patients. This would enable an early evaluation of cardiovascular risk and the assessment of the therapeutic guidelines, implemented along with the specific anti retroviral treatment and adequate selection of food with a protector effect on plasma lipids. <![CDATA[Viabilidad de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis en la maduración de quesos caprinos y bovinos]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400011&lng=es&nrm=iso&tlng=es Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) es el microorganismo causante de la paratuberculosis o Enfermedad de Johne, enteritis crónica que afecta a rumiantes y a otros animales domésticos y silvestres. También ha sido vinculado a la enfermedad de Crohn en humanos. Hembras caprinas y bovinas infectadas con Map pueden excretar micobacterias en su leche, que consumida cruda o usada para la elaboración de quesos sin pasteurizar podría constituir una fuente potencial para la infección humana. El objetivo del trabajo fue determinar la viabilidad de Map en quesos elaborados con leche caprina y bovina infectada experimentalmente y sometida o no a tratamiento térmico. Durante la maduración, Map fue aislado sólo en los quesos elaborados con leche sin tratamiento térmico, manteniendo su viabilidad hasta los 60 días para los quesos caprinos y hasta los 45 días en los bovinos. En quesos caprinos los mayores valores de pH se hallaron entre los 30 y 45 días de maduración, coincidiendo con los aislamientos más numerosos de Map; en cambio, en los quesos bovinos no se observó relación alguna. La maduración de los quesos contribuiría a disminuir la viabilidad de Map en quesos elaborados con leche sin tratamiento térmico y el calentamiento de la leche a 65 ºC durante 20 min, seguido por la maduración de los quesos, resultaría beneficioso ya que eliminaría las micobacterias presentes, mejorando la calidad higiénico-sanitaria del alimento.<hr/>Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) is the etiologic agent of paratuberculosis or Johne's disease. It is a chronic enteritis affecting ruminants, domestic and wild species. Goats and cows infected with Map can excret can excret mycobacteria in their milk. This fact represents a potential risk when people consume raw milk or non-pasteurized cheese. The objective of this work was to determine the viability of Map in cheese elaborated with experimentally infected caprine and bovine milk with different thermal treatments (65 °C or 37 °C). During maturity, Map was isolated in cheese with only treatment of milk with 37 °C, keeping its viability until days 60 and 45 days in caprine and bovine cheese respectively. In caprine cheese the highest pH value was found between days 30 and 45 of maturity in agreement with the biggest number of Map's isolates. The maturity decreases the Map viability in elaborated cheese without thermal treatment, and the treatment with 65 °C of temperature plus cheese maturity process would be beneficial for the mycobacteria elimination in these products. <![CDATA[Detección de contaminación por Mollicutes en cultivos celulares mediante amplificación del gen 16S rARN]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400012&lng=es&nrm=iso&tlng=es La contaminación de los cultivos celulares por Mollicutes es un hecho frecuente en los laboratorios, reportándose hasta un 80% de cultivos contaminados, lo que resulta en ensayos experimentales poco confiables y en productos biológicos poco seguros. Los objetivos del presente estudio fueron: estimar la frecuencia de micoplasmas como contaminantes de cultivos celulares y analizar la eficiencia de un ensayo de PCR que emplea como ADN blanco al gen 16S rARN de los Mollicutes. Se estudiaron 39 cultivos celulares, representativos de las líneas celulares más utilizadas y 17 cultivos celulares primarios, recibidos para análisis de contaminación, entre julio y diciembre de 2005. Se detectaron micoplasmas en 18/39 (46,2%) cultivos de líneas celulares, mientras que no se detectaron micoplasmas en los cultivos celulares primarios. El análisis mediante HpaII del espacio intergénico 16S-23S rARN de 6 cultivos positivos determinó dos patrones de restricción. La secuenciación del ADN de dos amplicones identificó a Mycoplasma hyorhinis y a Mycoplasma salivarium como micoplasmas contaminantes. La sensibilidad analítica de la PCR, determinada a partir de diluciones de un cultivo de Mycoplasma hominis fue 0,01 u.c.c./mL (unidades cambiadoras de color por mL), mientras que su especificidad analítica fue 100%. Los resultados de este estudio confirman la importancia de los micoplasmas como contaminantes de cultivos celulares y sugieren que la PCR dirigida al gen 16S rARN es un procedimiento útil para el diagnóstico de estos microorganismos.<hr/>Up to 80% of cell cultures have been reported to be contaminated with Mollicutes, causing unreliable experimental results and giving rise to unsafe biological products. The aims of this study were to estimate the frequency of mycoplasmas as contaminants in cell cultures, and to analyze the performance of a PCR assay targeting the 16S rRNA of Mollicutes. Thirty-nine cell cultures representing the most used lines of cell cultures and 17 primary cell cultures submitted for detection of mycoplasma contamination were studied between July and December 2005. Mycoplasmas were detected in 18/39 (46.2%) cell line cultures, and in none of the primary cell cultures. HpaII analysis of the 16S-23S rRNA intergenic space of 6 positive cultures belonging to different laboratories gave two different restriction patterns. The sequentiation of each of the two patterns identified Mycoplasma hyorhinis and Mycoplasma salivarium as the contaminant mycoplasmas. The analytic sensitivity of the 16S rRNA PCR was 0.01 color-changing units per mL, as determined for dilutions of a Mycoplasma hominis culture, whereas the analytical specificity was 100%. In conclusion, these results reaffirm the importance of mycoplasmas as cell culture contaminants, and suggest that 16S rRNA PCR is a reliable method for detection of these organisms as cell culture contaminants. <![CDATA[Obtención de ADN polimerasa de Thermus aquaticus en un laboratorio de mediana complejidad]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400013&lng=es&nrm=iso&tlng=es La PCR (reacción en cadena de la polimerasa) es una técnica de diagnóstico molecular muy sensible, capaz de revelar tan sólo una copia de ADN en una mezcla compleja del mismo. El punto central para la difusión de esta metodología fue el descubrimiento de una ADN polimerasa estable al calor aislada de Thermus aquaticus (taq ADN pol), lo cual permitió automatizar el proceso de PCR usando un ciclador térmico, sin la necesidad de una adición continua de ADN polimerasa fresca. El objetivo del trabajo fue adaptar un método para la obtención de taq ADN pol en un laboratorio hospitalario de mediana complejidad usando el equipamiento y los medios de cultivo disponibles. Con este método se consiguió producir un extracto crudo de 10.000 unidades de enzima, de fácil purificación, que mostró tener muy buena actividad enzimática por lo cual es posible utilizarla en una amplia variedad de aplicaciones (PCR clásica, PCR anidada, PCR transcriptasa reversa). La actividad enzimática para estos casos fue comparable con la de la taq polimerasa que se adquiere en el mercado.<hr/>The PCR (Polymerase Chain Reaction) is a technique of molecular diagnosis so sensitive that it is capable of revealing a single copy of the DNA searched for in a complex mixture of DNA. The main point for the difussion of the methodology was the discovery of an isolated DNA polymerase of the Thermus aquaticus stable to heat (taq DNA pol), which has permitted automatizing the process of PCR by using a thermal cycler, without the need of a continous addition of fresh DNA polymerase. The aim of the work was to adapt a method for the attainment of taq DNA pol in a hospital lab of medium complexity, by using the equipment and means of culture available. With this method, it was possible to produce a raw extract of 10,000 units of enzyme, of easy purification, which proved to have a wide range of applications (classic PCR, nested PCR, reverse transcriptase PCR). The enzymatic activity for these cases was comparable to that of the taq polymerase that is obtained in the market. <![CDATA[Guía de consenso para el diagnóstico y seguimiento de la enfermedad tiroidea: Parte II]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400014&lng=es&nrm=iso&tlng=es La PCR (reacción en cadena de la polimerasa) es una técnica de diagnóstico molecular muy sensible, capaz de revelar tan sólo una copia de ADN en una mezcla compleja del mismo. El punto central para la difusión de esta metodología fue el descubrimiento de una ADN polimerasa estable al calor aislada de Thermus aquaticus (taq ADN pol), lo cual permitió automatizar el proceso de PCR usando un ciclador térmico, sin la necesidad de una adición continua de ADN polimerasa fresca. El objetivo del trabajo fue adaptar un método para la obtención de taq ADN pol en un laboratorio hospitalario de mediana complejidad usando el equipamiento y los medios de cultivo disponibles. Con este método se consiguió producir un extracto crudo de 10.000 unidades de enzima, de fácil purificación, que mostró tener muy buena actividad enzimática por lo cual es posible utilizarla en una amplia variedad de aplicaciones (PCR clásica, PCR anidada, PCR transcriptasa reversa). La actividad enzimática para estos casos fue comparable con la de la taq polimerasa que se adquiere en el mercado.<hr/>The PCR (Polymerase Chain Reaction) is a technique of molecular diagnosis so sensitive that it is capable of revealing a single copy of the DNA searched for in a complex mixture of DNA. The main point for the difussion of the methodology was the discovery of an isolated DNA polymerase of the Thermus aquaticus stable to heat (taq DNA pol), which has permitted automatizing the process of PCR by using a thermal cycler, without the need of a continous addition of fresh DNA polymerase. The aim of the work was to adapt a method for the attainment of taq DNA pol in a hospital lab of medium complexity, by using the equipment and means of culture available. With this method, it was possible to produce a raw extract of 10,000 units of enzyme, of easy purification, which proved to have a wide range of applications (classic PCR, nested PCR, reverse transcriptase PCR). The enzymatic activity for these cases was comparable to that of the taq polymerase that is obtained in the market. <![CDATA[Niveles de luz ultravioleta ambiental asociados con apoptosis y necrosis en fibroblastos humanos]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572006000400015&lng=es&nrm=iso&tlng=es La apoptosis involucra una serie de episodios altamente organizados y programados que tienen por objeto mantener la estabilidad genómica eliminando células huésped defectuosas. El propósito de este estudio fue determinar las dosis umbral y los tiempos de exposición a UV-A y UV-B medioambientales suficientes como para producir apoptosis y necrosis en las células normales de una línea celular de fibroblastos humanos. Se midieron dosis de UV-A y UV-B durante un período de seis años con un radiómetro UV de cuatro canales. Se irradiaron los fibroblastos una vez utilizando Simulador Solar UV Oriel con seis dosis de UV basados en el medio ambiente. Las dosis correspondieron a 0, 11, 19, 23 y 45 minutos de radiación ambiental de UV-A y UV-B al sol del mediodía en Puerto Rico. Se utilizó el método de unión de la anexina-V para diferenciar entre los fibroblastos normales y fibroblastos apoptóticos o necróticos. La dosis umbral de la apoptosis a la necrosis se halló entre 24-28 kJ/m², correspondiente a los 19 y 23 minutos de exposición ambiental a UV-A y UV-B. Este estudio proporciona los primeros datos que especifican las dosis de umbral medioambientales de UV-A y UV-B en las que los fibroblastos humanos experimentan apoptosis y necrosis. Estos resultados pueden proporcionar valiosos umbrales dosis-respuesta de apoptosis y necrosis para futuros estudios mecanicistas y datos de línea de base para programas de prevención de cáncer de piel.