NOTA

Primeros registros de endoparásitos en cinco especies de anfibios anuros del litoral argentino

 

Mariana C. Cabagna Zenklusen¹, Rafael C. Lajmanovich², Paola M. Peltzer², Andrés M. Attademo², Gabriela S. Fiorenza Biancucci¹ & Agustín Bassó¹

¹Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas - FBCB-UNL, Paraje el Pozo s/n, (3000) Santa Fe, Argentina. mcabagna@fbcb.unl.edu.ar
²Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET) - Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas - FBCB-UNL, Paraje el Pozo s/n, (3000) Santa Fe, Argentina. lajmanovich@hotmail.com

Recibido:19/02/09
Aceptado:30/03/09

 

Los estudios de los parásitos en anfibios en la región batracológica Litoral Mesopotámica (Cei, 1980) han sido considerados en sus aspectos de distribución, ecología y dinámica de poblaciones, estando la mayoría relacionados con helmintos (Lajmanovich y Martínez de Ferrato, 1995; Hamann y Kehr, 1997, 1998, 1999; Kehr et al., 2000; Kehr y Hamann, 2003) y pocos con protozoarios (Cabagna et al., 2006). En el presente trabajo se brindan los primeros registros de endoparásitos en cinco especies de anfibios anuros del litoral argentino, contribuyendo al conocimiento sobre la diversidad parasitaria relacionada a estos vertebrados.

Como parte de los muestreos exploratorios que se realizaron para determinar el impacto producido por los sistemas agrícolas sobre la fauna de anfibios en el litoral argentino (Lajmanovich y Peltzer, 2004; Peltzer et al., 2005), se identificaron parásitos en Odontophrynus americanus Duméril y Bribron, 1841 (Cycloramphidae), Leptodactylus chaquensis Cei, 1950, L. ocellatus Linnaeus, 1758 (Leptodactylidae), Trachycephalus venulosus Laurenti, 1768 (Hylidae) y Rhinella fernandezae, Gallardo, 1957 (Bufonidae). Las especies de anuros fueron muestreadas en las provincias de Entre Ríos (departamentos Paraná y Gualeguaychú) y Santa Fe (departamento San Javier), Argentina (Figura 1). Las áreas analizadas presentan una transición de las eco-regiones del Espinal y Delta-Islas del río Paraná (Burkhart et al., 1999), con precipitaciones distribuidas durante la primavera- verano y temperaturas anuales promedio de 18º C.

Figura 1. Áreas de estudio en las provincias de Santa Fe y Entre Ríos: Departamentos San Javier (A), Paraná (B) y Gualeguaychú (C)

Los renacuajos se recolectaron con copos de distinta abertura de malla, fueron eutanizados según protocolos estandarizados (Beaupre et al., 2004), se midió la longitud total (LT), se precisó el estadio de desarrollo (Gosner, 1960) y se extrajo, bajo estéreomicroscopio, branquias, contenidos intestinales y sangre por micropunción del corazón. Los frotis fueron coloreados con Giemsa. Los individuos adultos fueron capturados manualmente, registrándose la longitud rostro-cloacal (LRC, cm), el peso (g) y se obtuvo sangre por punción cardiaca usando jeringas estériles heparinizadas (20 mm de longitud). Los extendidos sanguíneos fueron fijados y teñidos con May Grunwald-Giemsa. Los especímenes adultos fueron restituidos a los sitios en los que fueron capturados, luego de comprobar su estado de salud mediante inspección externa.

Todos los frotis fueron observados con el máximo objetivo seco (40x) y los preparados de sangre fueron examinados con objetivo de inmersión (100x) para el registro de parásitos intracelulares. Los parásitos fueron fotografiados usando un microscopio con cámara digital Olympus, medidos con el programa Image Pro Plus 3.0.01.00® (Media Cybernetics, Silver Spring, MD.USA) y para su caracterización se siguió la nomenclatura de NBT (2007). Se determinó la prevalencia (en porcentaje) como el número de huéspedes infectados, con uno o más parásitos, dividido por el total de huéspedes examinados (Kehr y Hamman, 2003). La intensidad de infección fue estimada calculando el número de parásitos por 100 campos de 40x (Zickus, 2002). Los parásitos fueron depositados en la colección de la Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas (ESS-FBCB-UNL, números de catálogo FBCBPA 2006-004, FBCBPA 2006-006, FBCBPA 2007-007, FBCBPA 2007-008, FBCBPA 2008-009, FBCBPA 2008-010, FBCBPA 2008-011).

En las larvas de Odontophrynus americanus (N= 127) (LT = 36,02 ± 8,76 mm, estadio de Gosner = 29-41), los ciliados hallados en los contenidos intestinales fueron Zelleriella sp. (Slopalinida: Opalinidae) y Nyctotherus sp. (Ciliophora: Metopidae) mientras que Trichodina sp. (Ciliophora: Trichodinidae) fue encontrado en tejido branquial.

Zelleriella sp. (Figura 2A) (prevalencia del 58 %) es un protozoo aplanado binucleado de medidas variables (36-90 μm en el eje mayor y 25-50 μm en el eje menor) y es el género de opalina más frecuentemente observado en anfibios sudamericanos (Delvinquier y Marinkelle, 1997). Nyctotherus sp. (Figura 2B) (89-105 μm en el eje mayor y 57-64 μm en el eje menor) (prevalencia del 10 %) es un protozoario completamente ciliado con peristoma, citostoma y citofaringe bien definidos que presenta un núcleo arriñonado, micronúcleo pequeño, una vacuola posterior y un poro excretor. Ambos protozoos habitan el colon o cloaca de anfibios (Delvinquier y Marinkelle, 1996; 1997) y reptiles (Tomova y Golemansky, 2001; Muzzall, 2005) actuando como comensales (Olsen, 1986; Bettaso, 2004; Warburton et al., 2004). Finalmente, Trichodina sp. (Figura 2C) (prevalencia 3,37 %), se observó como un disco aplanado de 70 μm en promedio, con su característico anillo de dentículos formando un círculo central. Este parásito fue identificado como patógeno en peces (Avault, 1996; Kahn et al., 1999) y si bien ha sido observado en piel y branquias de anfibios, no se ha asociado a enfermedad o mortandad en especímenes de este grupo (Dood y Gunzburger, 2004). En los tres parásitos previamente descritos, la intensidad de infección fue menor a 1 ejemplar por campo de 40x.

Figura 2. Endoparásitos comensales en larvas de Odontophrynus americanus. A) Zelleriella sp., B) Nyctotherus sp., C) Trichodina sp., Giemsa, 100x.

En los extendidos de sangre de especímenes adultos de Leptodactylus chaquensis (N= 18) (LRC: 69,60 ± 8,34 cm; peso 26,70 ± 11,17 g), L. ocellatus (N= 11) (LRC: 84,5 ± 10,5 cm; peso 35,5 ± 7,5 g), y Trachycephalus venulosus (N= 6) (LRC: 7,35 ± 2,88 cm; peso 35,94 ± 0,41 g) se encontraron tripomastigotas de Trypanosoma sp. (Protozoa: Kinetoplastida: Trypanosomatidae). Las características morfológicas y prevalencia de las distintas morfoespecies observadas se señalan en la Tabla 1. Debido a que la mayoría de los tripanosomas de diferentes regiones geográficas son polimórficos (Bardsley y Harmsen, 1973; Desser, 2001), se sugiere denominar a estos parásitos como Trypanosoma sp. (Morfoespecie 1, 2, 3, 4 y 5, Figura 3A) ya que solo se contó con extendidos sanguíneos para su identificación. En todos los casos, la intensidad de infección fue menor a 1 ejemplar por campo de 40x.

Tabla 1. Características morfométricas de las distintas formas (morfoespecies) de Trypanosoma sp. observados.

Figura 3. Hemoparásitos en adultos. A) Trypanosoma sp. morfoespecies 1, 2, 3, 4 y 5; B) Microfilarias. May Gründwald-Giemsa, 100x.

Distintos tripanosomas han sido hallados en anuros de diferentes partes del mundo. En Argentina fueron observados y caracterizados en L. ocellatus (Mazza et al., 1927; Vucetich y Giacobbe, 1949), Hypsiboas pulchellus y L. gracilis (Jörg, 1933, 1936; Vucetich y Giacobbe, 1949), Ceratophrys ornata, Leptodactylus bufonius, Phyllomedusa sauvagii, Rhinella arenarum y Lepidobatrachus asper (Vucetich y Giacobbe, 1949). En cuanto a la patogenicidad de estos parásitos en los anfibios, es variable, siendo desde no patogénicos a letales, según la especie de tripanosoma y el hospedador estudiados (Bardsley y Harmsen, 1973). En lo que respecta a los datos de Argentina, todos los autores, (Mazza et al., 1927; Jörg, 1933, 1936; Vucetich y Giacobbe, 1949), coinciden que las distintas morfoespecies de tripanosomas observadas en nuestro país son no patogénicas.

En los extendidos de sangre de adultos de Rhinella fernandezae (N= 17) (LRC: 5,60 ± 0,34 cm; peso 15,33 ± 2,56 g) se observaron microfilarias (Nematoda: Filaroidea) (Figura 3B). Los hemoparásitos midieron 85,20-93,40 μm de largo y 3,60-5,40 μm de ancho. La prevalencia e intensidad de infección fueron bajas (5,88 %, 0-1 por campo de 40x). Las microfilarias de anuros son cosmopolitas (Walton, 1964a y b; Levine y Nye, 1977; Barta y Desser, 1984; Chutmongkonkul et al., 2006) y en Argentina se han observado en el género Leptodactylus sp. (Schurmans Stekhovek, 1951). A pesar de que varias especies de filarias pueden infectar a anfibios, reptiles y aves, solo las filarias que son parásitos naturales de mamíferos han sido señaladas como causantes de enfermedades zoonóticas (Orihel y Eberhard, 1998).

Teniendo en cuenta que gran parte del material estudiado proviene de sitios con intenso uso de agroquímicos (Lajmanovich et al., 2005) donde la respuesta inmune de los anfibios a los parásitos estaría condicionada, en parte, por el estrés producido por plaguicidas (Kiesecker, 2002; Knopf et al., 2005), son necesarios otros estudios para clarificar la ecología y los ciclos de vida de los parásitos en anfibios regionales, en asociación con la influencia de factores ambientales contaminantes.

 

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