ARTÍCULOS

Cuantificación espectrofotométrica de compuestos fenólicos y actividad antioxidante en distintos berries nativos del Cono Sur de América

 

Lillo, A.¹; Carvajal-Caiconte, F.¹; Nuñez, D.^1,2; Balboa, N.¹; Alvear Zamora, M.¹

¹Laboratorio de Bioquímica de Suelo, Universidad de La Frontera, Av. Francisco Salazar 01145. Casilla 54-D. Temuco-Chile.
²Laboratorio de Investigación en Biotecnología Animal, Universidad de La Frontera, Temuco- Chile. Correo electrónico: marysol.alvear@ufrontera.cl

Recibido 28 de agosto de 2015
Aceptado 20 de marzo de 2016
Publicado online 10 de agosto de 2016

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Resumen

El objetivo de este trabajo consistió en determinar distintos tipos de fenoles en algunos berries nativos del Cono Sur y el arándano por métodos espectrofotométricos y su relación con la actividad antioxidante. Para esto se realizaron los análisis de fenoles totales, flavonas y flavonoles totales, proantocianidinas totales, antocianinas totales, ácidos fenólicos totales, taninos totales y la actividad antioxidante por los métodos de DPPH+ y ABTS•+, en extractos de Ugni molinae, Aristotelia chilensis, Berberis darwinii, Luma apiculata y Vaccinium corymbosum. El berry que obtuvo la mayor concentración de fenoles totales, antocianinas totales y proantocianidinas totales fue A. chilensis, además, fue el de mayor poder antioxidante. Mientras que V. corymbosum fue el de menor concentración de fenoles totales, flavonas y flavonoles totales, y taninos totales, con una actividad antioxidante muy por debajo a los berries nativos del Cono Sur. Los berries analizados presentan variaciones en el contenido de los distintos fenoles estudiados.

Palabras clave: Flavonoides; Actividad antioxidante; Taninos.

ABSTRACT

The objective of this work was to identify different types of phenols in ethanol extracts of some berries native to the Southern Cone of South America and blueberry by spectrophotometric methods and their relationship to antioxidant activity. For this analysis of Total Phenols, Total Flavones and Flavonols, Total Proanthocyanidins, Total Anthocyanins, Total Phenolic Acids, Total Tannins and antioxidant activity by the method of DPPH+ and ABTS•+, in extracts of Ugni molinae, Aristotelia chilensis, Berberis darwinii, Luma apiculata and Vaccinium corymbosum. The berry that had the highest concentration of Total Phenols, Total Anthocyanins and Total Proanthocyanidins was A. chilensis, being also, the highest antioxidant power. While V. corymbosum was the lowest concentration of Total Phenols, Total Flavones and Flavonols, and Total Tannins, with antioxidant activity well below berries native to the Southern Cone. The berries have analyzed variations in the content of different phenols studied.

Keywords: Flavonoids; Antioxidant activity; Tannins.

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INTRODUCCIÓN

La búsqueda de antioxidantes naturales obtenidos de frutos nativos, dentro de los cuales se encuentran los berries, es de interés a nivel mundial (Fredes, 2009). Diversos investigadores han atribuido que las propiedades de los fenoles contribuyen a prevenir enfermedades crónicas de alta incidencia, como el cáncer y enfermedades cardiovasculares. Por lo que existe gran interés por parte de la industria alimentaria en incorporarlos como nutracéuticos (Nevue et al., 2010; Rothwell et al., 2013) para la prevención de estas enfermedades. Chile y Argentina poseen una alta variedad de berries de origen nativo y algunos de ellos endémicos, centrándose en especies de las familias Myrtaceae, Berberidaceae y Elaeocarpaceae, distribuyéndose en el sur de estos países andinos. Además, en las últimas décadas el cultivo de arándanos (Vaccinium corymbosum L.) ha aumentado considerablemente, contando con más de 12.000 hectáreas plantadas (Latorre et al., 2013) en Chile y 3.500 hectáreas en Argentina (Kirschbaum, 2011). Los berries contienen alta concentración de compuestos bioactivos como polifenoles, incluyendo antocianinas, ácidos fenólicos, taninos, carotenoides, vitamina A, C, E, ácido fólico y minerales como el calcio, selenio y zinc (Bunea et al., 2011). Los fenoles son metabolitos secundarios ampliamente distribuidos en los vegetales, estos compuestos cumplen diversas funciones en las plantas, tales como la asimilación de nutrientes, la síntesis proteica, la actividad enzimática, la fotosíntesis, la alelopatía y la protección ante patógenos y radiación UV (Stalikas, 2007; Khoddami et al., 2013).
La estructura química de los compuestos fenólicos consiste en al menos un anillo aromático con un grupo variable de grupos hidroxilos, que determinan su capacidad antioxidante (Balasundram et al., 2006; Khoddami et al., 2013), ya que estos grupos ceden electrones o átomos de hidrógeno neutralizando los radicales. El grupo más importante de compuestos fenólicos en los berries son los flavonoides, que consisten principalmente en antocianidinas, flavonoles, proantocianidinas (taninos condensados), flavonas y sus glicósidos. Todos ellos comparten el mismo esqueleto básico, el núcleo flavan, que consta de dos anillos aromáticos (anillo A y B) con seis átomos de carbono interconectados por un heterociclo incluyendo tres átomos de carbono (anillo C) (Stalikas, 2007; Wang, 2007). En una especie vegetal única, docenas de diferentes flavonoides pueden estar presente y algunos de estos se conjugan con diversos azúcares (Wang, 2007). Los distintos tipos de flavonoides se diferencian por la variación en el número y la disposición de los grupos hidroxilo, así como de la naturaleza y grado de alquilación y glicosilación de estos grupos (Rice-Evans et al., 1996).También existen en los berries una gran cantidad de fenoles distintos a los flavonoides, como los taninos hidrolizables, ácidos fenólicos (hidroxibenzoicos e hidroxicinámicos), ligninas, entre otros (Kähkönen et al., 1999, Ramírez et al., 2015, Ruiz et al., 2015).
Debido a la alta variabilidad de compuestos fenólicos de los berries, es necesaria la evaluación previa del contenido de los distintos metabolitos secundarios, y una de las metodologías más utilizadas es el análisis espectrofotométrico, el cual es rápido, preciso, fácil de usar y de bajo costo, lo que permite disponer de valores cuantitativos en poco tiempo. Con lo anteriormente mencionado, el objetivo de nuestro estudio es caracterizar distintos tipos de compuestos fenólicos de algunos berries nativos del Cono Sur y de arándano por métodos espectrofotométricos y su actividad antioxidante.

MATERIALES Y MÉTODOS

Muestras vegetales
Las muestras de frutos de maqui (Aristotelia chilensis (Molina) Stuntz.; Elaeocarpaceae), murta (Ugni Molinae Turcz.; Myrtaceae), arrayán (Luma Apiculata (DC.) Burret.; Myrtaceae), michay (Berberis darwinii Hook.; Berberidaceae) y arándano (Vaccinium corymbosum L.; Ericaceae) fueron recolectados entre febrero y abril del año 2014 en la provincia de Cautín, Novena Región de La Araucanía, Chile. Posteriormente fueron lavadas con agua destilada y secadas a 30 ± 2 ºC por 72 horas, y se trituraron para su posterior maceración.

Preparación de extractos etanólicos
Se utilizó como solvente etanol al 99.9% (grado analítico, Merck). Los extractos se formularon con una relación de 10 g de materia seca en 100 mL de solvente, se maceró durante 7 días con agitación constante y ausencia de luz. Luego se filtró en papel Whatman N.º 2 y posteriormente el solvente fue eliminado por rotaevaporación utilizando un equipo BÜCHI R-210, hasta sequedad a 40 °C, luego se dejó en desecador con sulfato de cobre para extraer la humedad de las muestras. La formulación de los extractos fue con disoluciones al 5% p/v en etanol al 70% v/v. Finalmente se filtró en papel Whatman N.º 40 y se guardó en frascos ámbar a 4 ºC hasta su posterior evaluación. Se obtuvieron 5 extractos por cada especie recolectada.

Contenido de fenoles totales
El análisis de fenoles totales se realizó por espe ctrofotometría, basándose en una reacción colorimétrica de óxido-;reducción según Curifuta et al. (2012) con algunas modificaciones. A 50 ìL de extracto se le agregaron 2 mL de agua destilada, 250 ìL de reactivo Folin-Ciocalteu (grado analítico, Merck), 1 mL de Na2CO3 al 10% p/v y se enrasó a 5 mL con agua destilada. Se midió a una longitud de onda de 765 nm después de 1 hora a temperatura ambiente y en ausencia de la luz. Se realizó una curva de calibración con ácido gálico (grado analítico, Sigma-Aldrich) entre 0 a 1000 mg/L. El contenido de polifenoles totales se expresó en mg EAG g-1 de MS (mg equivalentes de ácido gálico por gramo de materia seca).

Contenido de flavonas y flavonoles totales
Se determinó mediante un análisis espectrofotométrico basado en la formación de un complejo coloreado entre los iones de Al (III) y los grupos carbonilo e hidroxilo del flavonoide según lo descrito por Cimpoiu et al. (2011) con algunas modificaciones. A 50 µL de extracto se agregó 100 µL de AlCl3 al 5% p/v en etanol, 100 µL de acetato de sodio 1 M y se enrasó a 5 mL con metanol (grado analítico, Merck). Se midió a una longitud de onda de 425 nm después de 30 minutos en ausencia de luz. Se realizó una curva de calibración con quercetina (grado analítico, Sigma-Aldrich) entre 0 a 1000 mg/L. El contenido de flavonas y flavonoles se expresó en mg EQ g-1 de MS (mg equivalentes de quercetina por gramo de materia seca).

Contenido de ácidos fenólicos totales
Se determinó según metodología de Matkowski et al. (2008) con algunas modificaciones. El método se basó en la reacción de los ácidos hidroxicinámicos en medio ácido con el reactivo de Arnow, que presenta una coloración amarilla que cambia a naranjo en medio alcalino. A 50 µL de muestra, se agregó 1 mL de HCl 0,5 M, 1 mL de reactivo de Arnow (10 g de NaNO2 y 10 g de Na2Mo4 en 100 mL de agua destilada), 1 mL de NaOH 1M y se enrasó a 5 mL con agua destilada. Se midió a una longitud de onda de 520 nm después de 30 minutos en ausencia de luz. Se realizó una curva de calibración con ácido cafeico (grado analítico, Sigma- Aldrich) de 0 a 1000 mg/L. El contenido de ácidos fenólicos se expresó en mg EAC g-1 de MS (mg equivalentes de ácido cafeico por gramo de materia seca).

Contenido de proantocianidinas totales
El análisis estima el grado de polimerización de una proantocianidina en medio ácido. Se determinó por el método descrito por Price et al. (1978) con algunas modificaciones. Se tomaron 20 µL del extracto, se agregaron 180 µL de metanol y se agitó, luego se agregó 1,2 mL de vainillina (grado analítico, Merck) al 4% p/v en metanol, (grado analítico, Merck). Finalmente se agregaron 600 µL de HCl concentrado y protegido de la luz por 30 minutos, se midió a una longitud de onda de 500 nm. Se realizó una curva de calibración con (+)-catequina de 0 a 2000 mg/L. El contenido se expresó en mg ECT g-1 de MS (mg equivalentes de catequina por gramo de materia seca).

Contenido antocianinas totales
Se determinó por medio de diferencias de pH (Martínez- Cruz et al., 2011) con algunas modificaciones. Este es un método espectrofotométrico que se basa en la transformación estructural de las antocianinas que ocurre por el cambio de pH (pH 1coloreadas y pH 4,5 incoloras). Se preparó una solución pH 1 de KCl 0,1 M y una solución tampón pH 4,5 de acetato de sodio-ácido acético 0,1 M. Se prepararon cuatro muestras de 100 µL de extracto y se adicionó a dos de ellas 900 µL de buffer pH 1 y a las dos restantes se adicionó 900 µL de buffer pH 4,5. Se midió la absorbancia a dos longitudes de onda a 520 nm y 700 nm. La concentración se calculó utilizando la siguiente fórmula:

Donde A = (Abs 520 nm -; Abs 700 nm) pH 1 -; (Abs 520 nm -; Abs 700 nm) pH 4,5; PM = Peso molecular de cianidina- 3-glucósido: 449,2 g/mol; FD = factor de dilución; l = longitud de paso de celda en cm; å= 26900 L cm-1 mg-1, coefi- ciente de extinción molar para cianidina-3-glucósido; 1000 = factor de conversión de g a mg.
La concentración de antocianinas en el extracto se expresa en mg EC3G g-1 de MS (mg equivalentes de cianidina- 3-glucósido por gramo de materia seca).

Taninos totales (hidrolizables y condensados)
Se determinó por medio de la precipitación de taninos con fracción V de seroalbúmina de bovino SAB (Calbio- Chem) según el método descrito por Ricco et al. (2011). La cuantificación consistió en la diferencia entre los polifenoles totales de la muestra y los polifenoles totales del sobrenadante luego de ser precipitado. A 1 mL de extracto se le añadió 1 mL de solución de seroalbúmina de bovino (tampón acetato de sodio-ácido acético 0,2 M a pH 5,0; NaCl 0,17 M; 1 mg/mL de fracción V de SAB). Luego se agitó y esperó 15 min a temperatura ambiente y se centrifugó a 3000×g por 10 min. Finalmente se extrajo 50 µL del sobrenadante y se realizó el ensayo para polifenoles totales. Los resultados de la diferencia son expresados en mg EAG g-1 de MS.

Actividad antioxidante DPPH
Se determinó por medio del método del radical libre DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazilo, grado analítico, Merck) propuesto por Brand-Williams et al. (1995) con algunas modificaciones. A 0,1 mL del extracto (cada extracto a una concentración de 10 mg/mL) se añadió 3,9 ml de solución metanólica de DPPH+ (1x10-5 mg/L), se preparó un blanco con metanol en vez de muestra, finalmente la mezcla se agitó y se dejó en oscuridad durante 30 min. La absorbancia de la mezcla se midió a una longitud de onda de 515 nm. El resultado se expresó como porcentaje de inhibición de DPPH+ con la siguiente fórmula:

Donde AB es la absorbancia de la muestra y AE es la absorbancia del blanco.
Para la determinación de IC50 del radical DPPH+, se utilizó una curva de 2-20 mg/mL de muestra, determinando el IC50 a partir del gráfico de porcentaje de inhibición versus la concentración de la muestra, definido como la cantidad de la muestra (mg/mL de muestra) necesaria para obtener un 50% de inhibición del radical DPPH+. Los análisis de IC50 del radical DPPH+ se realizaron por triplicado.

Actividad antioxidante ABTs
Se determinó por medio del método del radical libre propuesto por Ozgen et al. (2006). Se utilizó reactivo ABTS (ácido 2,2'-;azino-;bis-;(3-;etillbenzotiazolin-;6-;sulfónico), grado analítico Merck), mezclando persulfato de potasio 2,45 mM y ABTS 7 mM en agua, se dejó reposar durante 16 horas. El radical ABTS•+ se ajusta con tampón acetato de sodio-ácido acético (20 mM a pH 4,5) hasta obtener una absorbancia de 0,700 ± 0,01 a una longitud de onda de 734 nm. Finalmente se agregó 0,1 mL de extracto (cada extracto a una concentración de 25 mg/mL) y se añadieron 3 mL de ABTS•+ además de un blanco sin muestra, se dejó en oscuridad por 30 min y se midió la absorbancia a una longitud de onda de 734 nm. El resultado se expresó como porcentaje de inhibición de ABTS•+ utilizando la ecuación 2. Para el IC50 de ABTS•+ se utilizó una curva de 10-50 mg/mL de muestra, se determinó el IC50 a partir del gráfico de porcentaje de inhibición versus la concentración de la muestra, definido como la cantidad de la muestra (mg/mL de muestra) necesaria para obtener un 50% de inhibición del radical ABTS•+. Los análisis de IC50 de ABTS•+ se realizaron en triplicado.

Estandarización de datos
Los datos de los distintos tipos de polifenoles se estandarizaron por la siguiente fórmula:

Donde eq (mg/L) = concentración por equivalente de la curva; L = volumen del extracto final en litro; g = masa soluto del extracto final en gramos y FD = factor de dilución.

Análisis estadístico
Para determinar si existen diferencias significativas entre las muestras en cada uno de los análisis, se realizó un ANDEVA de un factor y posteriormente un test de comparación múltiple de Tukey con un nivel de significancia del 95% para determinar diferencias de las medias entre los distintos berries analizados en cada uno de los polifenoles analizados y la actividad antioxidante, usando 25 repeticiones para cada análisis. Para determinar la relación entre cada una de las variables analizadas se determinó el coeficiente de correlación de Pearson. Se realizó un test no paramétrico de Kruskal-Wallis, con un nivel de significancia del 95% para observar diferencias en IC50 de DPPH+ y ABTS•+ entre los distintos berries. Para el análisis estadístico se utilizó el programa Statgraphic Plus 5.1.

RESULTADOS

Los distintos análisis de polifenoles evaluados en cada uno de los berries (tabla 1) muestran un importante contenido de metabolitos secundarios en las especies nativas. Aristotelia chilensis es el berry analizado con mayor contenido de polifenoles totales, seguido y, con valores similares L. apiculata y U. molinae; en el caso de la especie introducida, V. corymbosum presenta el contenido más bajo de todos. Para los flavonoides del tipo flavonas y flavonoles totales, A. chilensis es el mayor estadísticamente (P<0,05) seguido de U. molinae.

Tabla 1. Resultados de los distintos fenoles en los frutos de berries evaluados Amg EAG g-1 de MS; Bmg EQ g-1 de MS; Cmg EC3G g-1 de MS; Dmg ECT g-1 de MS;Emg EAC g-1 de MS. Los valores representan las medias y su desviación estándar. Distintas letras indican diferencia estadística (P<0,05).

El contenido de antocianinas totales es uno de los análisis más comunes para este tipo de extracto en berries, y donde claramente A. chilensis obtuvo el mayor contenido, diferenciándose significativamente de los otros berries analizados. Situación similar a lo anterior se manifiesta en proantocianidinas totales, destacando también B. darwinii para este tipo de flavonoides. Los ácidos fenólicos totales fueron mayores en B. darwinii mostrando diferencias estadísticamente significativas (P<0,05) respecto a todos los demás berries evaluados; misma situación para taninos totales seguido por U. molinae. Por una parte, el poder antioxidante de los berries evaluados (tabla 2) indican que el mayor porcentaje de inhibición del radical DPPH+ corresponde a A. chilensis, siendo signifi- cativamente mayor estadísticamente (P<0,05). Por otra parte, V. corymbosum presentó el menor poder antioxidante. En tanto para el IC50 en DPPH+, A. chilensis necesita una concentración aproximada de 3,70 mg/mL, donde U. molinae, B. darwinii y L. apiculata necesitan aproximadamente el doble de concentración y V. corymbosum el cuádruple en comparación a A. chilensis. En tanto para el ABTS•+, el porcentaje de inhibición por parte de A. chilensis es muy alto, mostrando una alta sensibilidad con este método, siendo estadísticamente mayor a los demás berries evaluados; mientras V. corymbosum mostró un efecto inhibitorio muy por debajo en comparación con los berries nativos de Chile y Argentina.

Tabla 2. Poder antioxidante en frutos de berries Los valores representan las medias y su desviación estándar. Distintas letras indican diferencia estadística (P<0,05).

Los coeficientes de correlación de Pearson (tabla 3) muestran en general altas relaciones positivas entre los parámetros analizados. Los polifenoles totales presentan una relación positiva con casi todos los tipos de polifenoles evaluados y está fuertemente relacionada con DPPH+ y ABTS•+. Los ácidos fenólicos, por su parte, presentaron una relación negativa con polifenoles totales y con algunos flavonoides. Los taninos totales y ácidos fenólicos no tuvieron relación con ambos tipos de actividad antioxidante.

Tabla 3. Correlación de Pearson entre los distintos fenoles analizados y su actividad antioxidante

DISCUSIÓN

De los resultados obtenidos, A. chilensis muestra una amplia diferencia en el contenido de distintos tipos de polifenoles, en especial en antocianinas totales (antocianidinas unidas a una molécula de azúcar) y proantocianidinas totales, que son los flavonoides más importante en este tipo de frutos y que le dan la pigmentación a los berries entre rojo y azul y otras características organolépticas (Giusti y Jing, 2007; Lorrain et al., 2013). Es así como Schreckinger et al. (2010) encontraron una alta cantidad de proantocianidinas en A. chilensis, estando la mayoría de estos en forma de dímeros (56%) y trímeros (14%), y Céspedes et al. (2010) encontraron catequinas y epicatequinas en extractos de este berry. Además, A. chilensis es la que obtuvo el mayor poder antioxidante observado por su acción de inhibir los radicales de DPPH+ y ABTS•+, actividad otorgada principalmente por el contenido de antocianinas totales al estar altamente correlacionada con ABTS•+ (r = 0,84; P < 0,001), necesitando una muy baja concentración de extracto para obtener el IC50. También su contenido de flavonas y flavonoles es alto para este berry, donde Fuentes et al. (2015) encontraron rutina y quercetina.
Los frutos de U. molinae presentan una alta concentración de flavonas y flavonoles totales, con menores contenido de antocianinas totales y proantocianidinas totales, dada la naturaleza de este berry al ser en su interior (endocarpio y mesocarpio) de un color blanquecino. Los flavonoles más comunes encontrados en berries son la quercetina y la miricetina (Rice-Evans et al., 1996), y que están en alta concentración en U. molinae (Junqueira-Gonçalves et al., 2015; Ramírez et al., 2015); también presenta una alta concentración de ácidos fenólicos y taninos totales. Los dos frutos anteriores son altamente consumidos en el sur de Chile, en los últimos años también se han incorporado especies del género Berberis; en nuestro estudio B. darwinii mostró niveles muy altos de proantocinidinas totales, aunque no así de antocianinas totales, que fueron muy bajos para este berry; centrándose su contenido de fenoles en taninos totales y particularmente en ácidos fenólicos, que es la especie de mayor contenido en este tipo de fenoles analizados. Otro berry endémico de Chile y Argentina estudiado recientemente es L. apiculata, con importantes contenidos de fenoles totales y ácidos fenólicos. Ramírez et al., (2015) encontró nueve tipos de antocianinas en L. apiculata, flavonoides que dan el color característico de este fruto. Para el caso de V. corymbosum el nivel de fenoles totales fue estadísticamente menor (P<0,05) en comparación con los berries chilenos, destacando solo en su contenido de antocianinas totales, pero aún muy inferior a A. chilensis; y, además, posee una baja actividad antioxidante tanto en DPPH+ y ABTS•+, necesitando altas concentraciones para la obtención de IC50. La medición de fenoles totales es la metodología más usada para una cuantificación rápida para distintos tipos de extractos de origen vegetal, mostrando una alta afinidad con otras mediciones de flavonoides, en especial con flavonas y flavonoles totales (r=0,88; P<0,001) y antocianinas totales (r=0,78; P<0,001); y está en relación directa con la actividad antioxidante en los extractos de berries. En el caso de las proantocianidinas, estas son moléculas de alto peso molecular compuestas por subunidades de flavan-3-ol (catequina, epicatequina, epigalocatequina) (Isaza, 2007), y están presentes en muchos vegetales, como en berries, en manzanas y en corteza de pinos (Khoddamiet al., 2013). El método colorimétrico utilizado para las proantocinidinas con vainillina en medio ácido puede proporcionar información sobre el grado de polimerización y el patrón de hidroxilación y estereoquímica de las subunidades flavan-3-ol, no obstante, en esta reacción puede haber una sobreestimación de proantocianidinas totales (Khoddamiet al., 2013), condición que se puede observar con B. darwinii, teniendo concentraciones muy elevadas abarcando casi la totalidad de sus fenoles totales. El contenido de antocianinas totales se correlacionan con las proantocinidinas totales en los berries analizados (r=0,74; P<0,001), encontrándose estos flavonoides en muchos berries (Schreckinger et al., 2010).
La reacción colorimétrica para flavonas y flavonoles totales pudiese estar sobreestimando su valor en el caso de A. chilensis debido a la reacción con AlCl3, reacción de color amarillo, pero que en esta especie fue de tonalidad azulada, posiblemente debido al alto contenido de antocianinas que interfieren en la lectura de la reacción. Algunos autores (Bunea et al., 2011; Zapata et al., 2013) añaden en esta reacción NaNO2 y NaOH obteniendo una reacción colorimétrica rojo-naranja (510 nm) para estabilizar el color de los pigmentos; sin embargo, Pêkal y Pyrzynska (2014) no recomiendan este procedimiento por sobreestimar los valores de flavonas y flavonoles debido a que el NaNO2 y NaOH reaccionan con los ácidos fenólicos y otros tipos de flavonoides presentes en los vegetales. Los ácidos fenólicos también están presentes en los berries, entre los más comunes están ácido cafeíco y ácido clorogénico, que han sido reportados en U. molinae (Junqueira- Gonçalves et al., 2015; Ramírez et al., 2015), los que poseen un alto poder antioxidante. Los ácidos fenólicos totales se encuentran relacionados con los taninos totales (taninos hidrolizables), dado que el ácido elágico es un dimero del ácido gálico. Aunque la metodología de taninos totales considera la precipitación de taninos condensados como de taninos hidrolizables, posiblemente la precipitación de taninos por la fracción V de la seroalbúmina de bovino esté más relacionado a la precipitación de taninos hidrolizables (unidades de ácido gálico o elágico unidos a carbohidratos), al no existir una correlación positiva entre el contenido de proantocianidinas totales y taninos totales en nuestro estudio.

CONCLUSIONES

La cuantificación espectrofotométrica de los distintos compuestos fenólicos evaluados demuestra la variedad que puede presentar cada tipo de berry en la concentración de estos compuestos, entregando una caracterización química temprana que permite comparaciones cuantitativas, en forma rápida y a bajo costo, de distintos berries.
Aristotelia chilensis es quien presenta las mayores concentraciones de fenoles totales, antocianinas totales y proantocianidinas totales, y el que presenta mayor poder antioxidante, siendo varias veces mayor a Vaccinium corymbosum. Todos los berries nativos del Cono Sur de América estudiados presentan altos contenidos de los compuestos fenólicos y alta capacidad antioxidante comparados con Vaccinium corymbosum L, indicando la importancia y potencial que posee la flora nativa en el sector silvo-agrario. El análisis de flavonas y flavonoles totales con AlCl3 no es recomendable para Aristotelia Chilensis debido a su alto contenido de pigmentos que interfieren en la reacción.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen la ayuda financiera otorgada a través del Proyecto FAPERJ/UFRO 2015 FPJ 15-0010 Chile- Brasil y Becas Doctorales CONICYT folios N.° 21140816 y N.° 21120557.

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