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Revista argentina de microbiología

versión impresa ISSN 0325-7541versión On-line ISSN 1851-7617

Rev. argent. microbiol. vol.51 no.2 Ciudad Autónoma de Buenos Aires jun. 2019

http://dx.doi.org/10.1016/j.ram.2018.07.002 

IMAGEN MICROBIOLÓGICA

https://doi.org/10.1016/j.ram.2018.07.002

Observación de interacciones entre hifas de Fusarium verticillioides, Aspergillus flavus y Talaromyces funiculosus en microcultivos desarrollados en ambientes herméticos

Observation of interactions between hyphae of Fusarium verticillioides, Aspergillus flavus and Talaromyces funiculosus in microcultures developed in hermetic environments

 

Claudia C. Castellaria*, Facundo J. Marcos Vallea y Ana M. Pacinb

a Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
b Fundación de Investigaciones Científicas Teresa Benedicta de La Cruz, Luján, Buenos Aires, Argentina

Recibido el 4 de junio de 2018; aceptado el 3 de julio de 2018
Disponible en Internet el 20 de septiembre de 2018

* Autor para correspondencia.

Correos electrónicos: castellari.claudia@inta.gob.ar, claudia_castellari@yahoo.com.ar (C.C. Castellari).

 

Las interacciones entre especies fúngicas micotoxigénicas y no micotoxigénicas que se pueden aislar de granos de maíz almacenados en silos bolsa (como Fusarium verticillioides o Aspergillus flavus, entre las primeras, y Talaromyces funiculosus, entre las últimas) no han sido estudiadas. Conocer las estrategias de colonización de estos microorganismos es relevante, ya que ello contribuiría a explicar las variaciones de las poblaciones fúngicas en los silos bolsa a lo largo del tiempo. En la bibliografía, las metodologías de análisis que permiten evaluar las interacciones entre hifas son escasas y solo describen eventos de acción inhibitoria en ambientes sin restricción de O23,6,8,9. Sin embargo, en los silos bolsa se genera una atmósfera dominada por CO2, producto de la respiración de los componentes bióticos del sistema, que influye en el crecimiento y las interacciones entre las especies fúngicas.

De cada una de las 3 especies, F. verticillioides, A. flavus y T. funiculosus, se evaluaron cepas que fueron confrontadas de a pares, en placas de Petri sin restricción de O2 y en microcultivos, utilizando la técnica de Paul7 modificada por Castellari1. Los microcultivos obtenidos fueron incubados en frascos herméticos con 2 niveles iniciales de O2 (21 y 5%) y de CO2 (0,03 y 15%) durante 7-10 días a 28 °C, y posteriormente observados en un microscopio óptico con contraste de fases (Olympus BH2). Las fotografías se tomaron con una cámara Olympus CAMEDIA (850 000 píxeles, x3 zoom). La observación microscópica de las interacciones hifales entre las especies fúngicas permitió determinar las estrategias de colonización de cada una de ellas. La interacción de hifas entre las especies micotoxigénicas correspondió a reacciones de contacto tipo A2 (fig. 1). La estrategia de supervivencia de T. funiculosus fue de parasitismo, con lisis celular de las hifas colonizadas de A. flavus (fig. 2) y de F. verticillioides (fig. 3). Este trabajo corresponde a la primera descripción de interacciones entre hifas fúngicas en ambientes herméticos, observadas con una metodología sencilla y de bajo costo.


Figura 1 Interacción de hifas entre A. flavus y F. verticillioides. a) Se observa la interacción por contacto de ambos micelios en placa de Petri de 90 mm; b) mayor detalle en microscopio estereoscópico (x80): se advierte la interacción por contacto de las hifas y la presencia de estructuras de reproducción asexual entre ambos micelios; c) interacción de las hifas y estructuras reproductivas asexuales teñidas con azul de metileno (microscopio óptico, x400): flecha discontinua de puntos: A. flavus; flecha discontinua de guiones: F. verticillioides.


Figura 2 Interacción entre A. flavus y T. funiculosus. a) Contacto entre colonias en placa de Petri de 90 mm: se observa en la zona de contacto una coloración intensa (en cuadro negro) producida por un extrolito de T. funiculosus; b) contacto de hifas (teñidas con azul de metileno) entre ambos micelios (x1000); c) hifa de T. funiculosus (indicada por la flecha) parasitando una hifa de A. flavus (x1000).


Figura 3 Interacción entre F. verticillioides y T. funiculosus. a) Contacto entre colonias en placa de Petri de 90 mm: en cuadro negro se observa en la zona de contacto una banda producida por un extrolito de T. funiculosus; b) contacto entre hifas de ambas especies (tenidas con azul de metileno), hifa de mayor grosor con detalle de tabiques: F. verticillioides (x1000); c) hifas y conidios de F. verticillioides: las flechas indican zonas de lisis celular, confirmando evento de parasitismo de T. funiculosus (x400).

Financiación

El presente trabajo fue financiado por la Universidad Nacional de Mar del Plata: Proyecto AGR449/16, «Factores ambientales que afectan los patrones de uso de nutrientes y las relaciones entre Fusarium verticillioides (Sacc.) Niren-berg, Aspergillus flavus Linky Talaromyces funiculosus (syn. funiculosum Thom), aislados de maíz almacenado en silos bolsas en Argentina».

Conflicto de intereses

Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

Bibliografía

1. Castellari C. Factores determinantes en el desarrollo de poblaciones fúngicas micotoxigénicas en granos de ma íz (Zea mays L.) almacenados en bolsas plásticas herméticas. Tesis Doctoral en Ciencias Agrarias. 2017. Universidad Nacional de Mar del Plata.         [ Links ]

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0325-7541/© 2019 Asociación Argentina de Microbiología. Published by Elsevier Espana, S.L.U. This is an open access article under the CC BY-NC-ND license (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

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