NOTA

Un caso de gónada segmentada en renacuajos de Hypsiboas riojanus (Anura, Hylidae)

Javier Goldberg

Instituto de Bio y Geociencias (IBIGEO). Centro Científico Tecnológico-CONICET y Universidad Nacional de Salta. Mendoza 2. 4400. Salta. República Argentina.

Recibida: 17/01/14
Revisada: 27/02/14
Aceptada: 18/03/14
Editor Asociado: M. F .Vera Candioti

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En las últimas décadas, numerosos estudios han llamado la atención sobre el potencial de algunos productos químicos para interferir con los sistemas endócrinos de especies silvestres (Nichols et al., 2011). Un aspecto importante de estos efectos ha sido la observación de malformaciones en las gónadas de peces, anfibios, reptiles, aves y mamíferos incluidos los humanos, lo que disparó un gran número de publicaciones corroborando o rechazando esta relación (Fitzgerald y Cardona, 1993; Carr et al., 2003; Coady et al., 2004; Hecker et al., 2006; Brown, 2008; Du Preez et al., 2008; Scholz y Klüver, 2009; Nichols et al., 2011; entre otros).

Aun cuando diferentes tipos de malformaciones gonadales han sido descriptas en un amplio rango de especies de vertebrados, el desarrollo de las mismas ha sido bien estudiado en anuros (Witschi, 1921; Swingle, 1922; Hayes et al., 2002; Storrs- Mendez y Semlitsch, 2010), y recibió una atención considerable luego de las publicaciones de Tyrone Hayes y colaboradores (principalmente) que vincularon un desarrollo sexual anormal con la exposición a herbicidas de uso común en actividades agrícolas.

En anuros, los primeros reportes sobre malformaciones en gónadas fueron realizados por Spengel en 1876 y a partir de allí numerosos casos, incluyendo diferentes tipos de malformaciones, han sido reportados en renacuajos, juveniles y adultos (Reeder et al., 1998; Hayes et al., 2002; Hayes et al., 2003; Carr et al., 2003; Coady et al., 2004; Jooste et al., 2005; Skelly et al., 2010; Papoulias et al., 2013). Las principales malformaciones descriptas en anuros refieren a casos de hermafroditismo, feminización, disgenesia, presencia de ovocitos en testículos y gónadas segmentadas (resumidas en Hecker et al., 2006; Goldberg, 2013; Papoulias et al., 2013).

En esta nota se reporta un caso de gónada segmentada en un renacuajo de Hypsiboas riojanus (Anura, Hylidae) en estadio 38 de Gosner (1960) colectado en octubre de 2005 en un arroyo de montaña sobre la Ruta Provincial 46 (22º13'04''S, 63º54'41''O), Departamento Gral. San Martín, Salta, Argentina. El área corresponde a la ecorregión de Yungas y está representada principalmente por selva pedemontana. El espécimen se fijó en formol 10% y se encuentra depositado en la colección herpetológica del Museo de Ciencias Naturales de la Universidad Nacional de Salta con el lote MCN 1151. Las gónadas de otros especímenes en el mismo y en distintos estadios de Gosner (35-43) también fueron observadas a modo de comparación (MCN 1151). Para el análisis histológico, se separaron las gónadas junto con los riñones, se las deshidrató en batería ascendente de alcoholes y posteriormente fueron sumergidas en xilol como aclarante y embebidas en parafina. Se obtuvieron secciones de 5μm y se tiñeron con hematoxilina-eosina (H-E). Se siguió la terminología para malformaciones gonadales en anfibios y peces de Hecker et al. (2006) quienes proponen una nomenclatura basada en histología y morfología externa que evita las clasificaciones ambiguas.

Las gónadas se distinguen como dos cordones alargados, blanquecinos que se localizan entre los riñones (Fig. 1A). Estos cordones corresponden a testículos incipientes dado que en esta especie los ovarios aparecen bien desarrollados en el estadio 37 de Gosner (obs. pers.). El cordón derecho corresponde a una gónada masculina normal en estadio 38 mientras que el cordón izquierdo aparece segmentado en subunidades discretas de tejido gonadal separadas por constricciones (Fig. 1A). Histológicamente, ambos testículos en diferenciación presentan espermatogonias junto con células de Sertoli adyacentes y muestran signos de organización en cordones seminíferos rodeados por células mesenquimáticas (Fig. 1B). Las partes o subunidades en las que se encuentra dividida la gónada segmentada aparecen unidas por tejido conjuntivo laxo (Fig. 1B).

Figura 1. Gónada segmentada en un renacuajo de Hysiboas riojanus. A. Morfología externa. Las puntas de flecha negras indican el lugar de las constricciones en el testículo incipiente izquierdo. Las puntas de flecha rojas indican los metámeros en la gónada derecha normal. B. Corte histológico longitudinal de la gónada izquierda donde se aprecia la unión de los segmentos gonadales mediante tejido conjuntivo. C. Corte histológico longitudinal de la gónada derecha donde se aprecia la configuración metamérica normal. La comparación de la histología de ambas gónadas pone en evidencia las morfología diferentes entre segmentos (B) y metámeros (C). D. Gónadas normales en otro renacuajo en estadio 38 de la misma población. Abreviaturas: cg: cuerpos grasos; r: riñón; t: testículo. Escala = 0,5 mm en A y D y 0,2 mm en B y C.

El presente reporte representa un nuevo caso de malformaciones gonadales en anuros de Argentina. Esta anomalía representa un caso de "gónada segmentada" siguiendo la terminología de Hecker et al. (2006). Otro término utilizado para describir la misma anomalía es el de "gónadas discontinuas" (Carr et al., 2003; Coady et al., 2004; Jooste et al., 2005; Smith et al., 2005). En un trabajo reciente, Haczkiewickz y Ogielska (2013) describen la diferenciación normal de los testículos en tres especies de anuros, haciéndolo extensivo a todo el grupo, y refieren que las gónadas indiferenciadas presentan de 6 a 9 metámeros que permanecen en los testículos hasta estadios avanzados del desarrollo (Fig. 1). Aun cuando la metamería le brinda un aspecto segmentado a la gónada normal, la malformación aquí reportada es morfológicamente diferente. La comparación entre la gónada izquierda anormal (Fig. 1A, B), segmentada, y la gónada derecha (Fig. 1A, C), que se corresponde con el desarrollo normal descripto por Haczkiewickz y Ogielska (2013), y la comparación con las gónadas normales en un renacuajo de Hypsiboas riojanus en el mismo estadio 38 de Gosner i(Fg. 1D) evidencia que los segmentos individuales en la gónada anormal se separan por constricciones del primordio gonadal (Fig. 1A, B) y no exhiben continuidad morfológica como en la configuración metamérica (Fig. 1A, C, D).

Los trabajos que reportan la presencia de gónadas segmentadas refieren principalmente a estudios de laboratorio que examinan la respuesta de larvas y/o adultos de Xenopus laevis y Lithobates clamitans a la exposición al herbicida atrazina (Carr et al., 2003; Coady et al., 2004; Jooste et al., 2005; Du Preez et al., 2008) o en condiciones naturales (Smith et al., 2005; Murphy et al., 2006) pero sólo el trabajo de Carr y colaboradores (2003) encuentra cierta correlación entre las malformaciones y una alta concentración de herbicida. Por lo tanto, la presencia de esta malformación parecería ser el resultado de casos aislados dentro de una población. La futura observación de un mayor número de renacuajos de la misma población junto con una caracterización del agua del arroyo (que podría encontrarse en la zona de influencia de los yacimientos de gas y petróleo de la zona) donde fue colectado el espécimen permitirán discriminar casos naturales de malformaciones causadas por agentes exógenos.

La mayoría de las descripciones de malformaciones en gónadas refieren a resultados experimentales (y hay una gran discusión sobre el real efecto de los químicos) pero algunos estudios reportan casos en especies silvestres por lo que hay una necesidad de estudios en condiciones ambientales naturales, y que involucren diferentes ambientes, que amplíen el conocimiento sobre la ocurrencia natural de anormalidades en anuros y que puedan servir como escenarios de referencia para la evaluación de los posibles efectos de la exposición a compuestos químicos.

AGRADECIMIENTOS

A Roberto Bernal y Gladys Monasterio de Gonzo por la colecta y donación de los especímenes estudiados. A los dos revisores anónimos por sus aportes y sugerencias. A la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica por el soporte económico a través del PICT Bicentenario 638 y PICT Bicentenario 616.

LITERATURA CITADA

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