Abstract

GALLI, L.; LEOTTA, G. A.; GUGLIADA, M. J.  and  RIVAS, M.. Análisis in silico de la capacidad de dos técnicas de PCR para la detección del gen stx. Rev. argent. microbiol. [online]. 2008, vol.40, n.1, pp.9-12. ISSN 0325-7541.

Escherichia coli productor de toxina Shiga es un patógeno emergente cuyo principal factor de virulencia son las toxinas Shiga (Stx), codificadas por los genes stx. Estas toxinas se clasifican en 6 tipos (1, 2, 2c, 2d, 2e y 2f) que agrupan a 22 variantes. En Argentina se validaron dos técnicas de PCR para la detección de los genes stx, PCR-MK y PCR múltiple. Los objetivos del trabajo fueron analizar mediante el uso de herramientas bioinformáticas la capacidad de dichas técnicas para detectar las variantes del gen stx y demostrar experimentalmente la amplificación de 8 variantes stx. Se recopilaron 25 secuencias nucleotídicas de la base de datos GenBank correspondientes a 21 variantes de stx. Se utilizó el programa BLAST 2 sequences para analizar la complementariedad de las bases nucleotídicas entre las secuencias de las variantes y las secuencias de los cebadores utilizados en las PCR estudiadas. La técnica de PCR-MK permite detectar los tipos stx₁, stx₂, stx_2c, stx_2d y stx_2f, aunque no permite detectar el tipo stx_2e y tres variantes del tipo stx_2c. La PCR múltiple permite detectar los tipos stx₁, stx₂, stx_2c, stx_2d, pero no los tipos stx_2e y stx_2f. Se demostró experimentalmente que ambas técnicas de PCR son apropiadas para la detección de las variantes que están asociadas a enfermedad grave en el hombre.

Keywords : Escherichia coli; Toxina Shiga; Stx; PCR; Bioinformática.

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