Scielo RSS <![CDATA[Revista argentina de microbiología]]> http://www.scielo.org.ar/rss.php?pid=0325-754120120003&lang=pt vol. 44 num. 3 lang. pt <![CDATA[SciELO Logo]]> http://www.scielo.org.ar/img/en/fbpelogp.gif http://www.scielo.org.ar <![CDATA[Science, citation culture and money]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300001&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt <![CDATA[In vivo cell aggregations of a recent swine biofilm-forming isolate of Leptospira interrogans strain from Argentina]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300002&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Leptospirosis is a zoonosis of ubiquitous distribution caused by spirochetes. Leptospires exist either as saprophytic water-associated organisms or as animal pathogens that can survive in water. Previous works have demonstrated that both saprophytic and pathogenic leptospires are able to produce functional biofilms, which consist of a community of bacteria embedded in an extracellular matrix attached to a surface. This structure is believed to provide protection from environmental aggressiveness. In the present study, we analyzed the capacity of biofilm formation both of a a recent field isolate of Leptospira interrogans serovar Pomona obtained from an aborted swine fetus and of the saprophytic Leptospira biflexa serovar Patoc. We used light microscopy, immunofluorescence, and scanning electron microscopic examinations on glass and polystyrene plate models to evaluate the process in vitro. The ability to form bacterial aggregations in vivo was tested using pregnant guinea pigs infected with both strains. We obtained biofilms both on glass and plastic surfaces. Scanning electron microscopic analysis showed differences in the biofilm structure formed by both strains. L. interrogans serovar Pomona cell aggregations were observed in placental tissues by light microscopy. Biofilms and cell aggregations are consistent with the life of saprophytic strains in water and could help pathogenic strains to colonize the host and lead to abortion in pregnant animals.<hr/>La leptospirosis es una zoonosis de amplia distribución causada por el género Leptospira. Las leptospiras existen de manera saprófita asociadas a ambientes acuáticos o como patógenos animales que también pueden sobrevivir en el agua. Trabajos previos demostraron que tanto las leptospiras saprófitas como las patógenas tienen la capacidad de formar biofilms, que consisten en una comunidad de bacterias embebidas en una matriz extracelular adherida a una superficie. Esta estructura tendría la función de proveer protección contra el medioambiente. En este estudio, analizamos la capacidad de formar biofilm en un aislamiento obtenido recientemente de un feto porcino abortado, caracterizado como Leptospira interrogans serovar Pomona, y en la bacteria saprófita Leptospira biflexa serovar Patoc. Se estudió la formación de biofilm en distintas superficies (vidrio y poliestireno), las que se evaluaron por microscopía óptica, inmunofluorescencia y microscopía electrónica de barrido. La capacidad de formar agregaciones bacterianas in vivo se evaluó utilizando un modelo de cobayas preñadas infectadas con ambas cepas. Se obtuvieron biofilms tanto en las superficies plásticas como de vidrio. La microscopía de barrido mostró diferencias en la estructura del biofilm formado entre ambas cepas. Se observaron agregaciones celulares en vasos placentarios de los animales infectados con L. interrogans serovar Pomona. Los biofilms y las agregaciones celulares son compatibles con la vida saprofítica en el agua y podrían favorecer a los microorganismos patógenos en la colonización del hospedador, lo que podría llevar al aborto en los animales preñados. <![CDATA[Comparison of nucleic acid extraction efficiency using different commercial kits and qPCR: Effect of inhibitors]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300003&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt La detección de secuencias específicas de ácidos nucleicos (AN) empleando PCR revolucionó las ciencias biológicas y médicas. La PCR en tiempo real (qPCR) incorporó la posibilidad de obtener resultados cuantitativos. Una etapa decisiva previa a la qPCR es la extracción de AN, en la que se pueden producir tanto la remoción como la extracción conjunta de sustancias inhibidoras de la reacción enzimática, lo que afectará la eficiencia de amplificación. En el presente trabajo se realizó una comparación entre los kits de extracción comerciales Qiagen, Invitrogen y Macherey-Nagel, utilizados para extraer ADN de Trypanosoma cruzi de sangre murina artificialmente infectada y ARN de PP7, bacteriófago de Pseudomonas aeruginosa, sembrado en matrices acuosas, en presencia o ausencia de inhibidores. La eficiencia de recuperación de AN en muestras sin inhibidores fue similar para los tres kits de extracción. El kit de Invitrogen fue el único que no se vio afectado por la presencia de inhibidores en las muestras.<hr/>The detection of specific nucleic acid (NA) sequences by PCR has revolutionized the biological and medical sciences. Real-time PCR (qPCR) opened up the possibility of obtaining quantitative results. NA extraction is a decisive step prior to qPCR since it may produce either the removal or co-extraction of inhibitory substances of the enzymatic reaction, which in turn affects the amplification efficiency. In the present work we compared the commercial NA extraction kits from Qiagen, Invitrogen and Macherey-Nagel, which were used to extract DNA from mice blood artificially infected with Trypanosoma cruzi and PP7 RNA, Pseudomonas aeruginosa bacteriophage, in spiked aqueous matrices. NA recovery efficiency in samples without inhibitors was similar for the three extraction kits. However, the Invitrogen kit was the only one that remained unaffected in the presence of inhibitors in the samples. <![CDATA[Siderophores of Stenotrophomonas maltophilia: detection and determination of their chemical nature]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300004&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Stenotrophomonas maltophilia is an emerging nosocomial pathogen. Despite the broad spectrum of syndromes associated with S. maltophilia infections, little is known about its virulence factors, including siderophore production. The aims of this work were to detect S. maltophilia siderophores and to determine their chemical nature. We studied 31 S. maltophilia isolates from device-associated infections, recovered over the period 2006-2011 at Hospital de Clínicas José de San Martin, Buenos Aires, Argentina, and the strain K279a, whose genome has been fully sequenced. The production of siderophores was screened by the chrome azurol S (CAS) agar assay, previously modified to detect siderophores in this species. When grown on modified CAS agar plates, all the clinical isolates and K279a were CAS-positive for siderophore production. In order to determine the chemical nature of siderophores, the Csáky (hydroxamate-type) and Arnow (catechol-type) assays were used. All S. maltophilia isolates produced catechol-type siderophores, but hydroxamate-type siderophores were not detected.<hr/>Stenotrophomonas maltophilia es un patógeno nosocomial emergente. A pesar de la variedad de infecciones que produce, poco se conoce acerca de sus factores de virulencia, incluida la producción de sideróforos. Nuestros objetivos fueron detectar sideróforos de S. maltophilia y determinar su naturaleza química. Se estudiaron 31 aislamientos provenientes de infecciones asociadas al uso de dispositivos médicos y la cepa K279a, cuyo genoma ha sido completamente secuenciado. Los aislamientos provenientes de infecciones se obtuvieron de pacientes asistidos en el Hospital de Clínicas José de San Martín (Buenos Aires, Argentina) en el período 2006- 2011. Como método de tamizaje se empleó la técnica chrome azurol S (CAS) en placa, luego de implementar una modificación para detectar sideróforos en esta especie. Dicha modificación permitió detectar la producción de sideróforos en todos los aislamientos. La naturaleza química de los sideróforos se determinó mediante las técnicas de Csáky (hidroxamatos) y Arnow (catecoles). S. maltophilia produjo sideróforos de tipo catecol, mientras que no se detectaron sideróforos de tipo hidroxamato. <![CDATA[Production and evaluation of a purified protein derivative from an Argentine strain of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP)]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300005&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Los derivados proteicos purificados (PPD) son mezclas antigénicas no definidas obtenidas de distintas micobacterias. Los PPD bovino (PPDb) y PPD aviar (PPDa) son los antígenos que se emplean para evaluar la respuesta inmunitaria celular en infecciones como tuberculosis y paratuberculosis en el bovino. El PPDa comercial se produce a partir de Mycobacterium avium subsp. avium, y no a partir de la subespecie paratuberculosis. En este trabajo se seleccionó una cepa local de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis cuyo patrón molecular por RFLP es el más frecuente entre los aislamientos de nuestro país que han sido estudiados, y a partir de esta, se obtuvo un derivado proteico purificado: PPDj-IB. Se emplearon tanto el PPDa comercial como el PPDj-IB como antígenos en la prueba de liberación de gamma-interferón en animales de un tambo con paratuberculosis y en animales control. Aun cuando ambos PPD fueron capaces de estimular diferencialmente la liberación de la citoquina en el tambo infectado (respecto de los tambos control), no hubo diferencias significativas en los niveles de estimulación producidos y solo dos animales fueron positivos mediante el empleo de PPDj-IB. A partir del análisis por Western blot se demostró que el contenido de lipoarabinomano y del antígeno Apa/ModD era distinto en los PDD evaluados. Estas diferencias podrían explicar, en parte, las diferencias en los niveles de estimulación en términos individuales. Si bien el empleo de PPDj-IB no mejoró significativamente los resultados de la prueba de liberación de ?IFN, es importante destacar que se logró producir en el laboratorio un PPD apto para su empleo en ensayos in vitro.<hr/>Purified Protein Derivatives (PPDs) are non-defined antigens prepared from mycobacteria cultures. They are usually employed to evaluate the specific cellular immune response both in animals and humans. Bovine and avian PPDs are usually employed as antigens in mycobacterial infections such as tuberculosis and paratuberculosis. Nevertheless, PPD from Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, (PPDj) is neither commonly used nor frequently available. However, PPD from Mycobacterium avium subsp. avium is in fact used. We aimed to obtain and evaluate the performance of a PPDj from a local isolate of MAP using the ãInterferon-release assay. The stimulation of ãInterferon-release was significantly different between infected and control cattle when this antigen, named PPDj-IB, was used. Stimulation in the infected animals was similar with both antigens (PPDa and PPDj-IB). However, some animals were positively stimulated with PPDj-IB and not with PPDa. We demonstrated by Western blot that two antigenic molecules, lipoarabinoman and APA/ModD antigen were differentially represented in both PPDs. This could explain the difference in stimulation induction of ?IFN observed at individual level. Although PPDj-IB could not improve PPDa performance, we could easily produce an effective purified protein derivative for in vitro assays. <![CDATA[Evaluation of direct susceptibility testing from blood culture bottles: Clinical usefulness]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300006&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Se realizó un estudio prospectivo observacional que incluyó 191 episodios de bacteriemia monomicrobiana por bacilos gram negativos en los que se combinó el uso del sistema Bact-Alert de hemocultivos con el sistema de identificación y sensibilidad Vitek 2C. Se compararon los resultados con los correspondientes a los de colonia aislada en medios sólidos. La correlación obtenida en la identificación fue del 99 %. Con respecto a la sensibilidad a los antibióticos, la correlación total en categoría fue del 99 % (0,22 % de errores muy mayores, 0,17 % de errores mayores y 0,61 % de errores menores). De los 191 episodios de infecciones del torrente sanguíneo, 108 (56,5 %) recibieron los antibióticos adecuados en forma empírica. Una vez comunicado el resultado del antibiograma directo del frasco, se cambió el tratamiento antibiótico en 116 episodios (60,7 %).<hr/>A prospective observational study was conducted in two hospitals of Buenos Aires city (Argentina); 191 clinically significant monomicrobial gram-negative bloodstream infections were included in the study, which combined the Bact-Alert System Blood culture machine and the Vitek 2C System. Organism identification and susceptibility results directly from blood culture bottles were compared with those obtained from cards inoculated with a standardized bacterial suspension obtained following subculture on agar. By comparing the results obtained from pure cultures with those by the Vitek 2C System as reference method, the agreement between the reference method and the direct identification from positive blood cultures was 99 %. By antimicrobial susceptibility testing, the overall categorical accuracy was 99 % (0.22 %, very major errors, 0.17 %, major errors and 0.61 %, minor errors). One hundred and eight (56,8 %) bloodstream infections were treated empirically with adequate antibiotics. After the results obtained directly from the bottles were reported, antimicrobial therapy was changed in 116 (60.7 %) of the episodes. <![CDATA[Fatal bacteremia related to Capnocytophaga sputigena in a hematological patient with type T non- Hodgkin lymphoma: Diagnosis by 16S rRNA gene sequencing]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300007&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Describimos un caso de bacteriemia fulminante asociada a Capnocytophaga sputigena en un paciente hematológico. El aislamiento fue identificado mediante la secuenciación genética de la subunidad 16S del ARNr.<hr/>We described a case of fatal bacteremia related to Capnocytophaga sputigena in a hematological patient. The strain was identified by 16S rRNA gene sequencing. <![CDATA[Utilization of bacteriological culture for increased diagnostic performance at a tuberculosis reference center hospital]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300008&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt The purpose of this study was to assess the increase in positive results of bacteriological diagnostic tests for tuberculosis with the utilization of culture at a referral hospital for tuberculosis (TB). A retrospective analysis was conducted based on the positive bacteriological results obtained at the Júlia Kubistchek Hospital. The number of bacteriological diagnoses was increased by 24.6 % with the utilization of culture of sputum samples and by 56.1% of bronchoalveolar lavage samples.With regard to pleural fluid, all six positive cultures were negative for bacilloscopy. Mycobacterium tuberculosis was isolated in 59.6 % of positive cultures. Since mycobacterial culture was not undertaken for all clinical samples, this procedure is an important laboratory routine at the Júlia Kubistchek Hospital in order to learn the real TB prevalence.<hr/>El objetivo de este estudio fue evaluar el aumento de la positividad en el diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis mediante el uso del cultivo en un hospital de referencia para tuberculosis. Se realizó un análisis retrospectivo de los resultados bacteriológicos positivos en el Hospital Júlia Kubitschek de Belo Horizonte, Brasil. Hubo un incremento en el diagnóstico bacteriológico con cultivo del 24,6 % en las muestras de esputo y del 56,1 % en las muestras de lavado broncoalveolar. En líquido pleural, de 6 cultivos positivos, todos fueron negativos por baciloscopía. En 59,6 % de los cultivos positivos se aisló Mycobacterium tuberculosis. Se concluye que el cultivo para micobacterias es importante en la rutina de laboratorio del Hospital Júlia Kubitschek para el conocimiento de la verdadera prevalencia de tuberculosis, ya que este procedimiento no se realiza en todas las muestras clínicas. <![CDATA[Immunoenzymatic evaluation of the recombinant SAPA protein of Trypanosoma cruzi in naturally infected dogs]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300009&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt En este trabajo evaluamos el antígeno recombinante SAPA (Shed Acute Phase Antigen) para la detección de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi en sueros de perros infectados naturalmente. La técnica utilizada fue el ELISA y los antígenos utilizados fueron un homogenato de parásitos de T. cruzi (ELISA-H) y el recombinante SAPA (ELISA-SAPA). Se analizaron 93 sueros de perros por ELISA-H y ELISA-SAPA, los que fueron agrupados de la siguiente manera: grupo 1 (G1), 11 sueros controles negativos de la ciudad de Salta; grupo 2 (G2), 11 sueros controles positivos, pertenecientes a perros infectados naturalmente con T. cruzi; y grupo 3 (G3), 71 sueros de perros pertenecientes a zona endémica de infección chagásica. La sensibilidad y la especificidad del ELISA-SAPA fueron del 100 %. El índice kappa entre ELISA-H y ELISA-SAPA fue de 0,85. Estos resultados confirman que es adecuado el uso del antígeno recombinante SAPA para el diagnóstico de la infección por T. cruzi en perros.<hr/>We evaluated the recombinant antigen SAPA (Shed Acute Phase Antigen) for the detection of Trypanosoma cruzi antibodies in sera from naturally infected dogs. The technique used was ELISA and the antigens were a homogenate of parasite T. cruzi (ELISA-H) and the recombinant SAPA (ELISA-SAPA). We analyzed 93 sera from dogs by ELISA-H and ELISA-SAPA, which were grouped as follows: G1: 11 negative control sera from the city of Salta, G2: 11 positive control sera from dogs naturally infected with T. cruzi and G3: 71 samples of dogs belonging to a Chagas disease-endemic area. The sensitivity and specificity of ELISA-SAPA were 100 %. The kappa index between ELISA-H and ELISA-SAPA was 0,85. These results confirm the use of SAPA antigen in the diagnosis of infection with T. cruzi in dogs. <![CDATA[Plasmid-Encoded AmpC (pAmpC) in Enterobacteriaceae: epidemiology of microorganisms and resistance markers]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300010&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt CMY-2 ß-lactamase is an important cause of ß-lactam resistance in Enterobacteriaceae and constitutes the most widespread pAmpC. Although CMY-2 has been previously recognized in our region, the real prevalence and epidemiology of this resistance marker was uncertain. During August-October 2009, we conducted a multicenter, prospective study to determine pAmpC prevalence and to characterize CMY-2 producing Escherichia coli associated plasmids. Plasmid-encoded AmpC prevalence was 0.9 % in enterobacteria in this period, being CMY- 2 prevalent and to a lesser extent DHA. Molecular typing of CMY-2- producing Escherichia coli isolates showed several lineages. Moreover, replicon typing of cmy-2- containing plasmids displayed a broad diversity in Inc/cmy- 2 links. Therefore, association of cmy-2 with specific transposon elements may be responsible for the spread of this resistance marker in Enterobacteriaceae.<hr/>La ß-lactamasa de tipo AmpC de codificación plasmídica CMY-2 es la de mayor diseminación a nivel mundial en Enterobacteriaceae. Esta ha sido comunicada esporádicamente en nuestro país. Entre agosto y octubre de 2009 se llevó a cabo un estudio prospectivo y multicéntrico con el objetivo de determinar la prevalencia de pAmpC en nuestro medio y de caracterizar a los microorganismos productores y a los plásmidos portadores de estos marcadores de resistencia. La prevalencia de pAmpC plasmídicas en enterobacterias en este período fue de 0,9 %. La ß-lactamasa CMY-2 fue la enzima prevalente y, en menor medida, la DHA. La tipificación molecular de los aislamientos de Escherichia coli productores de CMY-2 mostró la presencia de distintos linajes, y los plásmidos portadores de cmy-2 pertenecieron a una amplia diversidad de grupos de incompatibilidad. Se determinó la asociación corriente arriba de cmy-2 con ISEcp1, el cual podría ser responsable de la amplia diseminación de este marcador de resistencia en Enterobacteriaceae. <![CDATA[Association between milking practices and psychrotrophic bacterial counts in bulk tank milk]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300011&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt The objective of this work was to determine on-farm risk factors for psychrotrophic bacterial counts in bulk tank milk from dairy farms in Argentina. Raw milk samples from bulk tanks of 27 dairy farms were examined for total psychrotrophic counts (TPC), proteolytic psychrotrophic counts (PPC) and lipolytic psychrotrophic counts (LPC) (dependent or outcome variables). A survey recording infrastructure conditions, milking equipment and milking management (independent variables) was performed. Bivariate association proofs and logistic regression analyses were used to determine association between independent variables and psychrotrophic bacterial counts. Milk cooled in plate heat exchangers or barrel tanks were 16.39 and 10.52 times more likely to yield TPC and PPC above the standard established for high quality milk compared with milk cooled in bulk tanks, respectively. Periodic cleaning of cooling tanks (3 times a week or daily) was associated with lower TPC (approximately 1.5 log CFU/ml) than weekly cleaning frequency and farms where milkers did not wash their hands during milking time were 7.81 times more likely to have higher PPC. No association was found between LPC and any of the independent variables. The only variable associated with TPC and PPC in a logistic regression model was the refrigeration system used on the farm. Dairy farms that possessed bulk milk cooling tanks yielded the lowest bacterial counts. Results of this study highlight the importance of both the type of cooling system used on the farm and its adequate hygienic maintenance for obtaining low pshychrotrophic counts at dairy farm.<hr/>El objetivo del trabajo fue determinar los factores de riesgo para altos recuentos de organismos psicrótrofos en leche de tanques de tambos de la Argentina. Se examinaron muestras de leche cruda de tanques de frío de 27 tambos, y se realizó el recuento de organismos psicrótrofos totales (PT), de psicrótrofos proteolíticos (PP) y de psicrótrofos lipolíticos (PL) (variables dependientes). Se realizó una encuesta para registrar las condiciones de infraestructura, el equipo de ordeño y las prácticas de ordeño (variables independientes). Se utilizaron pruebas bivariadas de asociación y regresión logística para determinar la asociación entre las variables independientes y los recuentos de organismos psicrótrofos. La leche enfriada en sistemas de placas de intercambio o tanques tipo cuba tuvo una probabilidad mayor de dar recuentos elevados de PT y PP (16,39 y 10,52) comparada con la enfriada en tanques tipo "panza fría". La limpieza periódica del equipo de frío (3 veces por semana o diariamente) se asoció con bajos recuentos de PT (aproximadamente 1,5 log de UFC/ml). Los tambos cuyos ordeñadores no se higienizaban las manos durante el ordeño tuvieron una probabilidad 7,81 veces mayor de tener recuentos elevados de PP. No se encontró asociación entre el recuento de PL y las variables independientes. La única variable asociada con los recuentos de PT y PP en el modelo de regresión logística fue el sistema de enfriamiento utilizado en el tambo. El tipo de sistema de refrigeración usado y su adecuado mantenimiento higiénico son importantes para la obtención de leche con baja carga de organismos psicrótrofos en el tambo. <![CDATA[Characterization of Listeria monocytogenes isolates from cattle and ground beef by pulsed-field gel electrophoresis]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300012&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt The aims of this study were to determine the occurrence of Listeria monocytogenes in cattle feces and ground beef, to characterize these strains by pulsed-field gel electrophoresis and to compare them to three listeria strains found in humans. Cattle from different origins (n = 250) and ground beef obtained from supermarkets (n = 40) were sampled. The results show low occurrence in cattle feces (0.4 %) but a higher presence in ground beef (37 %). An important part of the ground beef strains (80 %) had > 95 % similarity with a strain isolated from a human sporadic case and the ATCC 19115 used as control. The strain isolated from cattle feces had 93 % similarity to clone 009, previously associated with a listeriosis outbreak related to cheese. Cattle and ground beef can harbor virulent L. monocytogenes strains. Further studies in animals and animal products are needed to improve listeriosis control.<hr/>Los objetivos de este estudio fueron determinar la presencia de Listeria monocytogenes en el ganado y en la carne molida de vacuno comercializada en Chile, caracterizar los aislados mediante electroforesis de campo pulsado y compararlos con los obtenidos en tres cepas que han producido listeriosis en humanos, en ese país. Se tomaron muestras de heces de bovinos (n = 250) y de carne molida obtenida en supermercados (n = 40). Se encontró una baja incidencia de este patógeno en las heces de bovinos (0,4 %; un solo animal), pero mayores porcentajes en la carne molida (37 %). Gran parte de las cepas encontradas en la carne molida (80 %) mostraron una similitud mayor del 95 % con un caso esporádico de listeriosis y con la cepa de referencia ATCC 19115. La cepa aislada de bovino tuvo un 93 % de similitud con el clon 009, responsable de un brote asociado al consumo de queso, ocurrido en 2008. Se concluye que el ganado y la carne molida pueden albergar cepas virulentas de L. monocytogenes. Se necesita un mayor número de estudios en animales y en los productos que se obtienen de ellos para mejorar el control de la listeriosis. <![CDATA[Bovine paratuberculosis: a review of the advantages and disadvantages of different diagnostic tests]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300013&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Paratuberculosis (PTB), or Johne's disease, is a chronic infectious granulomatous enteritis of ruminants, caused by Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map). It is characterized by diarrhea and progressive cachexia, which may cause the death of the animal. Calves are the most susceptible to infection. Infected animals excrete Map mainly by the feces. PTB is endemic worldwide, with high prevalence levels, strong economic impact and public health relevance because of its possible association with Crohn's disease. Although the current reference diagnostic test is identification of Map in the bacterial culture, there are different diagnostic tests to identify infected individuals and/or herds. The sensitivity and specificity of these tests vary according to the stage of the disease in the animals to be evaluated. The correct choice and application of each of these diagnostic tests will ensure their success and may allow to establish a control program. The aim of this work is to review and discuss the different diagnostic tests used in the detection of Map-infected animals, focusing on their advantages and disadvantages.<hr/>La paratuberculosis (PTBC) o enfermedad de Johne es una enteritis granulomatosa crónica de rumiantes, causada por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). Se caracteriza por producir diarrea y caquexia progresiva, la cual conduce a la muerte del animal. Los terneros son los animales más proclives a la infección. Los animales infectados excretan Map, principalmente por las heces. La PTBC es una enfermedad endémica a nivel mundial, con altos niveles de prevalencia, fuerte impacto económico e importancia en salud pública, debido a su posible asociación con la enfermedad de Crohn. Aunque la prueba de referencia diagnóstica es la identificación de Map en cultivo bacteriológico, existen diferentes pruebas diagnósticas para detectar animales o rodeos infectados. La sensibilidad y especificidad de estas pruebas varían según el estadio de la enfermedad de los animales que se evalúan. La correcta elección y aplicación de cada una de estas pruebas asegura el éxito del diagnóstico y permite establecer un programa de control. El objetivo de este trabajo es la recopilación y discusión de las diferentes pruebas diagnósticas utilizadas en la detección de los animales infectados por Map, concentrándose en sus ventajas y desventajas. <![CDATA[Advances in the development of vaccines for bovine neosporosis]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300014&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt La neosporosis es una enfermedad que ocasiona abortos en bovinos y está causada por un protozoo intracelular obligado denominado Neospora caninum. Las graves pérdidas económicas que provoca en los sistemas de producción de bovinos justifica la necesidad de avanzar en el desarrollo de vacunas. La resistencia a parásitos Apicomplexa está asociada a una respuesta inmune T helper 1 mediada por linfocitos T CD4 citotóxicos y a la producción de interferón-gamma, interleuquina-12, factor de necrosis tumoral e inmunoglobulina G2. La disminución de la transmisión vertical en las sucesivas preñeces y el bajo nivel de repetición de abortos en animales infectados sugieren la existencia de mecanismos inmunitarios de protección. Hasta el momento se conoce que la inoculación pre-servicio con taquizoítos vivos protege contra la infección y el aborto. Los antecedentes de desarrollo de vacunas vivas contra otros protozoos estimulan a los investigadores a continuar en la búsqueda de una vacuna de este tipo contra N. caninum de buena eficacia. Por otra parte, una vacuna inactivada, aun con una baja eficacia, es útil en la prevención del aborto en aquellos establecimientos donde la enfermedad es epizoótica. Una vacuna contra la neosporosis debería evitar el aborto, la transmisión transplacental y la persistencia de la infección. Este trabajo menciona los diversos tipos de vacunas que han sido evaluados hasta el momento, incluyendo inmunógenos inactivos, taquizoítos vivos, antígenos recombinantes y vacunas en vectores.<hr/>Neosporosis, a disease caused by the obligate intracellular protozoan Neospora caninum, produces abortions in cattle. The severe economic losses in cattle industry justify the need to develop control measures for preventing bovine abortion. Apicomplexan parasitic resistance is associated with T helper 1 immune response mediated by CD4 cytotoxic T lymphocytes, the production of interferon-gamma, interleukin-12, tumor necrosis factor and immunoglobulin G2. The reduction of vertical transmission in subsequent pregnancies and the low levels of abortion repetition suggests the existence of protective immune mechanisms. Inoculation with live tachyzoites before mating protects against infection and abortion. Antecedents of the development of live vaccines against other protozoa stimulate research to develop a live vaccine against N. caninum. On the other hand, an inactivated vaccine with low efficacy against neosporosis is useful in the prevention of abortion in farms with epizootic disease. A neosporosis vaccine should avoid abortion, transplacental transmission and infection persistence. In the present work, advances in vaccine development including lysate of tachyzoites, live parasites, recombinant antigens and vaccine vectors are reviewed. <![CDATA[Trichosporon asahii]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300015&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt La neosporosis es una enfermedad que ocasiona abortos en bovinos y está causada por un protozoo intracelular obligado denominado Neospora caninum. Las graves pérdidas económicas que provoca en los sistemas de producción de bovinos justifica la necesidad de avanzar en el desarrollo de vacunas. La resistencia a parásitos Apicomplexa está asociada a una respuesta inmune T helper 1 mediada por linfocitos T CD4 citotóxicos y a la producción de interferón-gamma, interleuquina-12, factor de necrosis tumoral e inmunoglobulina G2. La disminución de la transmisión vertical en las sucesivas preñeces y el bajo nivel de repetición de abortos en animales infectados sugieren la existencia de mecanismos inmunitarios de protección. Hasta el momento se conoce que la inoculación pre-servicio con taquizoítos vivos protege contra la infección y el aborto. Los antecedentes de desarrollo de vacunas vivas contra otros protozoos estimulan a los investigadores a continuar en la búsqueda de una vacuna de este tipo contra N. caninum de buena eficacia. Por otra parte, una vacuna inactivada, aun con una baja eficacia, es útil en la prevención del aborto en aquellos establecimientos donde la enfermedad es epizoótica. Una vacuna contra la neosporosis debería evitar el aborto, la transmisión transplacental y la persistencia de la infección. Este trabajo menciona los diversos tipos de vacunas que han sido evaluados hasta el momento, incluyendo inmunógenos inactivos, taquizoítos vivos, antígenos recombinantes y vacunas en vectores.<hr/>Neosporosis, a disease caused by the obligate intracellular protozoan Neospora caninum, produces abortions in cattle. The severe economic losses in cattle industry justify the need to develop control measures for preventing bovine abortion. Apicomplexan parasitic resistance is associated with T helper 1 immune response mediated by CD4 cytotoxic T lymphocytes, the production of interferon-gamma, interleukin-12, tumor necrosis factor and immunoglobulin G2. The reduction of vertical transmission in subsequent pregnancies and the low levels of abortion repetition suggests the existence of protective immune mechanisms. Inoculation with live tachyzoites before mating protects against infection and abortion. Antecedents of the development of live vaccines against other protozoa stimulate research to develop a live vaccine against N. caninum. On the other hand, an inactivated vaccine with low efficacy against neosporosis is useful in the prevention of abortion in farms with epizootic disease. A neosporosis vaccine should avoid abortion, transplacental transmission and infection persistence. In the present work, advances in vaccine development including lysate of tachyzoites, live parasites, recombinant antigens and vaccine vectors are reviewed.