TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN

Eficiencia reproductiva de búfalas multíparas sometidas a implantes de melatonina fuera de la estación reproductiva

 

Sousa, A.O.¹; Baruselli, P.S.²; Carvalho, N.A.²; Konrad, J.L.³; Crudeli, G.A.³

¹Departamento das Clínicas Veterinárias, UEMA, São Luis, Brasil. ²Departamen-to de Reprodução Animal USP, São Paulo, Brasil. ³Cátedra de Teriogenología, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Nordeste, Sargento Cabral 2139, Corrientes (3400), Argentina. E-mail: gacrudeli@hotmail.com.

 

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Resumen

El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de implantes subcutáneos conteniendo 18 mg de melatonina (Melovine®) sobre la ciclicidad de las búfalas durante el fotoperíodo largo. La eficacia de los tratamientos fue evaluada a través de la aparición del estro, utilizando reproductores con bozal marcador. Se utilizaron 100 búfalas distribuídas en tres grupos: G1 (grupo control, n=38), G2 (grupo con un implante, n=36) y G3 (grupo con tres implantes, n=26). Ochenta y seis búfalas manifestaron actividad cíclica en el fotoperíodo largo y 71 de ellas se preñaron (82,6%). Catorce hembras permanecieron en anestro durante todo el período experimental, 6 pertenecientes al G1 (15,8%), 6 al G2 (16,7%) y 2 al G3 (7,7%). De las 38 búfalas del G1, 32 (84,2%) registraron celo y fueron servidas; de ellas, 26 (68,4%) se preñaron en noviembre y las 6 restantes (15,8%) en marzo. Del G2, 30 búfalas (83,3%) fueron servidas y 23 de ellas (63,9%) quedaron preñadas en noviembre y siete (19,4%) en marzo. En G3 fueron servidas 24 (92,3%), de las cuales 22 (84,6%) se preñaron en noviembre y dos (7,7%) en marzo. Las tasas de celo y preñez no registraron diferencias significativas entre grupos con o sin implantes de melatonina (p>0,05). Se concluye que el 86% de las búfalas puede presentar actividad reproductiva hasta un fotoperíodo con luminosidad de aproximadamente 13 horas, no siendo influenciadas por la administración de melatonina.

Palabras clave: búfalo, reproducción, fotoperíodo, implante de melatonina, preñez.

 

Reproductive efficiency of multiparous buffaloes subjected to implants of melatonin out of breeding season.

Abstract

The objective of this work was to evaluate the effect of melatonin implants on reproductive function of buffaloes during spring and summer (long photoperiod). The efficiency of treatments was tested evaluating oestrus behavior, using teaser bulls with reproductive device markers. The experiment included 100 females distributed in three groups: G1 (control group, n=38), G2 (one melatonin implant, n=36) and G3 (three implants, n=26). Eighty six (86%) females were in cyclical activities in the long photoperiod. They were mated and 71 (82.6%) became pregnant. It was verified that 18 animals repeated heat totalizing 21 repetitions. Fourteen females remained in anestrous during all the experiment, being 6 of group G1 (15.8%), 6 of group G2 (16.7%) and 2 of group G3 (7.7%). From 38 females of G1, 32 (84.2%) showed oestrus and were mated, being 26 (68.4%) pregnant in November and 6 (15.8%) in March. In G2 (n=36) 83.3% (n=30) were observed in oestrus, being 63.9% (n=23) pregnant in November and 19.4% (7) in March. In G3 animals (n=26) 92.3% (n=24) showed oestrus, being 84.6% (n=22) pregnant in November, and 7.7% (2) in March. The results showed reproductive activity in 86% of female buffaloes, with no differences (p>0.05) between groups, indicating that reproductive behaviour of this species prolongs almost until the end of the year. Consequently, reproductive behaviour was observed during the long photoperiod months, indicating that in Brazil the pattern of reproductive behaviour is different for this species. Moreover, the administration of melatonin implants did not affect reproductive pattern during this period.

Key words: buffalo, reproduction, photoperiod, melatonin implant, pregnancy.

Recibido: 5 septiembre 2011
Aceptado: 4 mayo 2012

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INTRODUCCIÓN

La importancia creciente de la bubalinocultura requiere una mayor utilización de la biotecnología disponible. A pesar de que el rodeo brasilero tiene una población estimada de cuatro millones de cabezas de búfalos, fruto del crecimiento anual del 13%³ , la mayoría no ha mejorado su potencial genético, principalmente por localizarse en una región de difícil acceso, como lo es el Valle del Amazonas ²⁶, dentro del cual la Isla de Marajo se destaca como el principal centro productivo ²¹, donde diferentes razas y subespecies se encuentran cruzadas totalmente al azar ²⁶.

Debido al hecho de que los búfalos karabao (Bubalus bubalis limneticus) poseen solo 48 cromosomas y los búfalos de río (Bubalus bubalis fluvialitis) poseen 50, sus cruzamientos están provocando problemas de orden cromosómico consecuentes a dicha hibridación ^{21, 26} . Los rodeos bubalinos que se destacan por su productividad están localizados principalmente en el sur, sudeste y nordeste de Brasil y a pesar de ser poco numerosos exhiben un mayor potencial productivo, a diferencia del numeroso rodeo existente en Marajó y en el valle amazónico.

La aptitud reproductiva durante el fotoperíodo corto es muy elevada en el sur y sudeste de la zona, lo que configura un patrón productivo con producción fuera de época de demanda de carne y leche, reflejándose este hecho en la subutilización de las industrias lácteas especializadas ⁴. Provoca además problemas de eficiencia reproductiva, que van desde el retraso de la pubertad hasta la falta de expresión del celo y ovulación ²².

La glándula pineal produce melatonina, hormona que determina el establecimiento del carácter reproductivo estacional ¹². Los perfiles de melatonina y su variación dinámica a lo largo del año hacen de la pineal la responsable de la regulación de los procesos fisiológicos necesarios para la adaptación de los animales a la variabilidad ambiental a que están sujetos ¹¹ y otros efectos relacionados a la reproducción ^{6, 8, 15, 17, 19, 20}. La baja o alta concentración de los niveles plasmáticos de la hormona constituyen señales al medio interno sobre la duración del día y de la noche, las cuales también operan en el reconocimiento de las estaciones del año ^{10, 24}. Así, las oscilaciones de la luz ambiental adquieren importancia en la regulación de las acciones fisiológicas ligadas a los niveles circulantes de melatonina ^{14, 16}.

Se considera que el efecto "día-largo" (luminosidad superior a 12,5 h en 24 h ²³) induce anestro en especies con aptitud para el fotoperiodo corto ¹¹. El efecto "día-corto" fue obtenido mediante implantes de melatonina ¹¹, por infusiones de bolos intraruminales ¹⁹ y también por variaciones de la luminosidad en cámaras climatizadas ². En el venado silvestre, cuya aptitud reproductiva ocurre durante los días cortos, la estacionalidad provoca que las glándulas reproductivas permanezcan inactivas durante el fotoperíodo largo, tal como ocurre en caprinos, ovinos y bubalinos ^{1, 5, 13, 22, 28}.

El patrón reproductivo de los bubalinos se caracteriza por evidenciar un reinicio de las actividades cíclicas al comienzo del otoño ^{1, 4, 22, 25}. De esta forma, muestran actividades reproductivas durante el otoño e invierno, disminuyéndolas en primavera y verano ^{1, 5, 22}. Algunas hembras poseen actividad reproductiva ininterrumpida durante el año entero, mostrando un patrón fisiológico de síntesis de melatonina semejante al de los mamíferos poliéstricos ^{18, 28}. En las Figuras 1 y 2 se muestran dos perfiles circadianos durante el equinoccio, para animales estacionales y no estacionales respectivamente ¹⁸.

Figura 1. Perfil circadiano de los niveles circulantes de melatonina en animales estacionales durante el equinoccio (melatonina/Mel vs horas).

Figura 2. Perfil circadiano de los niveles circulantes de melatonina en animales no estacionales durante el equinoccio (melatonina/Mel vs horas).

 

Teniendo como base estas consideraciones, el presente trabajo tuvo como objetivo estudiar la eficiencia reproductiva de 100 búfalas distribuidas en tres grupos de tratamientos en base a implantes de melatonina durante el período de anestro estacional, a efectos de ampliar conocimientos sobre la reproducción de esta especie, verificar la funcionalidad de los implantes de melatonina en la fertilidad durante el fotoperíodo largo, evaluar la tasa de servicio y de preñez en primavera y verano (octubre a marzo), y aportar conocimientos sobre la desestacionalización en la especie bubalina.

 

MATERIAL Y MÉTODOS

El presente trabajo fue realizado en cuatro establecimientos situados en el Valle de Ribeira, Estado de São Paulo (Brasil), localizados entre 24º29` y 24º42`de latitud sur, en el período de marzo de 2006 a diciembre de 2007. Los animales estuvieron sometidos a un manejo semi-intensivo, siendo las búfalas de raza Murrah en su mayoría, las que habían parido en forma normal y no presentaron problemas puerperales. Los toros se retiraron en marzo (inicio del otoño), para mantenerlas vacías hasta la colocación de los implantes, los que fueron aplicados el día 6 de octubre (primavera), junto con la incorporación de los toros al rodeo.

Los animales tuvieron acceso permanente a pasturas, heno picado, sal mineral y agua ad libitum. Fueron formados tres grupos experimentales, siendo: G1 (n=38) control; G2 (n=36) aplicación de un implante y G3 (n=26) aplicación de tres implantes subcutáneos. Cada implante contenía 18 mg de melatonina (Melovine, Ceva Sante Animale®). Para detectar el celo las búfalas se observaron dos veces al día, por la mañana (6:00 a 7:00 h) y por la tarde (18:00 a 19:00 h), teniendo en cuenta la aceptación al macho y monta completa, considerándose a esta última, como signo de estro. Tales actividades fueron llevadas a cabo durante todo el período experimental.

Los reproductores llevaban colocado un bozal marcador (chin-ball), con pintura de color claro para que su visualización facilitara la detección del celo. La palpación rectal, fue realizada a partir de los 60 días del inicio del trabajo y luego cada 30 días, para la evaluación y/o confirmación del diagnóstico de gestación. La duración del fotoperiodo fue medida semanalmente, iniciándose el 23 de setiembre y finalizando el día 29 de marzo (inicio del otoño).
Los resultados se procesaron a través del análisis de variancia (ANOVA), para evaluar el efecto de los tratamientos sobre las tasas de servicio y preñez (variables binominales). Las diferencias entre las medias fueron evaluadas por el test-t de Student ²⁷.

 

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 1. Se encontró que un 14% de las búfalas permaneció en anestro hasta el final del experimento. El 86% restante, presentó celos en dos diferentes patrones: un 82,6% (71/86) fueron servidas hasta la mitad de noviembre y de éstas, un 68,6% (59/86) quedaron preñadas. En la segunda mitad de noviembre y hasta marzo, solo un 17,4% (15/86) búfalas manifestaron celo y fueron servidas, habiéndose preñado el 13,9% (12/86).

Tabla 1. Tasas de celo y preñez en búfalas sometidas a implantes de melatonina.

 

El porcentaje de distribución del servicio mostró que en G1, un 84,2% de las hembras (32/38) fueron servidas, siendo que el 68,4% (26/38), lo hicieron hasta noviembre, las restantes del G1, un 15,8% (6/38) lo hicieron desde mediados de noviembre y hasta marzo. En las búfalas correspondiente al G2, del total de 36, fueron servidas un 83,3% (30/36), de las cuales un 63,9% (23/36) y un 19,4% (7/36), fueron servidas hasta noviembre y de mediados de noviembre a marzo respectivamente. En cuanto al G3, del total de búfalas (n=26), un 92,3% (24/26) fueron servidas, siendo un 84,6% (22/26) hasta noviembre y un 7,7% (2/26) de diciembre a marzo.

La tasas de servicios fueron de 84,2% (32/38), 83,3% (30/36) y 92,3% (24/26), para G1, G2 y G3 respectivamente. En cuanto al porcentaje de preñez, los valores fueron de 68,4 (26/38), 63,9% (23/36) y 84,6% (22/26) para G1, G2 y G3 respectivamente. No se observaron diferencias estadísticamente significativas (p>0,05) entre tasas de servicio y preñez de los grupos experimentales con o sin implantes. Las observaciones del celo permitieron detectar una intensa actividad cíclica en los dos primeros meses del experimento, con manifestación de la ciclicidad y mayor fertilidad en octubre e inicio de noviembre. La tasa de servicios fue muy baja desde diciembre hasta marzo, en parte porque la mayoría de las búfalas estaban preñadas, y en las restantes se había instalado el anestro estacional fotoperiódico.

En el mes de octubre se detectó una cantidad de 62 servicios, con 37 preñeces, en tanto en el mes de noviembre fueron servidas unas 35 búfalas, con 24 preñeces y en diciembre solo se observaron 8 servicios, de los cuales 5 repitieron celo y luego se preñaron. En el mes de enero, 2 búfalas fueron montadas y preñadas. A su vez, en febrero, hubo solo una búfala servida (que gestó) y dos en marzo, quedando ambas preñadas. Según los servicios totales realizados, se comprobó que 86 fueron servidas del 6 de octubre al 13 de marzo. La estacionalidad se reveló muy rígida en solo 14 búfalas, desde el inicio del trabajo hasta el 6 de octubre, cuando el fotoperíodo inhibió sus actividades reproductivas. Entretanto, hubo 15 hembras, que iniciaron la ciclicidad a partir de la mitad de noviembre, cuando el período de luminosidad superaba las 13 horas.

El efecto del fotoperíodo largo sobre los búfalos es considerado como un inductor del anestro ^{1, 5, 13, 22, 28}. Varios autores estudiaron la eficiencia reproductiva de búfalas con implantes de melatonina, considerando la hipótesis que estos implantes mantendrían elevada la concentración de melatonina como ocurrió con caprinos ⁷ y ovinos ¹¹, durante las estaciones del fotoperíodo largo. Nuestros resultados indican que el 86,0% (n=86) de las búfalas fueron servidas durante dos meses de primavera en que el fotoperíodo es largo, siendo estos hallazgos, no concordantes con los resultados de otros trabajos ^{1, 5, 18, 22, 28}. También, se observó que un 14,0% (n=14) de las búfalas fueron estrictamente estacionales, en concordancia a lo mencionado por otros autores ^{18, 22, 28}.

Las actividades reproductivas del 86,0% (n=86) de las hembras durante el período experimental siguieron dos patrones, en el primero de ellos el 71,0% (n=71) de las búfalas fueron servidas hasta mediados de noviembre, y en el segundo hubo un 15,0% (n=15) que ciclaron durante el fotoperíodo más largo, concordando con otras observaciones ^{18, 28}. De lo antes explicado, hubo un tercer patrón, que correspondió a aquellas búfalas 14% (n=14) que fueron absolutamente estacionales, lo que implica que en este experimento hubo tres patrones de comportamiento reproductivo durante el período estudiado.

Las expresiones reproductivas en los tres grupos experimentales no mostraron variaciones estadísticamente significativas (p<0,05). Estos datos difieren de un reciente trabajo realizado en bubillas en la India, donde se utilizó un implante similar cada 50 kg de peso vivo, logrando en los animales implantados una ciclicidad del 100%, en tanto que el grupo control no registró actividad ovárica alguna ⁹. En el presente ensayo la ausencia de diferencias quizás pueda deberse a una baja dosis de melatonina, pues en el último artículo citado, en las bubillas de 450 kg se usaron 9 implantes (162 mg), dosis que fue efectiva para lograr la ciclicidad fuera de la estación reproductiva ⁹, en tanto que en el presente trabajo, con búfalas adultas y de mayor peso, solo colocamos entre 18 y 54 mg de melatonina.

Un 92,3% de las búfalas G3 fueron cíclicas en el fotoperíodo largo y 84,6% fueron servidas hasta noviembre, siendo este hecho discordante con lo acontecido en otro ensayo ²⁸ . Por otra parte, un 7,7% de las búfalas fueron servidas en el fotoperíodo largo, en coincidencia con otras investigaciones ²⁸. Los patrones de comportamiento reproductivo aquí hallados en los tres grupos experimentales, fueron diferentes a los mencionados en un reporte anterior ⁷.

En conclusión, surge que en el 86% de las búfalas el fotoperiodo largo no afectó la ciclicidad y en el 71% no interfirió en la fertilidad hasta la mitad de noviembre. Los implantes de melatonina, no se mostraron eficaces para promover modificaciones en la ciclicidad, quizas debido a la baja dosificación o a que en la región, la variación circadiana es mínima y la estacionalidad reproductiva no es tan rígida, dependiendo más del estado nutricional de las hembras. La fertilidad, expresada en tasas de servicio y de preñez obtenidas entre los grupos experimentales, fue considerada aceptable y no acusó diferencias estadísticamente significativas. Esta investigación debería profundizarse utilizando mayores dosis de melatonina y efectuando seguimiento ecográfico de la onda folicular, a efectos de poder arribar a resultados más certeros.

 

Agradecimientos. Al Dr. Malpaux y a Ceva Santé Animale, por la provisión de los implantes de melatonina utilizados en el experimento (Melovine®). A los Dres. Leónidas Chow Castillo y Otavio Ohashi por su permanente apoyo y colaboración. A la Asociación de Criadores de Búfalos do Vale do Ribeira-Sao Pablo, por proveer los animales y el personal de campo que colaboró en la realización de las tareas.

 

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