INFORME BREVE

Nocardiosis esporotricoide por Nocardia brasiliensis

 

Natalia Alejandra Mangierá 1

Daiana Guevara Nunez 1

Gonzalo Echavarría 2

Eugenia Bertona 1

Liliana Castello 1

Guillermo Benchetrit 2

Adriana N. De Paulis 1

 

1 Departamento de Microbiología, Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari-Universidad de Buenos Aires, Argentina

2 División Infectología, Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari-Universidad de Buenos Aires, Argentina

 

Recibido el 29 de noviembre de 2019

aceptado el 17 de junio de 2020

 

Resumen

Nocardia brasiliensis es un bacilo gram positivo, ramificado, aerobio, ácido resis-tente, que habita en el suelo, en la materia orgánica en putrefacción y en aguas. La nocardiosisen individuos inmunocompetentes puede presentarse como actinomicetoma, infección superfi-cial de la piel o en la forma linfocutánea. Se describe el caso de una mujer de 85 a˜nos con unatumoración ulcerada en el dorso de la mano izquierda, con pápulas eritematosas en el trayectolinfático, infectada por N. brasiliensis. Se logró la identificación presuntiva del agente causala nivel de especie por métodos convencionales, poco costosos para un laboratorio de medianacomplejidad. Las características morfológicas de las colonias, el olor a moho, la coloración deKinyoun positiva y el micelio aéreo fueron las pruebas claves para identificar el género. La iden-tificación fenotípica de la especie se confirmó por espectroscopia de masas (MALDI-TOF MS).El tratamiento efectivo fue con trimetoprima-sulfametoxazol, antibiótico que mostró actividaden la prueba de sensibilidad.

PALABRAS CLAVE Nocardia brasiliensis;Esporotricosislinfocutánea;Nocardiosis.

 

 

Nocardia brasiliensis pertenece al género Nocardia, actualmente con más de 100 especies descritas. Nocardia, Rhodococcus, Gordona y Williamsia conforman la familia Nocardiaceae, orden Actinomicetales2,5,9 y, junto con otros géneros evolutivamente heterogéneos con los que comparten caracter sticas celulares y coloniales, forman parte del grupo de los actinomicetos aerobios5. N. brasiliensis fue aislada por primera vez por Lindenberg en 1909 y descrita por Gordon en 1959.

El primer actinomiceto aerobio reconocido como patógeno fue aislado en 1888 por el veterinario francés Edmond Nocard durante una epidemia de muermo bovino. En 1889, Trevisan creó el género Nocardia y dio el nombre de Nocar-dia farcinica al aislado de Nocard que, luego, se convirtió en la cepa tipo tanto para el género como para la especie. Sin embargo, otros autores, a partir de pruebas fenot picas, observaron que N. farcinica no pod a distinguirse de los aislados nominados como Nocardia asteroides. Debido a cierta incertidumbre relacionada con el aislamiento obtenido por Nocard (no era claro si se trataba de N. farcinica o de N. asteroides), se hizo un llamado a la Comisión Judicial para que cambiara la especie tipo del género a N. asteroides, con la cepa ATCC 19247 como la cepa tipo de la especie. La apelación fue aceptada, pero N. farcinica se mantuvo como la cepa tipo para esa especie en particular, ya que no hab a certeza de que las dos especies fueran realmente idénticas. En 1891, Eppinger documentó el primer caso de nocardiosis humana. Se trataba de un paciente con abscesos cerebrales producidos por un microorganismo similar al aislado por _Nocard2,5,10_.

Nocardia spp. son bacilos gram positivos aerobios, filamentosos, ramificados, que se fragmentan en elementos cocoides y bacilares, ácido resistentes. Poseen un micelio aéreo caracter stico, visible al microscopio óptico. Estos microorganismos son inmóviles, no capsulados, no espo-rulados, con metabolismo oxidativo, catalasa-positivos y arilsulfatasa-negativos. La mayor a de las especies desarrollan a 20 °c y hasta 45 °C. La apariencia colonial es variable: puede ser lisa, granular, irregular, arrugada o apilada. Los pigmentos tipo carotenoides confieren a las colonias tonos naranja, rosa, rojo o amarillo en medios de cultivo sólidos. Se pueden producir pigmentos solubles de color marrón o amarillento difusibles. En el medio de cultivo desprenden un olor característico a moho o tierra mojada.

Se encuentran presentes en el suelo, la materia orgánica en putrefacción y en aguas. No forman parte de la microbiota humana ni animal, pero pueden producir distintas patologías en animales y en humanos1,3,8.

La nocardiosis es una infección infrecuente producida por las especies del género Nocardia6; estas causan síndromes bien caracterizados. Las formas invasivas comprenden la nocardiosis pulmonar y la enfermedad diseminada que afectan, principalmente, a pacientes inmunosuprimidos. El agente causal más frecuente pertenece al complejo N. asteroides7. En este caso, el microorganismo ingresa al sitio de infección por la vía inhalatoria y puede propagarse por la vía hematógena o linfática hacia otros órganos1,6,12. Por otro lado, la nocardiosis cutánea primaria se observa en pacientes inmunocompetentes y puede presentarse como actinomicetomas, infecciones superficiales de la piel, con pústulas, abscesos, granulomas o celulitis, o como formas linfocutáneas12,13. En 80% de los casos, el agente etiológico es N. brasiliensis7.

Se denomina nocardiosis esporotricoide a una de las formas de presentación cutánea del género Nocardia. La forma de adquisición habitual es por inoculación traumática a través de la piel y afecta frecuentemente a pacientes del sexo masculino de entre 20 y 60 años, en relación con la exposición ocupacional. Clínicamente, se observa una lesión nodular o ulcerosa con múltiples nódulos dolorosos o pústulas satélites distribuidas a lo largo del trayecto linfático. Esta presentación es similar a la esporotricosis linfocutá-nea, un tipo de micosis causada por el género Sporothrix, la cual requiere diagnóstico diferencial12,13 y tratamiento específico.

Se presenta a continuación el caso de una paciente con nocardiosis esporotricoide en la mano izquierda, producida por N. brasiliensis.

Caso clínico

Mujer de 85 anños que asiste a la guardia médica por tumo-ración ulcerada en el dorso de la mano izquierda, con secreción purulenta de cinco días de evolución. No refirió haber realizado actividades de jardinería ni traumatismos.

Se inició tratamiento empírico con cefalexina 1 g/12 h. A los cinco días volvió a consultar por no presentar mejoría. Se observó lesión ulcerada de 1,5 cm de diámetro, con bordes eritematosos, secreción purulenta y aumento de la temperatura local. Además, presentó pápulas erite-matosas, calientes y fluctuantes en el trayecto linfático del miembro superior izquierdo, con adenopatías axilares homolaterales (fig. 1). Laboratorio: conteo de glóbulos blancos de 13 400/mm3 (N 81,6%), función renal y hepática normal, velocidad de sedimentación globular (VSG) 80 mm/h. Radiografía de tórax: sin infiltrados pleuropulmo-nares. Mediastino sin particularidades.

 

 

Figura 1: A Lesión ulcerada de mano izquierda. B) Pápulas miembro superior izquierdo.

 

 

El diagnóstico presuntivo inicial fue esporotricosis linfan-gítica. Se realizó una punción por piel sana que fue enviada al Departamento de Microbiología y se indicó empíricamente itraconazol 200 mg/día. Se continuó con cefalexina 1 g/12 h y se agregó trimetoprima-sulfametoxazol 800 mg-160 mg/12 h, con el fin de cubrir Staphylococcus aureus hasta recibir los resultados de los cultivos.

Ante el informe microbiológico preliminar de Nocar-dia sp., el Servicio de Infectología descartó el diagnóstico presuntivo de esporotricosis, suspendió el tratamiento con cefalexina e itraconazol, continuó con trimetoprima-sulfametoxazol y se agregó leucovorina 5 mg/día, para prevenir los efectos secundarios del tratamiento prolongado del antibiótico, hasta completar las cuatro semanas. Luego de dos semanas de tratamiento efectivo, la paciente presentó una franca mejoría de la lesión.

Estudios microbiológicos: en el examen directo a través de las coloraciones de Gram, Ziehl-Neelsen y Giemsa no se observó la presencia de bacterias, micobacterias, ni hongos. Luego de 48-72 h de incubación a 35 °C en el agar sangre, desarrollaron colonias secas, blanquecinas, adheridas al agar y con olor a moho. La coloración de Gram mostró bacilos gram positivos ramificados y fragmentados en formas cocoides. A partir de las colonias, se realizaron las coloraciones de Ziehl-Neelsen y Kinyoun y se observaron bacilos ácido resistentes (BAR) (fig. 2). El metabolismo aerobio y la producción de micelio aéreo permitió confirmar el género Nocardia y descartar el resto de los actinomicetos aerobios y géneros de interés clínico relacionados (tabla 1)5. La identificación a nivel de especie se realizó mediante las pruebas bioquímicas convencionales. Se obtuvieron resultados positivos para reducción de nitratos e hidrólisis de urea, esculina, caseína, hipoxantina y tirosina, y negativos para la utilización de citrato, sorbitol, inositol, glicerol, adonitol y ramnosa y para la hidrólisis de gelatina y almidón. Este perfil bioquímico permitió identificar al aislado como N. brasiliensi 2,9,14. La identificación fenotípica se confirmó por espectrometría de masas MALDI-TOF MS (Matrix Assisted Laser Desorption eritematosas, calientes y fluctuantes en el trayecto linfático del Ionization-time of Flight Mass), con un score de 1,86, considerado aceptable para identificación a nivel de especie15.

Las pruebas de sensibilidad fueron realizadas en agar Mueller Hinton suplementado con sangre ovina al 5% (Laboratorio Argentino, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina) y con las tiras con gradiente de concentración antibiótica (Etest. bioMérieux, Marcy l’Etoile, Francia). Las placas se incubaron en aerobiosis a 35°C durante 24 h. Los antibióticos probados y los resultados obtenidos (^g/ml) se detallan a continuación: trimetoprima-sulfametoxazol 0,094, gentamicina 0,25, ceftriaxona 4, ciprofloxacina 1, imipenem > 32 y claritromicina > 250. El aislado resultó sensible a trimetoprima-sulfametoxazol, gentamicina, cef-triaxona y ciprofloxacina, y resistente a imipenem y claritromicina, según los puntos de corte del Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) M24-A2, 20114.

La nocardiosis linfocutánea o nocardiosis esporotricoide producida por N. brasiliensis es un cuadro poco común en una paciente de este grupo etario, quien tampoco refirió o no recordó haber tenido un traumatismo o lesión previa, que sería la puerta de entrada para este tipo de infecciones.

En los estadios iniciales de esta patología, la lesión (tumoración ulcerada) suele confundirse con una infección bacteriana estafilocócica, actinomicótica o similar, por lo cual son importantes el conocimiento de antecedentes traumáticos producidos en espacios al aire libre o Ã¡reas de trabajo y la toma de muestra para que se realice el estudio microbiológico correspondiente. Este cuadro clínico impone el diagnóstico etiológico diferencial entre Sporothrix spp., Nocardia spp. y géneros relacionados, y micobacterias ambientales.

Se considera que todo laboratorio que realice diagnóstico microbiológico, tanto de muestras humanas como animales, debería realizar las coloraciones de Gram, Ziehl-Neelsen y Kinyoun de los materiales provenientes de lesiones de piel y partes blandas, y de los microorganismos que se rescaten de los medios de cultivo. La observación de bacilos gram positivos ramificados y aerobios, así como la ácido resistencia, sumadas a la presencia de micelio aéreo, confirman la identificación fenotípica de Nocardia spp., lo cual permite al médico tomar rápidamente la decisión de continuar el tratamiento antibiótico empírico iniciado o modificarlo.

 

Tabla 1 Características diferenciales entre Nocardia spp. y otros géneros relacionados

Género	Metabolismo	Micelio aéreo	Bacilo filamentoso ramificado	Fragmentación cocobacilar	Ziehl Neelsen	Kinyoun
Nocardia	A	+	+	+	-	+
Rhodococcus	A	-	-	+	-	+
Gordonia	A	-	-	-	-	+
Williamsia	A	-	-	-	-	-
Tsukamurella	A	-	-	-	-	+
Streptomyces	A	+	+	-	-	-
Actinomadura	A	+	+	-	-	-
Nocardiopsis	A	+	-	-	-	-
Mycobacterium	A	-	-	-	+	+
Corynebacterium	A/F	-	-	-	-	-

 

 

Figura 2: A) Colonia de Nocardia brasiliensis en medio agar base sangre, B) tinción de Kinyoun y C) tinción de Gram.

 

En laboratorios especializados, los métodos moleculares como la secuenciación de la subunidad ribosomal 16S, o bien, las técnicas espectroscópicas, como MALDI-TOF MS, se utilizan para la identificación de los microorganismos.

En el caso de Nocardia spp., la secuenciación de los genes gyrB, secA1 y HSP tiene mayor poder discriminativo que la secuenciación del gen 16S. La identificación del aislado de N. brasiliensis del presente reporte se realizó mediante pruebas bioquímicas (método convencional) y fue confirmada por la espectrometría de masas, con un score aceptable.

Nocardiosis esporotricoide por Nocardia brasiliensis

Los estudios de sensibilidad del aislado fueron realizados mediante tiras con gradiente de concentración antibiótica (Etest), cuyos resultados tienen una buena correlación con los obtenidos por el método de referencia (microdilución en caldo). Solo hay reportes de errores very major para imipenem y claritromicina4,5.

El tratamiento de elección para nocardiosis es trimetoprima-sulfametoxazol, aunque no hay recomendaciones con respecto a la duración de la terapia, la cual puede variar de dos semanas a seis meses.

Desde 1940, las sulfonamidas han sido el tratamiento de elección para la nocardiosis. Actualmente, estas se administran en combinación con trimetoprima, ya que es la presentación comercial disponible. Sin embargo, no hay evidencia de que aporte mayor actividad antibiótica en comparación con el uso de la sulfonamida sola. Ya se notificó resistencia a sulfonamidas, razón por la cual algunos autores sugieren el uso de terapia combinada con minociclina, cefalosporinas o imipenem2,7,11. En nuestro caso, tras cuatro semanas de tratamiento efectivo, la paciente concurrió a control y presentaba buena evolución del cuadro clínico.

Conclusiones

La linfangitis nodular por N. brasiliensis es una enfermedad infrecuente en la práctica clínica. Es una entidad poco reconocida y muchas veces subdiagnosticada, que debería ser sospechada en todos los casos donde se presenten lesiones ulceradas, nódulos o abscesos con linfagitis o sin ella. Por su parte, N. brasiliensis es un bacilo gram positivo que puede ser identificado por métodos convencionales en un laboratorio de mediana complejidad, sin necesidad de recurrir a plataformas complejas y costosas.

Conflicto de intereses

Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

 

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