Scielo RSS <![CDATA[BAG. Journal of basic and applied genetics]]> http://www.scielo.org.ar/rss.php?pid=1852-623320150001&lang=pt vol. 26 num. 1 lang. pt <![CDATA[SciELO Logo]]> http://www.scielo.org.ar/img/en/fbpelogp.gif http://www.scielo.org.ar <![CDATA[Determination of survival motor neuron (SMN) genes copy numbers in a sample of healthy population from southern Spain]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-62332015000100001&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Copy number analysis of the SMN (Survival Motor Neuron) genes in healthy individuals with no history of spinal muscular atrophy (SMA) is important to assess carrier frequency, the frequency of patients with two copies of SMN1 on one chromosome (a factor that could lead to a false-negative result when testing for SMA carriers) and the mechanisms responsible for these chromosomes with two copies of SMN1. We retrospectively analyzed the copy number of SMN1 and SMN2 genes detected in blood samples of 119 gamete donors by Multiplex Ligation- Dependent Probe Amplification (MLPA) assay during the last two years. The number of donors with a heterozygous deletion of exon 7 of SMN1 was 1 in 59 samples (1.7 %). It was estimated that 5.4 % of the studied alleles presented two SMN1 copies. The percentage of individuals with one or zero copies of SMN2 was not statistically different among individuals with two copies of SMN1 (48.1 %) and those with three or four SMN1 copies (63.6 %) (p= 0.327). The frequency of individuals with one copy of SMN1 is low and consistent with previously reported data; therefore, universal screening is not cost-effective, although it could be so in gamete donors. Our results are not in agreement with the hypothesis that the occurrence of gene conversion from SMN2 to SMN1 results in two SMN1 copies on one chromosome.<hr/>El analisis del numero de copias de los genes SMN (de sus siglas en ingles Survival Motor Neuron)en poblacion sana sin historia de atrofia muscular espinal (AME) es importante para establecer la frecuencia de portadores, la frecuencia de pacientes con dos copias de SMN1 en un cromosoma (un factor que puede dar lugar a falsos negativos cuando se realizan estudios de portadores) y los mecanismos responsables de estos cromosomas con dos copias de SMN1. Hemos analizado retrospectivamente el numero de copias de los genes SMN1 y SMN2 detectadas por MLPA (amplificacion de sondas dependiente de ligandos multiples, de sus siglas en ingles Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) en muestras de sangre de 119 donantes de gametos durante los dos ultimos anos. El numero de donantes con una delecion en heterocigosis del exon 7 del SMN1 fue de uno cada 59 muestras (1,7 %). La estimacion del porcentaje de alelos estudiados con dos copias de SMN1 fue de 5,4 % y el porcentaje de individuos con una o ninguna copia de SMN2 no fue estadisticamente significativo entre los individuos con dos copias de SMN1 (48,1 %) y aquellos con tres o cuatro copias (63,6 %) (p=0,327). La frecuencia de individuos con una copia de SMN1 es baja y consistente con datos anteriores publicados, por lo que el tamizado universal no es efectivo en terminos de costo, aunque podria serlo en donantes de gametos. Nuestros resultados no estan de acuerdo con la hipotesis de que la conversion de SMN2 a SMN1 da lugar a cromosomas con dos copias de SMN1. <![CDATA[Identification of freshwater hydrophytes for genotoxicity assessment of aquatic pollutants]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-62332015000100002&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Con el objeto de explorar el uso de hidrofitas en ensayos de genotoxicidad de contaminantes acuaticos, como complemento o reemplazo del uso tradicional y estandarizado de macrofitas terrestres (Allium cepa (L.), Pisum sativum (L.), Tradescantia sp., entre otras), se llevo a cabo un estudio preliminar en un intento por seleccionar al menos una especie taxonomica silvestre dulceacuicola que debe cumplir los siguientes requisitos: poseer numero cromosomico basico bajo, indice mitotico (IM) elevado y ser facil de propagar en laboratorio. Para tal fin, se realizaron tres campanas de relevamiento de vegetacion en la Laguna La Brava (provincia de Buenos Aires, Argentina). Se recolectaron semillas de las especies mas representativas, y se dispusieron en placas de Petri para su germinacion. Luego se realizaron estudios citogeneticos en apices radicales. Las especies taxonomicas Bidens laevis (L.) y Solanum chenopodioides (Lam.) cumplieron los requisitos para su uso en el analisis de genotoxicidad de contaminantes acuaticos.<hr/>For exploring the potential use of hydrophytes in genotoxicity bioassays for aquatic contaminants, as a complement or replacement of the traditional and standardized use of terrestrial macrophytes (Allium cepa (L.), Pisum sativum (L.), Tradescantia sp. (L.), among others), a preliminary study was carried out in an attempt to select at least one wild wetland taxonomic species that had to meet the following requirements: to have a low basic chromosome number and a high mitotic index (MI), and to be easily propagated in the laboratory. Three field vegetation surveys were carried out in La Brava Lake (Buenos Aires province, Argentina). Seeds of the most representative species were collected and placed in Petri dishes for germination. Cytogenetic studies were, then, performed in root tips. Two of the species, Bidens laevis (L.) and Solanum chenopodioides (Lam.) fulfilled the requirements for their use in the analysis of genotoxicity of aquatic contaminants. <![CDATA[Transformation of an Argentine spring wheat genotype: optimization of the protocols for particle bombardment of excised immature embryos and rapid isolation of transgenic plants]]> http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-62332015000100003&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Klein Brujo was found to be a promising Argentine spring wheat genotype for transformation studies. In the present work we optimized the biolistic transformation of embryogenic scutellar calli from this genotype. We first identified scutellar callus induction media (SCIM) most promising for in vitro embryogenic plant regeneration with Klein Brujo. We then co-bombarded embryos of Klein Brujo and, for comparison, of Bobwhite, a highly transformable wheat line, on these media with 1 μm gold particles coated with two plasmids. One of these contained the marker gene gfp (linked to the CaMV35S-promoter) and the selection gene bar (resistance to phosphinothricin: PPT, linked to the maize Ubi1-promoter), whereas the other contained ipt (encoding isopentenyltransferase) as a candidate gene under the control of the HvS40- or SAG12- promoter. Transformation efficiencies of up to 16.4% with Klein Brujo and 6% with Bobwhite were obtained with embryos pre-cultured on SCIM for 96 h and subjected to pre- and post-bombardment osmotic treatment for 4-5 and 16 h, respectively. Transgenic calli and plants regenerating in vitro were identified by screening for GFP expression and PPT resistance. One hundred and three transgenic lines of Klein Brujo - far more than of Bobwhite (12 lines) - were established on soil, often within only nine weeks. The frequency of co-transformation of gfp and/or bar and ipt exceeded 97% for both genotypes, and the three genes were shown to co-segregate with selected individuals. The ipt-gene was structurally stable up to the T3 generation, whereas gfp and bar were susceptible to silencing.<hr/>Klein Brujo es un genotipo argentino de trigo de primavera prometedor para estudios de transformacion. En el presente trabajo se optimizo la transformacion biolistica de callos embriogenicos escutelares de este genotipo. Primero se identificaron los medios de induccion de callo escutelar (SCIM) mas promisorios para la regeneracion embriogenica in vitro de Klein Brujo. Luego, se co-bombardearon embriones de Klein Brujo y de Bobwhite, una linea altamente transformable, en medios seleccionados con particulas de oro (1 μm) recubiertas de dos plasmidos. Un plasmido contuvo dos genes, el marcador gfp (vinculado a CaMV35S) y el de seleccion bar (resistencia a fosfinotricina: PPT, vinculado a Ubi1) y el segundo al gen ipt (isopenteniltransferasa), controlado por el promotor HvS40 o SAG12. Eficacias de transformacion de hasta 16% con Klein Brujo y 6% con Bobwhite, se obtuvieron con embriones pre-cultivados en SCIM por 96 h y sujetos a tratamiento osmotico pre- (4-5 h) y post-bombardeo (16 h). Los callos transgenicos y las plantas regeneradas in vitro se identificaron por la deteccion de la expresion de GFP y la resistencia a PPT. Se transplantaron a suelo, 103 lineas transgenicas de Klein Brujo -mucho mas que de Bobwhite (12 lineas- con frecuencia en un lapso de solo nueve semanas. La frecuencia de co-transformacion de gfp y/o bar e ipt supero el 97% para ambos genotipos, y los tres genes co-segregaron en individuos seleccionados. El gen ipt fue estructuralmente estable hasta en la generacion T3, mientras que gfp y bar fueron susceptibles al silenciamiento. <link>http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-62332015000100004&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt</link> <description/> </item> <item> <title/> <link>http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1852-62332015000100005&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt</link> <description/> </item> </channel> </rss> <!--transformed by PHP 12:08:29 29-08-2015-->