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Acta bioquímica clínica latinoamericana

versión impresa ISSN 0325-2957

Acta bioquím. clín. latinoam. vol.46 no.4 La Plata dic. 2012

 

BIOQUÍMICA CLÍNICA

Contenido químico de soluciones después de la irrigación del conducto radicular dentario

Chemical content of solutions after irrigation of the tooth root canal

Conteúdo químico das soluções após a irrigação do canal dentário radicular

 

María Mercedes Salas 1 a , María Luisa De La Casa2 b, María de los Ángeles Bulacio2 b, Alberto Marcial Manlla3 c, María Elena López1, 4 a

1. Bioquímica.
2. Odontóloga, Doctora en Odontología.
3. Magister en Estadística.
4. Doctora en Bioquímica.
a. Cátedra de Química Biológica, Facultad de Odontología, Universidad Nacional de Tucumán.
b. Cátedra de Endodoncia, Facultad de Odontología, Universidad Nacional de Tucumán.
c. Centro de Informática para Docencia Investigación y Extensión (CIDIE), Universidad Nacional de Tucumán.

 


Resumen

Durante el tratamiento endodóntico, la irrigación del conducto radicular permite remover los residuos de los túbulos dentinarios. El objetivo de este estudio fue evaluar el contenido de soluciones de irrigación extraídas del conducto radicular luego de la pulpectomía en dientes con pulpitis y con necrosis pulpar, con el fin de determinar aquéllas menos agresivas sobre la dentina radicular. Se trabajó en 80 dientes humanos superiores unirradiculares y con NaClO 1%, EDTA 17%, Ca(OH)2 1%, clorhexidina 0,2% y agua destilada. Se aspiró el contenido de tres irrigaciones y se determinó pH, proteínas totales, hidroxiprolina, calcio y fósforo. El pH de las soluciones no tuvo cambios significativos. La mayor concentración de proteínas se halló en los aspirados con NaClO de dientes con necrosis y con EDTA de pulpitis, revelando mayor número de bandas por electroforesis con esta última solución. El contenido de hidroxiprolina fue mayor con Ca(OH)2 y con clorhexidina, y el de fósforo con EDTA y con NaClO para ambos tipos de dientes. Se detectó calcio con NaClO y clorhexidina. No hubo resultados diferentes entre dientes con pulpitis y con necrosis pulpar en todas las determinaciones químicas. Las soluciones de NaClO y EDTA resultaron eficaces en la eliminación de restos orgánicos de los conductos radiculares. Sin embargo, NaClO eliminó también calcio y fósforo; y la solución de EDTA, fósforo, posiblemente provenientes de la hidroxiapatita y de complejos proteicos de la dentina.

Palabras clave: Pulpa dental humana vital; Pulpa dental humana necrótica; Soluciones de irrigación endodóntica; Limpieza del conducto radicular

Summary

During endodontic treatment, irrigation of the root canal makes it possible to remove remainders of the dentin tubules. The aim of this study was to evaluate the content of extracted irrigation solutions of root canals after pulpectomy in teeth with pulpitis and pulp necrosis, in order to determine those Enless aggressive on root dentine. Work was performed on 80 unirradicular upper human teeth, with 1% NaClO, 17% EDTA, 1% Ca(OH)2, 0.2% chlorhexidine and distilled water. The content of three irrigations was aspired and pH, total proteins, hydroxiproline, calcium and phosphor were determined. pH of the solutions showed no significant changes. A greater protein concentration was obtained with NaClO from teeth with necrosis and with EDTA from teeth with pulpitis; the greatest number of electrophoretic bands were revealed with EDTA. The hydroxiproline content was greater with Ca(OH)2 and with chlorhexidine, and that of phosphor was greater with EDTA and with NaClO for both types of teeth. Calcium was detected with NaClO and chlorhexidine. There were no different results between teeth with pulpitis and those with pulp necrosis in all chemical determinations. NaClO and EDTA solutions were effective in the elimination of organic rests from the root canal. Nevertheless, NaClO also eliminated calcium and phosphor, and the EDTA solution eliminated phosphor, possibly originated from hydroxiapatite and from protein complexes of dentin.

Key words: Vital human dental pulp; Necrotic human dental pulp; Endodontic irrigation solutions; Cleaning of the root canal

Resumo

Durante o tratamento do endodóntico, a irrigação do canal radicular permite remover os resíduoss dos túbulos dentinários. O objetivo deste estudo foi avaliar o conteúdo das soluções de irrigação extraídas do canal radicular após a pulpectomia em dentes com pulpite e com necrose pulpar, com a finalidade de determinar aquelas menos agresivas sobre a dentina radicular. O trabalho foi em 80 dentes humanos superiores unirradiculares e com NaClO 1%, EDTA 17%, Ca(OH)2 1%, clorexidina 0.2% e água destilada. Foi aspirado o conteúdo de três irrigações e se determinou pH, proteínas totais, hidroxiprolina, cálcio e fósforo. O pH das soluções não teve mudanças significativas. A maior concentração de proteínas foi encontrada nas aspirações com NaClO de dentes com necrose e o EDTA da pulpite, revelando maior número de faixas por eletroforese com esta última solução. O conteúdo de hidroxiprolina foi maior com Ca(OH)2 e com clorexidina, e o de fósforo com EDTA e com NaClO para ambos os tipos de dentes. Foi detectado cálcio com NaClO e clorexidina. Não houve resultados diferentes entre dentes com pulpite e com necrose pulpar em todas as determinações químicas. As soluções de NaClO e EDTA resultaram eficazes na eliminação de restos orgânicos dos condutos radiculares. Entretanto, NaClO eliminou também cálcio e fósforo; e a solução de EDTA, fósforo, possivelmente provenientes da hidroxiapatita e de complexos proteicos da dentina.

Palavras chave: Polpa dentária humana vital; Polpa dentária humana necrótica; Soluções de irrigação endodôntica; Limpeza do canal radicular


 

Introducción

El éxito del tratamiento endodóntico depende en gran medida de la correcta eliminación de restos orgánicos del conducto radicular. La limpieza y conformación del mismo constituyen etapas altamente significativas en el tratamiento. Las soluciones de irrigación deben colaborar con la acción mecánica de los instrumentos para remover la materia orgánica residual y participar en la desinfección del conducto y de los túbulos dentinarios, sin ser irritantes para el tejido periapical (1).
La acción solvente del hipoclorito de sodio (NaClO) sobre el tejido pulpar humano y bovino fue estudiada por numerosos investigadores (1-3) quienes demostraron su eficacia en la remoción orgánica a las concentraciones 1,0, 2,5 y 5,25%. También se analizó el efecto de la temperatura y de la concentración de la solución de irrigación, resultando ser más efectiva las concentraciones más elevadas, independientemente de la temperatura empleada (4).
Al comparar la pérdida de peso del tejido muscular porcino mantenido en contacto con diferentes soluciones, Hasselgren et al. (5) demostraron que el NaClO 1% es el solvente tisular más efectivo, ya que el tejido fue desintegrado entre 30 y 60 minutos después del contacto con la solución. Otros investigadores analizaron el poder de disolución de ese irrigante al 0,5, 2,5 y 5% en tejido pulpar bovino (6) por la presencia de hidroxiprolina proveniente de la descomposición del colágeno pulpar y por el incremento en la concentración de fósforo en los extractos. NaClO tiene una efectiva acción de limpieza en las paredes del canal radicular, según demostraron al microscopio electrónico de barrido (MEB) Baumgartner et al. (7). No existe consenso en cuanto a la concentración más conveniente para su aplicación; para algunos investigadores, a mayor concentración se obtiene mayor grado de limpieza (8), para otros, lo que influye es el volumen y no el tipo de solución (2-9). Así, se probó su eficacia a distintas concentraciones concluyendo que la misma es mayor al 1% que al 2% (10). En tre 1% y 2,5% elimina de 30 a 40% del barro dentinario respectivamente (11). A mayor concentración se le atribuye un importante poder irritante de los tejidos apicales y periapicales, el tejido pulpar bovino se solubiliza completamente en 20 minutos (12). El cloro de la sal desestabiliza las cargas de las proteínas de las paredes bacterianas alterando su permeabilidad, a la vez actúa sobre las proteínas de membrana de las células de la pulpa y la predentina alterando sus estructura y función (10). NaClO forma jabones con los ácidos grasos de los tejidos; su baja tensión superficial le permite penetrar con mayor facilidad las cavidades, llegar a la dentina a través de los canalículos y por lo tanto mejorar su eficiencia tópica (2-9).
Morgan et al. (13) evidenciaron que el Ca(OH)2 1% en solución es inefectivo como solvente del tejido pulpar bovino, lo cual fue anunciado previamente en un estudio realizado sobre tejido animal (5).
Estudios del efecto solvente de Ca(OH)2 e NaClO sobre el tejido pulpar humano (14) sugirieron el empleo de NaClO 2% como solución irrigante durante la preparación del canal y la aplicación de pastas de Ca(OH)2 como medicación tópica intracanal, ambos necesarios para la obtención de un conducto radicular libre de restos pulpares.
Otros autores (15) observaron al MEB en dientes anteriores bovinos, que la acción de la pasta de Ca(OH)2 aplicada durante siete días previa a la irrigación con NaClO 6% resulta ser más efectiva en la eliminación de restos orgánicos del canal que tales soluciones utilizadas individualmente. El cloro activo proveniente del NaClO 4% provoca oxidación irreversible de los grupos sulfhidrilos de las enzimas bacterianas (16), efecto que se acentúa por el medio alcalino que proporciona el Ca(OH)2 y que resulta desfavorable para el desarrollo microbiano en el interior del canal radicular.

El gluconato de clorhexidina (CHX) 2% posee elevada potencia antimicrobiana (17), similar a la del NaClO 5,25%, aunque su acción se basa en principios diferentes. CHX se utiliza por su poder antiséptico puesto a prueba con éxito en los tratamientos con necrosis. Su eficacia radica en la interacción entre las cargas positivas de la molécula y las negativas de los grupos fosfatos de la pared bacteriana. Esto provoca un aumento de la permeabilidad celular con el posterior ingreso de la solución tóxica a la célula (18). Se comprobó la acción residual de CLX en las paredes dentinarias, desde las cuales se desprende lentamente. También se demostró su efecto antinflamatorio (19), pues reduce la inflamación periodontal marginal y apical y la resorción ósea en dientes tratados con la solución a diferentes concentraciones.
Mc Comb y Smith (20) observaron al SEM la presencia de barro dentinario generado durante la instrumentación del canal radicular, y evidenciaron su efectiva remoción con EDTA 17%. Otros investigadores (21) confirmaron su eficacia en la limpieza del conducto instrumentado. EDTA es un quelante de cationes bivalentes que reacciona con el calcio unido a las fosfoproteínas de la dentina a pH neutro. Verdelis et al. (22) comprobaron la acción descalcificante de EDTA a diferentes niveles de la dentina (cervical, media y apical), y su capacidad para eliminar proteínas dentinarias no colágenas insolubles.
Por sus diferentes propiedades, las soluciones de irrigación cumplen la acción de limpieza y desinfección. Se emplean en forma combinada (23) de manera de potenciar y complementar sus efectos. El proceso de preparación del conducto radicular, instrumentación e irrigación, puede debilitar la dentina, resultando un tejido susceptible a fracturas. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar la acción de diferentes soluciones de irrigación en el conducto radicular sobre los tejidos dentarios más expuestos, pulpa y dentina, a través del contenido orgánico e inorgánico de aspirados obtenidos luego de la pulpectomía e irrigación del canal radicular de dientes con pulpitis o con pulpa vital (DPV) y dientes con necrosis pulpar o con pulpa necrótica (DPN).

Materiales y Métodos

Pacientes

Se seleccionaron pacientes de ambos sexos (entre 25 y 45 años de edad) que concurrieron voluntariamente a la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional de Tucumán por tratamiento endodóntico con diagnóstico de pulpitis y necrosis pulpar, privados de medicación antibiótica tres meses previos a la toma de muestra. Todos los pacientes firmaron un consentimiento informado antes de participar de la experiencia.

Toma de muestra

Se trabajó sobre 80 dientes anterosuperiores en los cuales se realizó aislamiento absoluto y apertura coronaria. En los DPV se extirpó el tejido pulpar con pulpótomo, previa conductometría; en los DPN la eliminación de los restos pulpares se realizó mediante instrumentación con limas tipo K siguiendo la técnica escalonada (24).
Se trabajó con dos grupos de 40 dientes con diagnóstico de DPV o DPN, divididos en cuatro subgrupos de 10 dientes cada uno, según la solución de irrigación aplicada para cada diagnóstico, respetando la práctica clínica. Para DPV se usó: NaClO 1% pH 9,1, EDTA 17% pH 7,3, Ca(OH)2 1% pH 11,2 y agua destilada (AD) estéril pH 7,0 como solución testigo. Para DPN se empleó: NaClO 1% pH 9,1, EDTA 17% pH 7,3, CHX 0,2% pH 6,9 y AD pH 7,1 como solución testigo. A los pacientes testigo se les recogieron las muestras con agua destilada y se les continuó el tratamiento con la solución correspondiente a su diagnóstico clínico.
Se agregaron gradualmente 5 mL de cada solución a presión constante con jeringa plástica y aguja estéril durante 40 s en tres oportunidades. El líquido remanente de cada solución fue aspirado del interior del conducto radicular a los 30 s de concluida la irrigación. Se recolectaron volúmenes de entre 1 y 120 mL cada vez. Así, se obtuvieron tres aspirados: Inicial (I) después de la pulpectomía y de la primera irrigación, Medio (II) después de la segunda irrigación y Final (III) después de la tercera irrigación. Dada la escasez y la gran variabilidad de volúmenes se juntaron diferentes números de muestras hasta conseguir cantidad suficiente para poder realizar las determinaciones químicas.
Los aspirados fueron colocados en tubos Eppendorf a 0 ºC (baño de hielo) y conservados a -15 °C. Previo a las determinaciones químicas, las muestras fueron dializadas por separado contra 500 mL de agua destilada durante 2 h, cambiando el líquido de diálisis cada 30 min, a fin de eliminar los iones que pudieran interferir en las reacciones químicas.
Se trabajó por triplicado para cada determinación. Para los registros de pH se empleó un pehachímetro digital (Broadley-Yames Corp. Irvine, California, EE.UU.) para pequeños volúmenes (sensibilidad 0,01 unidad de pH) colocando el electrodo calomel en 15 µL de muestra ubicada sobre un portaobjeto, durante 10 s. Se lavó el electrodo con abundante AD y se lo secó entre registros.

Determinaciones químicas

Se determinaron proteínas totales (PT) según el método de Lowry et al. (25), hidroxiprolina (Hyp) según la técnica de Jamall et al. (26), fósforo (P) con el método colorimétrico indirecto del fosfomolibdato (Wiener Lab., Argentina) y calcio (Ca) con el método colorimétrico directo de cresolftaleín complexonacalcio (Wiener Lab., Argentina) para líquidos biológicos. En todas las determinaciones se restó el color que pudiera desarrollar cada solución de irrigación frente a los reactivos en ausencia de muestra. No se determinó Ca en los aspirados de Ca(OH)2 y EDTA. La determinación de Hyp (26), aminoácido abundante en el colágeno, es utilizada como medida de su concentración.
La electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) fue realizada de acuerdo al método descripto por Laemmli (27) para proteínas, utilizando gel de corrida al 12% y gel de stacking al 4%. Se aplicaron 30 mA por gel durante 45 a 50 min. Los geles fueron luego fijados y teñidos al abrigo de la luz para su revelado con solución de AgNO3 0,2% (28). Se emplearon como marcadores de peso molecular (Bio-Rad, Richmond, Canadá) dilución 1/20) a miosina (200,0 kDa), ß-galactosidasa (116,2 kDa), fosforilasa b (97,4 kDa), sero albúmina (66,2 kDa), ovo albúmina (45,0 kDa), anhidrasa carbónica (31,0 kDa), inhibidor de tripsina (21,5 kDa), lizosima (14,4 kDa) y aprotinina (6,5 kDa).
A las muestras con NaClO, previo a las determinaciones de PT, Hyp y SDS PAGE, se agregó tiosulfato de sodio 1% para bloquear el cloro activo (2).

Análisis estadístico

Los resultados fueron analizados estadísticamente con el test t de Student; se empleó el Análisis de la Varianza (Anova o prueba f) y el test de Tukey. Un valor de p<0,05 fue considerado estadísticamente significativo. Los datos fueron analizados con los procedimientos estadísticos del Exploratory Date Analysis (EDA) para determinar la normalidad de las variables y se aplicó la Correlación de Pearson (programa de análisis SPSS).

Resultados

No se observaron diferencias estadísticamente significativas (p>0,05 NS) entre los valores de pH de los tres aspirados con NaClO, EDTA y AD en DPV (Fig. 1A) y DPN (Fig. 1B), siendo ligeramente más altos en estos últimos respecto de DPV, pero de modo no significativo. Con NaClO se observó un descenso estadístico de pH (p<0,05) de 9,1 a 8,3 respecto del valor original de la solución y una alteración poco significativa (p<0,01) entre los aspirados procedentes de DPV y DPN. Con EDTA no hubo diferencia significativa (p>0,05 NS) de pH respecto del valor original ni entre los aspirados. El pH de los aspirados con Ca(OH)2 de DPV descendió significativamente (p<0,05) respecto al valor original, de 11,2 a 9,8 en I, recuperándolo en III. Con CHX (DPN) se evidenció descenso (p<0,05) de pH de la solución de origen (6,9) y aun de I a III. La solución testigo no presentó variaciones de pH, tanto en DPV como en DPN.


Figura1. pH de los Aspirados de Dientes con Pulpa Vital (A) y Necrótica (B).

Respecto a los valores de PT (Fig. 2) tanto en DPV (Fig. 2A) como en DPN (Fig. 2B) se observó descenso en los tres aspirados de todas las soluciones. Con NaClO los valores fueron más altos (p<0,01) que los de todas las soluciones; además, el contenido de PT de I y II fue mayor (p<0,05) en DPN que en DPV. EDTA mostró valores ligeramente más altos en DPV que en DPN (p<0,05), sin diferencias significativas (p<0,05) entre los tres aspirados en ambos tipos de dientes. Ca(OH)2 (DPV) presentó menor proporción de proteínas que el resto de las soluciones, con diferencias significativas (p<0,05) entre el aspirado I respecto a II y III. CHX presentó una cantidad de PT aún menor (p=0,05), semejante a EDTA de DPN. La solución testigo no presentó PT, tanto en DPV como en DPN.


Figura 2. Contenido en Proteínas Totales de los Aspirados de Dientes con Pulpa Vital (A) y Necrótica (B).

Se detectó Hyp en todas las soluciones probadas (Fig. 3A y Fig. 3B). Solamente NaClO de DPN mostró diferencias significativas (p<0,05) entre los aspirados. EDTA presentó un contenido de Hyp similar a AD, especialmente en DPN. Se encontró mayor (p<0,05) concentración de Hyp en Ca(OH)2 respecto de las soluciones restantes de DPV. Del mismo modo, I con CHX en DPN presentó valores de Hyp estadísticamente superiores (p<0,05) respecto a II y III. La solución testigo presentó baja Hyp tanto en DPV como en DPN.


Figura 3. Contenido en Hidroxiprolina de los Aspirados de Dientes con Pulpa Vital (A) y Necrótica (B).

En las determinaciones de P se observó un comportamiento semejante (p>0,05 NS) entre DPV (Fig. 4A) y DPN (Fig. 4B) tanto para NaClO como EDTA. En todas las soluciones hubo diferencias significativas (p<0,05) entre los tres aspirados. EDTA mostró mayor concentración de P con diferencia significativa (p<0,05) respecto a CHX en DPN. La solución testigo no presentó P, tanto en DPV como en DPN.


Figura 4. Contenido en Fósforo de los Aspirados de Dientes con Pulpa Vital (A) y Necrótica (B).

En la determinación de Ca, la irrigación con NaClO mostró diferencias significativas (p<0,05) entre DPV (Fig. 5A) y DPN (Fig. 5B), con valores más elevados en estos últimos. No se detectó descenso significativo (p>0,05 NS) entre los aspirados I, II y III tanto en DPV como DPN. Los valores encontrados con CHX tampoco mostraron diferencias significativas (p>0,05 NS) entre los aspirados. La solución testigo no presentó Ca, tanto en DPV como en DPN.


Figura 5. Contenido en Calcio de los Aspirados de Dientes con Pulpa Vital (A) y Necrótica (B).

La Tabla I expresa las correlaciones de Pearson entre las variables en DPV (IA) y DPN (IB). Hubo asociación altamente significativa (p<0,001) y directa (r=0,726) entre Hyp y P en DPV tratados con NaClO, al igual que entre PT e Hyp (p<0,005) (r=0,619). Con el mismo tratamiento, en DPN los resultados fueron muy similares entre PT e Hyp (p<0,001, r=0,725) y entre Hyp y P (p<0,001, r=0,590). Con EDTA la correlación fue significativa y directa entre PT e Hyp (p<0,005, r=0,599) en DPV y en DPN entre PT y pH (p=0,001, r=0,544) y entre PT y P (p=0,001, r=0,545). Con Ca(OH)2 (DPV) hubo correlación altamente significativa (p<0,001) y directa (r=0,883) entre PT y P; entre PT y pH fue de igual significancia pero inversa (p<0,001, r=-0,786). CHX (DPN) hubo correlación significativa y directa entre PT e Hyp (p<0,01, r=0,478) y entre PT y P (p<0,005, r=0,538), mientras que entre PH y P fue menos significativa e inversa (p<0,005 r=-0,504).

Tabla I. Correlación de Pearson entre Variables determinadas en Dientes con Pulpas Vital (A) y Necrótica (B)

Por SDS-PAGE, los perfiles obtenidos para los aspirados de DPV (Fig. 6A) y DPN (Fig. 6B) fueron similares. Con NaClO no se detectaron proteínas. Con las soluciones restantes se obtuvieron bandas de 6,5 a 200 kDa. EDTA mostró mayor número de bandas a aproximadamente 200, 80, 66 y 6,5 kDa, y una banda adicional entre 66 y 97 kDa en ambos tipos de dientes. Bandas de menor peso molecular, entre 6 y 10 kDa, fueron detectadas con Ca(OH)2 (DPV). Similares resultados se obtuvieron con CHX (DPN), con bandas entre 6 y 66 kDa. La solución testigo no mostró bandas, tanto en DPV como DPN (no mostrado).


Figura 6. SDS PAGE de los Aspirados de Dientes con Pulpa Vital(A) y Necrótica (B).

Discusión y Conclusiones

La acción de limpieza de las soluciones de irrigación fue estudiada por diferentes autores (8) y desde distintos enfoques (2-23). Sin embargo, el análisis in vivo de los efectos bioquímicos que las mismas producen sobre los tejidos pulpares y dentinarios fue poco evaluado (22).
Los DPV poseen un tejido pulpar firme y cohesivo que permitió estandarizar la técnica de extracción pulpar y la preparación del conducto radicular, a diferencia de los DPN que presentan restos tisulares en diferentes estadios de necrosis lo que dificulta su extracción.
Los registros de pH de los diferentes aspirados del canal radicular de DPV y DPN no fueron significativamente diferentes entre sí. Para las soluciones alcalinas (NaClO e Ca(OH)2) el pH del momento I marcó un descenso respecto del valor original que posee cada solución; en el aspirado III ascendió nuevamente acercándose al valor de pH original. Esto implicaría que el contenido residual del conducto radicular influiría en el pH de los aspirados obtenidos. Con EDTA hubo un leve ascenso de pH (p>0,05), comportamiento semejante al del control. Con CHX (DPN) el pH descendió (p<0,05) hasta el valor original (6,9) en III. Estos resultados son coincidentes con un estudio longitudinal in vitro (29) en donde no se observaron alteraciones significativas de pH para las soluciones de irrigación en contacto con el tejido pulpar humano vital.
Particularmente, el contenido de PT y, en cierta medida de Hyp en los aspirados, sobre todo en DPN, confirmarían la eficacia de la solución de NaClO sobre los restos del tejido pulpar y en la limpieza de los conductos dentinarios. Los resultados mostraron también que NaClO 1% arrastraría Ca y P dentinario, según pudo observarse en el aspirado I, tanto en DPV como en DPN.
EDTA liga Ca y consecuentemente eliminó PT, sobre todo en DPV, por lo que podrían estar involucradas en la disminución aquellas proteínas solubles unidas a los minerales o protegidas por ellos. Así, en este trabajo, la eliminación de P por parte de EDTA fue considerable, tanto en DPV como en DPN. Este quelante posee cuatro extremos radicales libres que ligan en forma coordinada al Ca. De ese modo, capta y extrae el metal dentinario y con él al P, debilitando el componente inorgánico del tejido y dejando expuesta la porción orgánica del mismo a la acción de las soluciones de irrigación. Los túbulos dentinarios se despejan de residuos, y al quedar abiertos, permiten la penetración de medicamentos y una mejor adhesión de los materiales de obturación (10).
El Ca(OH)2 presentó acción debridante de las proteínas en el aspirado I, lo cual implicaría sólo efecto de limpieza de las proteínas pulpares. Se demostró que Ca(OH)2 5% produce disolución de tejido pulpar al igual que NaClO 2,5% (30). CHX eliminó muy bajo contenido de proteínas.
Los valores de Hyp determinados en los aspirados sugieren la descomposición parcial del colágeno tal como lo mencionaron previamente Koskinen et al. (6). Todas las soluciones presentaron Hyp; entre ellas, Ca(OH)2 (DPV) y CHX (DPN) fueron las de mayor concentración.
El aumento de Hyp podría explicarse por el pH fuertemente alcalino del Ca(OH)2 que afectaría la integridad del tejido y sus componentes, la acción detergente con poder residual de CHX que degrada lentamente las proteínas y la acción desnaturalizante de NaClO especialmente en los aspirados I. EDTA presentó valores bajos semejantes al control, lo que confirma su acción de lavado (no solvente) sobre las proteínas tisulares disueltas luego de la desmineralización. La acción desnaturalizante del Ca(OH)2 es escasa y se asocia
con el tiempo y el pH cuando se aplica tópicamente como pasta más que como solución de irrigación (14).
En cuanto a los componentes minerales del diente, la concentración de P encontrada en los canales irrigados con EDTA, fue significativamente mayor que con NaClO, Ca(OH)2 y CHX. El quelante podría remover el Ca iónico libre y aquél proveniente de las proteínas complejas de pulpa, predentina y dentina que se encuentran en el conducto radicular. Ello contribuiría con la eliminación de P de los cristales y de las fosfoproteínas de la dentina. Los niveles de P detectados podrían provenir también de restos pulpares de los conductillos y del conducto radicular, en concordancia con los hallazgos de Koskinen et al. (6) que observaron altos niveles de ese mineral al poner en contacto una solución de EDTA con tejido pulpar fresco (6).
Verdelis et al. (22) estudiaron la acción de los quelantes sobre la composición de la dentina radicular y midieron en los aspirados mayor cantidad de Ca y P provenientes de los tercios medio y cervical de la raíz con respecto al tercio apical, el cual posee menor contenido orgánico. La descalcificación se debería a la asociación de EDTA con el componente mineral del tejido que, en consecuencia, eliminaría las proteínas no colágenas asociadas al proceso de mineralización.

La alta concentración de Ca en el aspirado I de NaClO de DPV sugeriría que el catión detectado podría haber estado unido a proteínas pulpares o dentinarias parcialmente solubles. En DPN, CHX presentó mayor concentración de Ca hacia el aspirado III que NaClO, efecto que se relacionaría con su propiedad detergente.
Dogan et al. (23) demostraron la conveniencia del empleo de NaClO 1% como irrigante final, ya que neutraliza la acción de las soluciones quelantes en la superficie dentinaria radicular.

La solución de Ca(OH)2 no presentó efecto de limpieza si se considera la baja cantidad de proteínas detectada. Su pH alcalino proporcionaría un medio favorable para la movilización de P desde los tejidos dentarios.
En el análisis de correlación, los resultados significativos permiten asociar las PT con Hyp e Hyp con P en NaClO 1%, lo que permitiría suponer que su acción no se limita a las proteínas solubles, sino que afecta al colágeno y también desmineraliza la matriz del diente. De igual manera se asocian PT con Hyp y PT con P en EDTA 17%, lo que sugiere que esta solución afecta simultáneamente las fracciones orgánicas soluble e insoluble parcialmente mineralizadas. Las asociaciones observadas con EDTA evidenciaron una acción semejante aunque menor que con NaClO en ambos tipos de dientes, afectando principalmente al contenido inorgánico de la dentina de DPN. Ca(OH)2 mostró mayor acción en la porción orgánica parcialmente mineralizada de DPV. CHX lo hizo en DPN con mayor presencia de Hyp en los aspirados analizados.

Mediante la técnica de SDS-PAGE, NaClO no mostró bandas. Esto revelaría nuevamente una acción desnaturalizante sobre las proteínas pulpares y/o dentinarias extraídas por efecto que produce el cloro activo en las estructuras orgánicas celulares. Sin embargo, más estudios son necesarios para determinar la concentración de tiosulfato de sodio adecuada que se deba agregar. Con EDTA se observaron bandas proteicas de peso molecular variados (desde 6,5 kDa hasta 200 kDa), y una banda adicional (ausente en NaClO, Ca(OH)2, CHX y AD) que requiere realizar un estudio específico a fin de caracterizarla. Tales bandas permanecen en los tres aspirados, lo que evidenciaría la acción continua de la solución en el conducto radicular. Dado que en Ca(OH)2 y en CHX se observaron escasas bandas que desaparecen en los aspirados II y III, y que en AD (solución testigo) no se observaron bandas de proteínas, se podría inferir que, tanto Ca(OH)2 como CHX ejercerían una acción de limpieza efectiva sobre los restos pulpares sin afectar el contenido orgánico de la dentina.
En este estudio se analizó la acción de diferentes soluciones de irrigación en los conductos radiculares. Las soluciones de NaClO 1%, EDTA 17%, Ca(OH)2 1% y CHX 0,2%, de uso frecuente en el tratamiento endodóntico durante la irrigación de DPV y DPN, resultaron eficaces en la eliminación de restos orgánicos.
Sin embargo, las soluciones de NaClO y EDTA eliminarían componentes que provendrían de la hidroxiapatita y de complejos proteicos de la dentina. Dado que actualmente se utiliza en Endodoncia la irrigación sucesiva con EDTA 17% e NaClO 1%, se requerirían estudios químicos posteriores que demuestren la acción sobre restos pulpares y sobre la integridad del tejido dentario.

Correspondencia

Dra. María Elena López
Cátedra Química Biológica, Facultad de Odontología, Universidad Nacional de Tucumán - UNT Avenida Benjamín Aráoz 800 (4000) San Miguel de Tucumán, Argentina
Tel.: 54-381-4107317
Fax: 54-381-4227589
E-mail: mariae.lopez@odontologia.unt.edu.ar

Referencias bibliográficas

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Aceptado para su publicación el 3 de agosto de 2012.

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