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Uso de análisis genéticos y comportamentales en el manejo en cautiverio del mono de noche Aotus azarae (Platyrrhini: Cebidae)

Zoological gardens provide a unique and valuable resource for primate research. Knowledge on acclimatizing and behavioral pattern of night monkeys (Aotus azarae) in captivity is scarce. Here, we aim to characterize the activity budget of a group of Aotus azarae housed at the Córdoba Zoo, Argentina. The taxonomic level of the specimens was confirmed by karyological analysis using different chromosomal variables. Behavioral data were collected via scan sampling, recording eight behavioral categories. The main activity of the group was resting. Social behavior was influenced by the moment of the day. The obtained activity budget will allow establishing a baseline for future management and environmental enrichment plans.

Los jardines zoológicos proveen un recurso único y valioso para la investigación en primatología. El conocimiento sobre la aclimatación y el patrón de actividad en cautiverio de los monos de noche (Aotus azarae) es escasa. En este trabajo caracterizamos el presupuesto de actividad de un grupo de Aotus azarae en cautiverio en el zoológico de Córdoba, Argentina. El estatus taxonómico de los especímenes fue determinado mediante análisis cariológicos utilizando distintas variables cromosómicas. Los datos de comportamiento se colectaron mediante la técnica de barrido, registrándose 8 categorías comportamentales. La principal actividad del grupo fue descanso. El comportamiento social estuvo influenciado por el momento del día. El presupuesto de actividad obtenido permitirá establecer una línea base para futuros planes de manejo y enriquecimiento ambiental.

Variabilidad del gen RYR1 y efecto en el pH de la carne en cerdos híbridos argentinos

The RYR1 gene is the principal cause of the porcine stress syndrome (PSS) and the presence of pale, soft and exudative meat (PSE) in swine. In Argentina there are no reports about the variability of RYR1 gene in hybrid swine and its effect on the quality of carcass. By PCR-HRM we analyzed 403 hybrids swines from Argentina and 65.0% were homozygous NN, 30.8% heterozygous Nn and 4,2% homozygous nn. Additionally, a significant effect (p <0.0001) of the RYR1 gene was detected on the pH of carcass at 45 minutes after slaughter. Normal genotypes NN showed the highest pH values at 45 minutes after slaughter (6.27), heterozygous Nn showed intermediate pH values (5.94) and homozygous susceptible nn showed the lowest pH values (5.64). Argentina present high incidence of Nn and nn genotypes for the RYR1 gene in relation to Brazil, the principal pig producer of Latin America. Additionally the RYR1 gene affects the pH of the meat, one of the principal parameters in the determination of the PSE meat.

El gen RYR1 es la principal causa del síndrome de estrés porcino (PSS) y la presencia de carne pálida, blanda y exudativa (PSE) en los cerdos. En Argentina no existen informes sobre la variabilidad de dicho gen en cerdos híbridos y su efecto sobre la calidad de la canal. Por PCR-HRM se analizaron 403 cerdos híbridos de Argentina y el 65,0% eran homocigotos NN, 30.8% heterocigotos Nn y el 4,2% homocigotos nn. Además, se detectó un efecto significativo (p <0,0001) del gen RYR1 en el pH de la canal a los 45 minutos post faena. Los genotipos NN mostraron los mayores valores de pH a los 45 minutos después del sacrificio (6.27), los heterocigotos Nn mostraron valores intermedios de pH (5,94) y los homocigotos nn presentaron los valores más bajos de pH (5,64). Argentina presenta alta incidencia de los genotipos Nn y nn del gen RYR1 en relación a Brasil, el principal productor de cerdos de América Latina. Además, el gen RYR1 afecta al pH de la carne, uno de los principales parámetros para la determinación de carnes PSE.

Supervivencia y capacidad infectiva de larvas criopreservadas de nematodes trichostrongylideos

La criopreservación de larvas infectantes (L3) ha permitido mantener nematodes gastrointestinales en laboratorio por prolongados periodos. El objetivo de este trabajo fue determinar la tasa de supervivencia y la capacidad infectiva post-descongelado de L3 de nematodes gastrointestinales. Para ello se utilizaron L3 denominadas Ayacucho y Balcarce, que fueron desenvainadas y posteriormente congeladas en nitrógeno líquido. Transcurrido un período de 3 y 7 meses, las larvas fueron descongeladas calculándose la tasa de supervivencia (%) considerando la movilidad como vital. La capacidad infectiva se determinó mediante la excreción de huevos en materia fecal de ovinos infectados con L3 criopreservadas. La supervivencia post-descongelado fue 31-70% a los 3 meses y 68-72% a los 7 meses. Los animales comenzaron a eliminar huevos a los 21 días post-inoculación, independientemente del tiempo de congelado y del origen de las larvas. Se destaca la contribución significativa a la investigación en parasitología veterinaria de la técnica de criopreservación.

Cryopreservation of gastrointestinal nematode infective larvae (L3) has been used to preserver gastrointestinal nematodes in laboratory for a long time. The aim of this study was to establish the survival and infective capability of infective larvae after cryopreservation. A total of 2 isolates named as Ayacucho and Balcarce were used and L3 were exsheathed and thereafter, frozen in liquid nitrogen. Rate of survival (%) was estimated taking into account larval motility after thawing as discriminate factor for live/dead at 3 and 7 months from freezing. Six lambs were infected orally with L3 previously cryopreserved. The nematode infection was monitored through egg excretion in faeces. The rate of survival was 31-70% at 3 months and 68-72% at 7 months of freezing. Nematode eggs in faeces samples were detected at 3 weeks after infection being recorded no differences among isolates and/or freezing period of time. Advantages of the cryopreservation in nematodes research are emphasizing.

Seroepidemiología y control de trichinellosis en cerdos en Sierra Grande, Argentina

La zona de Sierra Grande, en la provincia de Río Negro, Argentina, se ha visto particularmente afectada por la trichinellosis, la cual sigue siendo endémica a nivel local. En el año 2000 fue diseñado un estudio descriptivo para conocer la historia natural de la trichinellosis en la zona. Durante el período 2001-2010 se llevó a cabo un programa de control en cerdos basado en la detección temprana de anticuerpos específicos mediante enzimoinmunoensayo (ELISA) con confirmación mediante Western blot y el sacrificio de los cerdos positivos. Así, el objetivo del presente trabajo fue evaluar los resultados del programa de control implementado en la reducción de la prevalencia de trichinellosis en cerdos en la localidad de Sierra Grande. Los primeros resultados (2001/02) mostraron que de 179 cerdos estudiados, 36 (20,1%) fueron positivas al sistema diagnóstico (ELISA/WB). En 2007/08 un total de 277 cerdos de 17 criaderos de cerdos fueron estudiados y sólo 4 (1,4%) fueron positivos. En 2009/10 todos los cerdos fueron negativos. No se produjeron casos humanos durante el período de trabajo. El programa de control basado en el sacrificio de cerdos que presentaron anticuerpos específicos anti - Trichinella sp. resultó exitoso en limitar la prevalencia de la enfermedad.

The Sierra Grande area, in the province of Río Negro, Argentine, has been particularly affected by trichinellosis, wich remains locally endemic. In the year 2000 a descriptive study was designed to recognize the natural history of trichinellosis in the area and over the period 2001 - 2010 a control program was carried out with early detection of infected pigs using serology by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) screening confirmed by Western blot and slaughter and destruction infected pigs. The aim of this study is evaluate the results of control program implemented to reduce the prevalence of trichinellosis in pigs in this area. First results (2001/02) showed that out of 179 pigs studied, 36 (20.1%) were positive. In 2007/08 a total of 277 pigs from 17 breeding farms were studied and only 4 (1.4%) were positive. In 2009/10 all the pigs were negative. No human cases were found during the working period. The control program based on the slaughter of pigs that were serologically positive was successful to limit the prevalence of the disease.

Resistencia de los pequeños estrongílidos (grupo ciatostoma) a los bencimidazoles en equinos del área central de Argentina

El objetivo del presente estudio fue evaluar el estado actual de la eficacia de bencimidazoles para el control de pequeños estrongílidos que parasitan a equinos en el área central de Argentina. Se desarrollaron dos experiencias con un total de 107 equinos. La primera, en seis establecimientos con antecedentes de uso de bencimidazoles y la segunda, en equinos cuya historia previa de tratamientos antihelmínticos era desconocida. En todos los animales se realizó un test de reducción en el conteo de huevos (TRCH) luego del tratamiento con una formulación oral de mebendazole al 14% y triclorfon al 48% a la dosis de 5 gr/100 kg de peso vivo. El TRCH se realizó comparando promedios (primer experiencia) o valores individuales (segunda experiencia) del número de huevos pre y post tratamiento. Se observó resistencia a esta droga en todos los establecimientos de la primera experiencia y en aproximadamente el 60% de animales pertenecientes a la segunda. Los coprocultivos post tratamiento mostraron solo larvas de tercer estadio pertenecientes a pequeños estrongílidos. Los resultados de este estudio indican que las poblaciones de pequeños estrongílidos con resistencia a bencimidazoles son extremadamente comunes en el área central de Argentina.

The aim of this study was to evaluate the current state of the efficacy of benzimidazoles for control of small strongyles that parasitize horses in the central area of Argentina. In this context, two experiences were conducted involving a total of 107 horses. The first of these experiences was developed in six farms with a history of use of benzimidazoles and the second in horses whose past history of anthelmintic treatment was unknown. In both experiences a test of fecal egg count reductions (FECR) was carried out after treatment with an oral formulation of mebendazole 14% and triclorfon 48% at the dose of 5gr /100 kg of weight. The FECR was performed by comparing the averages (first experience) or individual values (second experience) on the number of eggs before and after treatment. Resistance to febendazole was observed in all farms in the first experience and approximately 60% of the horses in the second experience. Larval cultures after treatment showed only ciathostome third stage larvae. The results of this study indicate that populations of small strongyles resistant to benzimidazoles are extremely common in the central area of Argentina.

Propuestas vacunales para el tratamiento de la fasciolosis en rumiantes, un desafío aún no resuelto

La fasciolosis producida por el trematodo Fasciola hepatica es una enfermedad que provoca importantes pérdidas económicas en la producción ganadera siendo además una preocupante enfermedad zoonótica. Actualmente, la única herramienta disponible para el control de dicha enfermedad es la utilización de fármacos antiparasitarios. Hoy, la aparición de fenómenos de resistencia antiparasitaria llevan a la búsqueda de nuevas opciones terapéuticas. La búsqueda de antígenos vacunales para el desarrollo de una vacuna eficaz es una de las herramientas más investigadas. En el presente artículo se expone una revisión de los principales resultados obtenidos hasta el momento en la búsqueda de diversos candidatos vacunales. Se comparan diferentes intentos de vacunas experimentales: desde vacunas irradiadas atenuadas, hasta las nuevas estrategias que involucran el desarrollo de vacunas recombinantes y de ADN en el modelo ratón y en el huésped susceptible.

The use of an effective vaccine against fasciolosis is currently and due to advances in the field, an achievable goal. This article is a review of recent data and the main results about the search for vaccine candidates against fasciolosis. In the present work it presents the search done and results from the use of attenuated vaccines irradiated to new strategies that involve the development of recombinant vaccines and DNA.

Características biológicas de cepas de Herpesvirus bovino 1 y 5 utilizando el modelo experimental conejo

Los Herpesvirus bovinos (BoHV) pueden infectar tanto a mustélidos como a conejos y esta última especie ha sido utilizada como modelo de laboratorio para la infección por BoHV-1 y 5. El objetivo de este trabajo fue estudiar la patogenicidad de diferentes cepas argentinas de BoHV-1 y BoHV-5 utilizando el modelo experimental conejo. Se utilizaron conejos de raza neozelandesa que se inocularon por vía intranasal e intravaginal. Los animales inoculados por vía intranasal con cepas de BoHV-5 desarrollaron signos nerviosos en el 83% de los casos, mientras que BoHV-1.1 causó signos nerviosos en el 57% de los animales y BoHV-1.2 no provocó signos clínicos evidentes. El BoHV-5 causó síntomas nerviosos solo en los animales jóvenes mientras que BoHV-1 solo lo hizo ocasionalmente y también en individuos jóvenes. Los conejos inoculados por vía intravaginal no mostraron signos clínicos ni lesiones aparentes en los órganos estudiados; la infección se demostró por seroconversión serológica. El conejo resultó adecuado para estudiar la sintomatología y las lesiones producidas en los distintos órganos, fundamentalmente en el sistema nervioso central. El modelo resultó de utilidad por ser económico, de muy fácil manejo y permitió reconocer diferencias en el comportamiento biológico de las cepas de BoHV-1 y BoHV-5 estudiadas.

Bovine Herpesvirus (BoHV) can infect both rabbits and mustelids. Rabbit has been used as a laboratory model for infection with BoHV-1 and 5. The objective of this research was to study the pathogenicity of different Argentinian BoHV-1 and BoHV-5 strains by using the rabbit experimental model. New Zealand rabbits were inoculated by intranasal and intravaginal ways. The animals inoculated intranasally with strains of BoHV-5 developed neurological signs in 83% of the cases. BoHV-1.1 caused neurological signs in 57% of the animals and BoHV-1.2 did not cause clear clinical signs. BoHV-5 caused nervous signs in young animals while BoHV-1 did so occasionally in young rabbits. Animales inoculated intravaginally showed no apparent clinical signs or apparent lesions in the studied organs. The infection was demonstrated by serological seroconversion. The rabbit was appropriate to study the clinical signs and the lesions produced in the different organs, primarily in the central nervous system. The model was useful for being inexpensive and very easy to use, and it enabled to identify differences in the biological behavior of the studied BoHV-1 and BoHV-5 strains.

Estudio de la interferencia serológica en el diagnóstico de la brucelosis bovina en el modelo murino

En Argentina, el control de la brucelosis bovina se apoya en la vacunación obligatoria de las terneras con la cepa 19 de Brucella abortus y en la eliminación de los animales seropositivos con destino a faena. Las pruebas serológicas que se emplean más frecuentemente son el BPA (Buffered Plate Antigen) (prueba tamiz) y el FPA (Fluorescence Polarization Assay) (prueba confirmatoria). Ambas detectan anticuerpos anti-cadena O del polisacárido inducidos por la vacunación o por la infección con brucelas de campo. En ocasiones se han encontrado, en un contexto de ausencia de enfermedad clínica, reacciones serológicas atípicas en bovinos adultos. Las mismas han sido atribuidas a la presencia de anticuerpos de reacción cruzada inducidos por vacunas que contienen bacterias Gram negativas. Los objetivos del presente trabajo desarrollado en el modelo murino fueron: estudiar la interferencia en el diagnóstico de la brucelosis bovina generada por la administración de vacunas comerciales que contienen bacterias Gram negativas e identificar las cepas vacunales responsables de la reacción cruzada. En un primer ensayo se vacunaron ratones BALB/c hembras con 9 biológicos de aplicación en bovinos. En un segundo ensayo se inmunizaron ratones con las bacterias Gram negativas (bacterinas) contenidas en las vacunas. Se incluyeron como grupos control, animales vacunados con la cepa 19 de B. abortus y animales inoculados con B. abortus 544. Se realizaron sangrías periódicas y los sueros fueron analizados en las pruebas de BPA modificada y FPA. Los resultados obtenidos indican que 6/9 vacunas empleadas indujeron una respuesta serológica de corta duración que sólo fue detectada por la prueba de BPA en un porcentaje variable de animales por grupo. Por otro lado, las bacterinas que indujeron la serología más persistente en ambas pruebas fueron: Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica. Por lo anteriormente expuesto, los anticuerpos generados por las vacunas empleadas en este trabajo no tendrían un impacto significativo en el diagnóstico de la brucelosis bovina en el modelo murino.

The National Programme of Control and Eradication of Bovine Brucellosis in Argentina involves the vaccination of female calves between 3 and 8 months of age with B. abortus S19, and elimination of seropositives reactors. Commonly used serological tests are BPA (Buffered Plate Antigen) and FPA (Fluorescence Polarization Assay) as screening and confirmatory tests, respectively. Both detect antibodies to the O-chain (OPS) induced by vaccination or by field strains. Occasionally, false positive reactions were found in healthy adult bovine induced by cross reaction antibodies stimulated by the administration of vaccines composed of Gram negative bacteria. The aims of this work were to study in the mouse model: a) the crossreactivity in diagnosis of bovine brucellosis induced by administration of commercial vaccines that contain Gram negative bacterins and b) the identification of vaccinal strains that induced crossreactivity. In the Experiment I, female Balb/c mice were vaccinated with 9 bovine commercial vaccines. In the second experiment, groups of mice were immunized with Gram negative bacterias (bacterins) contained in vaccines used in this study. As positive control groups, mice vaccinated with 19 strain and other inoculated with B. abortus 544 were included. Periodic bleedings were performed and sera were analized in modified BPA and FPA tests. The results showed that 6/9 vaccines induced a short-term serological response detected only by BPA in a variable percentage of animals per group. On the other hand, the bacteria that induced most persistent serology in both tests were Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica. According to our results, the antibodies induced by vaccines used in this work would not have a significant impact on the diagnosis of bovine brucellosis in the murine model.

Actividad antibacteriana y ensayos de toxicidad aguda y subaguda de Polygonum hidropiperoides

Se evaluó la presencia de toxicidad y se determinó la concentración inhibitoria mínima de extractos obtenidos a partir de Polygonum hidropiperoides sobre cepas bacterianas de colección, Staphylococcus aureus (ATCC 25923) y Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) y de campo, Streptococcus equi, Proteus spp, y Escherichia coli. Para estudiar la actividad antimicrobiana con el método de dilución en agar se utilizó el extracto metanólico. Los ensayos de toxicidad aguda y subaguda se llevaron a cabo en ratones utilizando una dosis única de 5000 mg/kg y una dosis diaria durante 14 días de 1250 mg/kg de extracto hidroalcohólico, respectivamente. La concentración inhibitoria mínima de extracto metanólico de Polygonum hidropiperoides fue de 0,18 mg/ml para Streptococcus equi, Proteus spp, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis y de 0,37 mg/ml para Escherichia coli. Los ensayos de toxicidad no evidenciaron cambios funcionales u orgánicos en los animales de experimentación. Los resultados obtenidos dan sustento a la investigación de la actividad antimicrobiana in vivo para determinar el valor fitoterapéutico de la especie.

The presence of toxicity was evaluated and the minimum inhibitory concentration of extracts from Polygonum hidropiperoides in bacterial strains collection of Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) and Streptococcus equi, Proteus spp and Escherichia coli field strains was determined. To study the antimicrobial activity by the agar dilution method, the methanol extract was used. Acute and subacute toxicity assays were carried out in mice using a single dose of 5000 mg/kg and a daily dose for 14 days of 1250 mg/kg of hydroalcoholic extract, respectively. The minimum inhibitory concentration of methanol extract of Polygonum hidropiperoides was 0.18 mg/ ml for Streptococcus equi, Proteus spp, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and 0.37 mg/ ml for Escherichia coli. Toxicity assays showed no functional or organic changes in experimental animals. The results obtained give support to the investigation of the antimicrobial activity in vivo to determine the phytotherapeutic value of the species.

Vitrificación de tejido ovárico porcino: efecto de diferentes agentes crioprotectores en la preservación de la morfología de folículos preantrales

La vitrificación de tejido ovárico permite conservar gran cantidad de ovocitos contenidos en folículos preantrales (FPA). El objetivo del presente trabajo fue analizar el efecto de distintas combinaciones de crioprotectores en la preservación de la estructura histológica de FPA porcinos durante la exposición (toxicidad) y en el proceso de vitrificación. Se analizó la respuesta frente a etilenglicol, dimetilsulfóxido (DMSO), y etilenglicol + DMSO, en presencia de sacarosa (0,25M); y la respuesta a etilenglicol asociado a concentraciones crecientes de sacarosa (0M; 0,25M; 0,75M y 1,0M). Los FPA primordiales tratados con etilenglicol presentaron menor cantidad de alteraciones morfológicas que los expuestos a DMSO y a la combinación de etilenglicol + DMSO (Control: 87%; etilenglicol: 52%; DMSO: 17% y etilenglicol + DMSO: 26%; Friedman, p<0,05). En los FPA primarios el etilenglicol resultó menos tóxico (Control: 70%; etilenglicol: 34%), mientras que la respuesta a la vitrificación del grupo etilenglicol + DMSO fue superior (20%). La vitrificación en presencia de concentraciones crecientes de sacarosa disminuyó significativamente el porcentaje de folículos primordiales normales (Control: 64%; 0M: 48%; 0,25M: 42%; 0,75M: 12%; 1M: 9%). Para todos los tratamientos, los folículos primarios presentaron más daños. En conclusión, el medio de elección para la vitrificación resultó ser TCM 199-Hepes con 30% etilenglicol y 0 o 0,25M de sacarosa.

Ovarian tissue vitrification allows storage of large numbers of oocytes contained in preantral follicles (PAF). The aim of the present study was to analyze the effect of different combinations of crioprotective agents in the preservation of porcine PAF histologic structure during the exposition (toxicity) and vitrification processes. The responses of oocytes to ethylene glycol, dimethyl sulfoxide (DMSO) and a combination of both, with the addition of sucrose (0,25 M), and to ethylene glycol associated to growing concentrations of sucrose (0M; 0,25M; 0,75M and 1,0M) were analyzed. Primordial PAF treated with ethylene glycol presented fewer morphological abnormalities than the ones exposed to DMSO and ethylene glycol + DMSO combined (Control: 87%; etilenglicol: 52%; DMSO: 17% y etilenglicol + DMSO: 26%; Friedman p<0,05). In primary PAF, etilenglicol was the least toxic (Control: 70%; etilenglicol: 34%), while vitrification response of the ethylene glycol + DMSO group was superior (20%). Vitrification with growing concentration of sucrose led to reduction of normal primordial follicles percentage (Control: 64%; 0M: 48%; 0,25M: 42%; 0,75M: 12%; 1M: 9%). In all treatments, primary follicles were more damaged. In conclusion, the culture media of choice for vitrification was TCM 199-Hepes with 30% etilenglicol and 0 or 0,25M sucrose.

Apoptosis inducida por un análogo de GnRH en una línea celular de granulosa de ovario bovino (BGC-1)

Gonadotrophin releasing hormone receptors (GnRHR) have been identified in ovarian granulosa cells (GC) and luteal cells (CL). It has also been observed that the activation of GnRHR in GC regulates gonadal function. Studies using GnRH agonists (GnRHa) in rat ovaries, in vivo and in vitro, showed an increase in follicular atresia. Our objective was to study the regulation of apoptosis inan established line of bovine granulosa cells (BGC-1) usin gleuprolide acetate (LA) as GnRHa and ANTIDE as competitive antagonist. Our results demonstrate a significant increase in the proportion of apoptotic cells induced for 24 and 48 hs with 100 nM LA by morphological techniques (DAPI staining and Hematoxilin), membrane markers expression (Annexin V-FITC and PI detected by flow cytometry) and biochemical techniques such as determining caspase 3 activity. Apoptosis was partially inhibited by ANTIDE, showing per se activity when caspasa 3 activity was evaluated. The analysis of the intracellular pathways regulating the apoptotic process revealed the existence of a mechanism that involves the activation of the intrinsic pathway, throughthe analysis of protein expression of Bcl-2 family (Bax and Bcl-2) andtheinhibition of the extrinsic pathway by inhibiting the activity of the enzyme phospholipase D (PLD). It is proposed that ANTIDE works as antagonist of the intrinsic pathway but as extrinsic pathway agonist as inhibiting the activity of PLD.

Se han identificado receptores de la hormona liberadora de gonadotrofina (GnRHR) en células de granulosa ovárica (CG) y en células luteales (CL). Asimismo, se ha observado que la activación de los GnRHR en CG regula la función gonadal. Estudios realizados utilizando agonistas de GnRH (GnRHa) en ovarios de ratas, in vivo e in vitro, demostraron un incremento de la atresia folicular. Nuestro objetivo fue estudiar la regulación de la apoptosis en una línea establecida de células de granulosa de ovario bovino (BGC-1) utilizando el acetato de leuprolide (LA) como GnRHa y el ANTIDE como antagonista competitivo. Nuestros resultados demuestran un aumento significativo de la proporción de células apoptóticas inducidas durante 24 y 48 h con 100 nM LA, confirmado mediante técnicas morfológicas (tinción con DAPI y Hematoxilina), técnicas de expresión de marcadores en membrana (Anexina V-FITC y PI detectada por citometría de flujo) y técnicas bioquímicas como la determinación de la actividad de caspasa 3. La apoptosis fue parcialmente inhibida por el ANTIDE, registrándose una actividad per se del mismo cuando se evaluó actividad de caspasa 3. El análisis de las vías intracelulares de regulación del proceso apoptótico reveló la existencia de un mecanismo que involucra la activación por la vía intrínseca, a través del análisis de la expresión de proteínas de la familia Bcl-2 (Bax y Bcl-2) y la inhibición de la vía extrínseca, a través de la inhibición de la actividad de la enzima fosfolipasa D (PLD). Proponemos que el ANTIDE actúa como antagonista de la vía intrínseca pero como agonista de la vía extrínseca inhibiendo la actividad de PLD.