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Revista argentina de microbiología

versión On-line ISSN 1851-7617

Resumen

FERRER, M. F.; ZANETTI, F. A.  y  CALAMANTE, G.. Diseño y construcción de vectores de transferencia para la obtención de virus vaccinia Ankara modificado (MVA) recombinantes. Rev. argent. microbiol. [online]. 2007, vol.39, n.3, pp. 138-142. ISSN 1851-7617.

El virus vaccinia Ankara modificado (MVA) constituye un buen candidato para el desarrollo de vectores virales de expresión no replicativos porque no replica en la mayoría de las células de mamíferos. Para la producción de MVA recombinantes es fundamental disponer de vectores de transferencia que, por recombinación homóloga con el genoma viral, permitan introducir los genes de interés en regiones no esenciales para la replicación in vitro. En este trabajo se diseñaron y obtuvieron los vectores de transferencia denominados VT-MHA y VT-MTK que portan las regiones correspondientes a las posiciones 1-303 y 608-948 del gen MVA165R y 1-244 y 325-534 del gen MVA086R, respectivamente, las que flanquean un sitio de clonado múltiple para la inserción de los genes foráneos. En dichos vectores se clonaron los casetes para la expresión de los genes lac Z o uid A, y la actividad de las enzimas marcadoras b-galactosidasa y b-glucuronidasa se confirmó in situ. Además, utilizando el vector denominado VT-MTK-GUS, se obtuvieron y aislaron MVA recombinantes puros que portan y expresan el gen uid A. Los resultados obtenidos constituyen las herramientas básicas para establecer la metodología de obtención de MVA recombinantes, con el propósito de desarrollar localmente vectores virales no replicativos candidatos a vacunas.

Palabras llave : Poxvirus; MVA; Vector viral no replicativo.

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