Introducción

La producción de leche en Argentina en el año 2018, según datos del Ministerio de Agroindustria de la Nación, alcanzó los 10.527 millones de litros, siendo las provincias de Córdoba, Santa Fe y Buenos Aires las principales productoras de leche.

La mastitis bovina es una de las enfermedades con mayor impacto económico en los rodeos lecheros ⁹, por lo cual la reducción de los niveles de dicha afección representa un desafío en los tambos de Argentina para mejorar la productividad y moderar los costos asociados.

La incidencia de mastitis clínica está asociada con múltiples factores de riesgo a nivel de rodeo y a nivel individual. La implementación de programas de salud mamaria en los tambos permite reducir la exposición a factores de riesgo de rodeo y mejorar los índices de salud en general.

La identificación de factores de riesgo a nivel individual permitiría detectar tempranamente a vacas con mayor predisposición a desarrollar mastitis, y podría ser la base para implementar estrategias de prevención secundaria que disminuyan la diseminación de la enfermedad y las demás consecuencias negativas de un caso clínico.

Entre los factores individuales se identifican los de vaca y los de cuarto. Entre los primeros el número ordinal de parto, el estadio de lactancia y la historia de mastitis clínica y subclínica son los más reconocidos^{4, 15, 16, 24}. La posición del pezón, el grado de hiperqueratosis y la distancia al piso son factores identificados a nivel de cuarto^{7, 10, 13.} Considerando los escasos reportes en Argentina respecto de la identificación de factores individuales asociados a mastitis clínica, el conocimiento de los mismos podría ayudar al desarrollo de prácticas de manejo de la salud mamaria acorde a nuestras condiciones de producción.

El objetivo de este trabajo fue estimar la incidencia de mastitis clínica en tambos del tipo semi-pastoriles de la Provincia de Córdoba (Argentina) e identificar factores asociados a estos nuevos episodios.

Material y Métodos

Población de estudio. Esta investigación involucró la evaluación de 990 vacas en ordeñe pertenecientes a 9 tambos de la Provincia de Córdoba. El criterio de inclusión de los establecimientos consistió en que fueran del tipo semi-pastoril y que aplicaran habitualmente el plan de los 5 puntos de control de la mastitis¹². Los tambos fueron visitados dos veces con un intervalo de 15 días entre los meses de marzo y agosto del año 2016 y a su vez se realizó el seguimiento de las vacas seleccionadas durante el lapso de tiempo entre las dos visitas.

Riesgo de mastitis clínica. En la primera visita a cada tambo, se identificaron los casos de mastitis clínica (MC) en una muestra aleatoria de vacas. La cantidad de vacunos a seleccionar en cada establecimiento fue estimada asumiendo una prevalencia de mastitis del 5%, una precisión absoluta del 3% y una confianza del 95% 25 implementadas en el programa EPIDAT 3.1 (Xunta de Galicia, OPS. 2006).

Las vacas a examinar fueron seleccionadas mediante un procedimiento al azar sistemático, para esto, el total de vacas en ordeño al momento de la visita fue dividido por el tamaño de la muestra establecido previamente. De esta manera se identificó el intervalo de selección, para posteriormente elegir al azar la primera vaca ²⁵.

La identificación de los casos de MC fue realizada a nivel de cuarto al momento del realizar el despunte (descarte de los primeros chorros de leche) de cada vaca antes del ordeñe. Un cuarto mamario fue considerado con mastitis clínica si se observaba alteración de la leche (grumos, sangre, aspecto aguado) asociado o no a signos locales (dolor, enrojecimiento, calor en el cuarto) o sistémicos (decaimiento, fiebre)¹⁴.

En la segunda visita al tambo, las vacas seleccionadas previamente fueron revisadas para determinar la presencia de un caso nuevo de mastitis clínica. Además, a partir de las planillas de registro acordadas con el personal a cargo del ordeñe, se identificaron las vacas que durante el período de 15 días habían presentado un episodio de MC.

De esta manera, un caso nuevo de mastitis clínica fue definido como aquella vaca que estando sana en la primera visita, desarrolló una mastitis clínica en los 15 días subsecuentes²⁰. Cualquier episodio de MC ocurrido dentro de las dos semanas posteriores al evento de MC fue considerado como el mismo caso⁸.

Evaluación de factores de riesgo. Potenciales pre- dictores a nivel de vaca y de cuarto fueron relevados en cada uno de los animales seleccionados para este estudio durante la primera visita. Los factores evaluados a nivel de vaca fueron: suciedad de la ubre en una escala de 1 a 4 23, distancia al piso de la punta del pezón anterior derecho o izquierdo respecto de la altura del corvejón de la vaca (por encima, a la misma altura o por debajo del corvejón), número ordinal de parto (vacas de un parto y vacas de 2 o más partos) y días en lactancia.

Evaluación de factores de riesgo. Potenciales pre- dictores a nivel de vaca y de cuarto fueron relevados en cada uno de los animales seleccionados para este estudio durante la primera visita. Los factores evaluados a nivel de vaca fueron: suciedad de la ubre en una escala de 1 a 4 23, distancia al piso de la punta del pezón anterior derecho o izquierdo respecto de la altura del corvejón de la vaca (por encima, a la misma altura o por debajo del corvejón), número ordinal de parto (vacas de un parto y vacas de 2 o más partos) y días en lactancia.

Los potenciales factores de riesgo evaluados a nivel de cuarto fueron: presencia de pérdida espontánea de leche¹⁸, condición del pezón considerando estado de la piel (seca, muy seca y agrietada), presencia de anillo (leve, moderado o extremo) e hiperqueratosis (leve, moderada o extrema en la punta del pezón) ^6,13. Además, en la primera visita se realizó la determinación de California Mastitis Test (CMT) considerando tres niveles de positividad: traza, grado 1 y grado 2.

Análisis estadístico. Un análisis descriptivo fue realizado a nivel de cuarto y de vaca. A nivel de vaca, la presencia de mastitis clínica fue definida como la presencia de al menos un cuarto afectado. De forma análoga, los atributos de cuarto fueron agregados a nivel de vaca realizando también una interpretación en paralelo, considerando expuesta a la vaca que presentara el atributo en al menos uno de sus cuartos. Un análisis univariado a nivel de vaca fue realizado para evaluar la asociación entre cada factor relevado y la presencia de al menos un cuarto con mastitis clínica, utilizando el test de Chi cuadrado²⁵.

Posterior al análisis univariado, se procedió a ajustar un modelo lineal generalizado mixto en InfoStat⁵. La variable respuesta fue un caso nuevo de MC identificado durante el período de seguimiento y las variables independientes fueron los factores que presentaban un valor de p < 0,25 en el análisis univariado.

El número de partos y los días en lactancia fueron forzados en el modelo considerando su potencial efecto confundidor. Las variables relacionadas a la condición de la piel y punta de pezón fueron clasificadas en dos categorías (0: ningún pezón de la vaca mostraba alteración o lesión y 1: al menos un pezón de la vaca mostraba lesión). El tambo fue incluido en el modelo como efecto aleatorio.

Las interacciones plausibles biológicamente fueron incluidas en el modelo para su evaluación. El nivel de significancia considerado en el modelo final fue un valor de p <0,05. Los resultados del modelo fueron presentados como odds ratio (OR) con sus respectivos intervalos de confianza del 95% (IC 95%). La fracción atribuible poblacional (FAP) fue estimada para los pre- dictores asociados en el modelo final¹¹.

Resultados

Un total de 990 vacas (3886 cuartos) fueron analizadas (Tabla 1). Cada tambo (n = 9) aportó -en promedio- un 11,1% de las observaciones (rango = 6,7-14,5). En la primera visita fueron identificadas 45 (4,5%, IC 95% 3,2-5,9) vacas con al menos un cuarto con MC. El total de casos nuevos de MC identificados durante el período de seguimiento de las vacas seleccionadas fue 62 (6,7%, IC 95% 5,0-8,3).

El 33,0% de las vacas estudiadas eran vaquillonas de primer parto, el resto eran vacas con 2 o más partos y el promedio de días en lactancia fue 192 (desvío standard DS = 133). Entre los tambos estudiados el rango promedio de días en lactancia fue 132-237.

Entre los otros factores evaluados a nivel de vaca, se observó un 41,2% de ubres limpias (grado de suciedad 1) con un rango entre los tambos de 2,8%-67,4% y un 22,1% de vacas con la punta del pezón anterior por debajo del corvejón con un rango entre los tambos de 0,0%-35,4%. Los factores agregados a nivel de vaca y su asociación con la presentación de un nuevo caso de mastitis clínica, se muestran en la Tabla 2.

Los factores asociados a la presencia de un caso nuevo de mastitis clínica retenidos en el modelo final fueron: días de lactancia, suciedad de la ubre y grado de CMT, como indica la Tabla 3. La fracción atribuible poblacional estimada para suciedad de la ubre y grado de CMT fue 17,7% y 39%, respectivamente.

Discusión

La frecuencia de MC ha sido investigada previamente en rodeos lecheros de Argentina (Arch Med Vet 47: 7-14), con prevalencias estimadas de 3% (IC 95% 2,3-3,7) y 2,5% (IC 95% 1,9-3,1), valores levemente inferiores a los hallados en este estudio durante la primera visita al predio (4,5%; IC 95% 3,2-5,9). En relación a la incidencia de MC, lo reportado en este estudio (6,7%; IC 95% 5,0-8,3) fue superior a lo publicado previamente (3,9%; IC 95% 3,1-4,7), siendo esta comparación válida debido a que la metodología en la estimación de los casos nuevos de MC fue similar ²⁰.

Tal incremento en el número de casos de mastitis puede deberse a múltiples factores involucrando tanto las características de las vacas como el ambiente y las prácticas de manejo. Los sistemas de manejo incluidos en el trabajo previo realizado en Argentina, incluyó todo tipo de sistemas, desde pastoriles hasta totalmente confinados, y esto podría explicar en parte las diferencias encontradas²⁰.

El grado de suciedad de ubre es un indicador de la limpieza de las vacas y del ambiente en el tambo^1,2,3,19 , y esta variable ha sido asociada con el recuento de células somáticas y la presencia de infecciones intra-mamarias ambientales y contagiosas ^{22, 23} , como así también con el riesgo de mastitis clínica ⁴ .

En este estudio, vacas con ubres muy sucias mostraron mayor riesgo de mastitis clínica. En el mismo sentido, un estudio previo reportó que vacas con ubres clasificadas con grado 3 y 4 tenían un 50% más de chances de presentar MC ⁴. En los sistemas lecheros con encierre a corral y en determinadas épocas del año, es común observar vacas que ingresan a la sala de ordeño con ubres sucias, lo cual representa un desafío para la glándula mamaria por el incremento en la exposición de la punta del pezón a patógenos ambientales.

El grado de suciedad de la ubre como un indicador del grado de limpieza del ambiente donde están las vacas²³ podría ser utilizado como una herramienta de alerta en la toma de decisiones, considerando que las vacas deben permanecer en ambientes confortables, limpios y secos para asegurar una buena salud de ubre. Integrando el índice de suciedad en un enfoque poblacional adquiere importancia la proporción de vacas sucias en el rodeo, respecto a este aspecto se sugiere que no debería ser superior el 15% 21, valor muy inferior al reportado en nuestro estudio.

El CMT es una herramienta diagnóstica para detectar infecciones subclínicas que se basa en la medición indirecta de células somáticas en la leche de cada cuarto, vacas con CMT negativo indican un nivel de células somáticas inferior a 200.000 células/mL. En este estudio, vacas con grado de CMT dos o más, presentaron un riesgo 3 veces mayor de presentar MC en los 15 días subsiguientes, con respecto a vacas negativas al CMT.

Si bien esta asociación no ha sido previamente reportada, en varias investigaciones se observó que vacas con historia de altos niveles de MC y recuento celular somático presentaban un mayor riesgo de experimentar otro evento de MC ^{4, 16, 24}, y este riesgo fue sustancialmente mayor si el caso de MC sucedía durante el mes previo. En este marco, disponer de la información de CMT nos permitió investigar su utilidad como predictor de casos nuevos de MC. Vacas con alto CMT previo a un caso clínico, podrían deberse a un estadio temprano de infección activa o bien a una infección subclínica que podría desarrollar a clínica, bajo circunstancias favorables.

La identificación de vacas con CMT 2 o más puede ser útil a los efectos de diseñar estrategias de segregación de vacas en ordeñe y a modo de facilitar un monitoreo más intensivo de las vacas que con más chances podrían adquirir nuevos episodios de MC. La fracción atribuible poblacional estimada del CMT y el índice de suciedad, 39% y 18% respectivamente, aportan evidencias cuantitativas de la importante fracción de los casos incidentes que podrían ser capturados a futuro con un monitoreo intensivo.

En nuestro estudio, a diferencia de lo reportado previamente ^{4, 17, 20, 24}, el número de lactancias no fue una variable asociada al riesgo de MC. En otro estudio se analizaron separadamente vacas y vaquillonas, sin embargo, entre las vacas, aquellas de 3 o más partos tenían menor riesgo de MC que vacas más jóvenes. Asimismo, se observó un riesgo diferencial entre vacas y vaquillonas según el agente causal asociado a MC¹⁶.

En relación al estadio de lactancia, este factor ha sido previamente reportado con una tendencia similar a la observada en el presente estudio: a medida que avanza la lactancia la incidencia de MC es menor^4,16,24. El estadio y el número de lactancias fueron incluidos en el modelo considerando que estos factores son fuentes potenciales de confusión al momento de ajustar el riesgo de MC por diferentes factores.

Las características del pezón, tal como fueron evaluadas en este estudio, no resultaron asociadas al riesgo de MC en contraposición a nuestra hipótesis. Sin embargo, otros estudios de similares características mostraron que grados severos de hiperqueratosis ⁴ y la pérdida espontánea de leche¹⁸ son factores que influyen aumentando el riesgo de MC.

Si bien se encontró una asociación bivariada, al ajustar por el índice de suciedad y el grado de CMT, dichas variables resultaron no asociadas. Nuestros hallazgos de ninguna manera intentan minimizar el uso de estas mediciones como indicadores de salud mamaria, pero no deberían dejarse de lado factores potencialmente confundidores que pueden contribuir al riesgo de MC.

Los resultados de este estudio provienen de una muestra no aleatoria de tambos, por lo cual los datos reportados deben ser cuidadosamente extrapolados al resto de los tambos de la región. Además, los criterios de inclusión aplicados, tambos de manejo semi-pastoril y que aplicaban el plan de los 5 puntos de control de la mastitis, circunscribe las posibilidades de generalización, a cierto tipo de rodeos.

Respecto del sesgo de detección de MC entre tambos, dos de los investigadores que llevaron adelante el estudio, registraron todos los casos durante la primera visita y capacitaron al personal de ordeñe para la detección de casos y su registro durante los 15 días posteriores, razón por la cual se esperaría que la variación sistemática en la definición de caso, haya sido minimizada. Por otro lado, la variación en el error de medida del riesgo atribuida a la particularidad de cada rodeo, fue contemplada en el modelo, al incluir el tambo como efecto aleatorio.

El desafío de reducir los niveles de mastitis, entendiendo a ésta como una enfermedad multifactorial, debe ser enfocado de forma integral. A pesar de que no se dispone de estadísticas globales de la aplicación del plan del National Mastitis Council (NMC) en rodeos lecheros de Argentina, estos resultados sugieren el escenario de la mastitis clínica a partir del tipo de sistema y la aplicación del esquema de control convencional.

Los resultados de este estudio han revelado niveles de MC superiores respecto de reportes previos de Argentina. Los factores de riesgo identificados, CMT e índice de suciedad, serían responsables de una fracción significativa de los casos incidentes a corto plazo y por lo tanto, se constituyen en importantes indicadores de riesgo.