COMUNICACIONES LIBRES

Citogenética humana

 

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CH 1

UN CASO DE SÍNDROME MIELODISPLÁSICO CON DELECCIÓN DEL GEN MLL

Llimpe Y^1,2, A ARIAS¹. ¹Unidad de Genética y Biología Molecular (UGBM), Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas (INEN). Lima–Perú, ²Departamento Académico de Ciencias Dinámicas, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos (UNMSM). Lima–Perú. e-mail: yllimpem@unmsm.edu.pe

El objetivo de este estudio fue determinar si existía o no afectación del gen MLL en un paciente varón de 33 años con diagnóstico de síndrome mielodisplásico (SMD), cuyo cariotipo en médula ósea mostró adición del cromosoma 11. Para el análisis citogenético convencional con la técnica GTG (Bandas G), se realizó el cultivo de la muestra de médula ósea del paciente en medio MarrowMAX^TM (GIBCO). La nomenclatura del cariotipo se hizo de acuerdo al International System for Human Cytogenetic Nomenclature (ISCN) 2009. Debido a nuestro hallazgo, se realizó la técnica de FISH secuencial con la sonda Vysis LSI MLL dual color, break apart rearrangement, en donde las mismas metafases del estudio por bandas G se usaron para la técnica FISH. La muestra de médula ósea mostró adición del cromosoma 11 derivado. El estudio con FISH determinó la deleción del gen MLL en el cromosoma 11 con adición, evidenciado por la presencia de una sola señal de fusión en el cromosoma 11 normal.

 

CH 2

ANÁLISIS DE LA VARIABILIDAD GENÉTICA EN CINCO POBLACIONES HUMANAS DEL DEPARTAMENTO DE CORDOBA (COLOMBIA) UTILIZANDO MARCADORES MICROSATÉLITES

Pardo-Pérez E¹, T Cavadía-Martínez¹, H Cárdenas-Henao². ¹Área de Genética, Departamento de Biología, Universidad de Córdoba. Carrera 6 No. 76-103. Código Postal: 354. Montería. (Córdoba) Colombia, ²Sección de Genética, Departamento de Biología, Universidad del Valle. A. A. 25360 Cali (Valle del Cauca), Colombia. e-mail: kikepardoperez@yahoo.com

La Costa Caribe Colombiana ocupa una extensión considerable al noroccidente de América del Sur y dentro de este territorio, el departamento de Córdoba, debido a su posición privilegiada posee ecosistemas muy variados que permitieron el asentamiento de grupos humanos, desde las épocas más remotas, mucho antes de la llegada de los españoles. El genoma humano consta de 3.300 Mb de ADN nuclear y dentro de dicho genoma existen los microsatélites: secuencias de nucleótidos repetidos en tándem dispersas en el genoma. Los cebadores son diseñados para complementar las secuencias vecinas al microsatélite. Son marcadores codominantes porque se puede diferenciar el homocigoto del heterocigoto en organismos diploides. Estudios preliminares realizados en Colombia revelan la existencia de relaciones genéticas entre las poblaciones humanas, lo cual muestra el amplio proceso de mestizaje efectuado en las poblaciones colombianas. No obstante el reconocimiento de esto, no existe sufciente información para establecer la estructura y el grado de diversidad genética en Córdoba, la región Caribe y en general, para la población colombiana. En este trabajo se evaluó la estructura y diversidad genética de cinco poblaciones humanas del departamento de Córdoba a partir de la los marcadores STR’s: D5S111, D5S117, D6S260, D8S165, D14S51, D17S804. El análisis estadístico mostró que el número de alelos osciló entre 6 para el marcador D5S111 y 13 alelos para los marcadores D6S260 y D8S165; la diversidad genética fue muy alta entre y dentro de las poblaciones. Los valores de H_T de mayor valor correspondió a los marcadores D17S860 y D6S260 y a Lorica. Se encontró ausencia de equilibrio Hardy Weinberg para la mayoría de los marcadores tanto dentro como entre las poblaciones analizadas. Tanto a nivel global como subpoblacional se detectó exceso de homocigotos y se encontró equilibrio genotípico entre los marcadores, además los análisis de autocorrelación espacial de las poblaciones de Córdoba mostraron débil estructuración en los loci estudiados.

 

CH 3

INVERSIÓN PARACÉNTRICA 10Q EN MADRE CON HIJA DELECIÓN 10Q

Torres E, MB Herreros, N Monjagata, S Rodríguez, S Fernández.

Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud - UNA - Paraguay.

e-mail: elo_torres@yahoo.com.ar

Las inversiones cromosómicas se producen cuando se presentan dos rupturas dentro de un mismo cromosoma, el segmento intermedio gira 180º y se vuelve a unir formando un cromosoma cuya estructura tiene la secuencia cambiada. El portador de una inversión paracéntrica puede ser fenotípicamente normal, pero tener un riesgo elevado de producir un descendiente con desequilibrio cromosómico, debido a la difcultad del entrecruzamiento con su homólogo normal durante la meiosis. Se presenta el caso de una niña de 1año y 3 meses de edad, que consulta por retardo del desarrollo sicomotor, ceguera y agenesia de cuerpo calloso. La madre refere no tener antecedentes de patologías, ni ingesta de medicamentos, con el antecedente de un aborto espontáneo. Al examen físico de la niña presentaba frente amplia, nistagmus horizontal, mirada perdida, puente nasal chato, hipotonía, laxitud articular y ausencia de cuerpo calloso según Resonancia Magnética de Cráneo. El Cariotipo de la niña resultó 46,XX, del(10q)mat. El cariotipo del padre resultó normal y la madre, con fenotipo normal, resultó ser portadora de una inversión paracéntrica del brazo largo del cromosoma 10, cariotipo 46,XX, inv(10q). Constituyendo el cariotipo materno un rearreglo cromosómico equilibrado, derivó en un gameto desequilibrado que dio origen a la deleción en la niña. Se destaca la importancia del estudio citogenético en padres de niños con anomalías cromosómicas a fn de determinar el origen y poder realizar el correcto asesoramiento genético familiar.

 

CH 4

REPORTE DE UN CASO: NIÑA CON TRASLOCACIÓN 1;7

de la Fuente SG, NN Tolaba. Programa de Genética Htal. "Dr. Arturo Oñativia" Salta-Capital. e-mail: silviadlf1@hotmail.com

La traslocación 1q;7q es un hallazgo poco frecuente. La mayoría de los casos que involucran estos cromosomas están descriptos en desordenes hematológicos y sin presentar RM. Se reporta una niña de 10 meses de edad derivada por presentar RMG. Producto de la 1º gestación de pareja no consanguínea EM: 28 años E.P.: 33 año a su nacimiento. Nacida de embarazo de término, controlado. Ecografías prenatales normales. Serología materna negativa. Parto normal. Presentación cefálica. P.E.: prolongado. Llanto inmediato. P.N.: 3140gs.Talla: 50cms. RMG. Examen Físico: Peso: 9050gs. P75 Talla: 70cm. P25 P.C.: 46cm+1DS. Normocefalia. Facies redonda. Cejas arqueadas Leve sinofris.

Hendiduras palpebrales horizontales.

 

CH 5

DELECIÓN INTERSTICIAL 4P12-P14 DERIVADA POR TRANSLOCACIÓN INSERCIONAL MATERNA (19;4) (P13.2;P12P14)

Casali B¹, MF Villegas², A Laudicina³, MC Fernández², A Boywitt¹, R De Bellis¹, C Arberas², G del Rey¹. ¹División de Endocrinología. Centro de Investigaciones Endocrinológicas-CEDIE-CONICET. Hospital de Niños "Ricardo Gutierrez" , ²Sección de Genética. Hospital de Niños "Ricardo Gutiérrez", ³Lexel SRL, Division in vitro. e-mail: barbaracasali@hotmail.com

Las translocaciones insercionales (TI) son rearreglos raros que presentan una incidencia de 1:80000 RN. Los portadores tienen riesgo de descendencia asociados con monosomías o trisomías puras. Se presenta un niño con dishabilidad intelectual (DI), hipoacusia y piebaldismo cuyo cariotipo reveló deleción intersticial 4p12-p14.Segundo hijo de pareja joven no consanguínea con antecedentes familiares de cuadro psiquiátrico y DI. Al examen físico presentó: cráneo simétrico, mechón blanco en la región frontal, puente nasal ancho y chato, nariz de base ancha y punta redonda, columela corta, fltrum corto y ancho, malares chatos, incompetencia velopalatina, mentón pequeño, orejas desplegadas con lóbulo carnoso. Asimetría escapular, actitud escoliótica. Mancha acrónica e hipocrómica en abdomen, antebrazos y miembros inferiores. Trastornos fonológicos por falla de discriminación auditiva e incompetencia velopalatina.El estudio citogenético de AR y BG evidenció cariotipo 46,XY,der(4),            ins(19;4)(p13.2;p12p14) mat. Cariotipo materno 46,XX, ins(19;4)(p13.2;p12p14), la misma se confrmó por FISH con sondas wcp4 y wcp19. Deleciones 4p12-p14 son poco descriptas y se las vincula usualmente a DI y defectos en miembros, en la misma region mapea el gen GABRA4 asociado a trastornos genereralizados del desarrollo. En 4q12 mapea el protooncogen KIT responsable de piebaldismo y, si bien este locus no está involucrado en el rearreglo, sugerimos que el cambio de estructura afectaría la expresión del mismo. Destacamos la utilidad del FISH con sondas pintado total para confrmar inserciones cromosómicas.

 

CH 6

CHROMOSOMAL CHANGES IN PATIENTS SUSPECTED OF HAVING MYELODYSPLASTIC SYNDROME

Monteiro FS¹, PC Freitas¹, O Ricci Jr², AG Fett-Conte³. ¹Departamento de Biologia, Universidade Estadual Paulista, UNESP/IBILCE, S. J. Rio Preto, SP, Brasil, ²Departamento de Medicina III, Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, FAMERP, S. J. do Rio Preto, SP, Brasil, ³Departamento de Biologia Molecular, Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, FAMERP/FUNFARME, S. J. do Rio Preto, SP, Brasil. e-mail: fefamsn@hotmail.com

Myelodysplastic Syndrome (MDS) is a representative designation of a group of clonal diseases of hematopoietic cells characterized by cytopenia, myeloid cell dysplasia, ineffective hematopoiesis and an increased risk of progression to acute myeloid leukemia. Patients have prognostic factors related to chromosomal, genetic and/or specifc epigenetic anomalies. The objective of this study was to investigate, before initiating treatment, the presence of chromosomal abnormalities in 160 individuals diagnosed with MDS. Bone marrow samples were cultured without mitogenic stimulation and evaluated by conventional cytogenetic analysis using GTG banding at a resolution of 400 bands. The karyotypes were normal in 136 (85%) of the samples however numeric and structural clonal abnormalities were identifed in 24 (15%). Monosomies of chromosomes 18, 20, 21 and 22 in isolation, deletions especially of chromosomes 1, 5, 7, 12, 17 and 20, inversion and insertion of chromosome 3, translocations involving chromosomes 1 and 5, and complex changes were observed; some of the alterations have not been described previously. It is important that a cytogenetic evaluation by GTG banding is performed in patients in which the diagnostic hypotheses involves SMD, independent of molecular assessments, as identifcation of chromosomal alterations, whether common or rare, reinforces the diagnosis, prognosis and treatment of patients.

 

CH 7

SÍNDROME 47,XYY COM FENÓTIPO ATÍPICO: MOSAICISMO DETECTADO POR FISH EM MUCOSA ORAL E EM SANGUE PERIFÉRICO

Santos AP¹, LC Souza¹, IC Sgardioli¹, NLV Campos¹, J Paulo¹, G Guaragna Filho², AT Maciel-Guerra^1,2. ¹Laboratório de

Citogenética Humana, Departamento de Genética Médica, Faculdade de Ciências Médicas, Universidade Estadual de Campinas, Brasil., ²Grupo Interdisciplinar de Estudos da Determinação e Diferenciação do Sexo (GIEDDS)-Faculdade de Ciências Médicas, UNICAMP, Campinas, SP, Brasil. e-mail: anapsbio@gmail.com

A síndrome 47,XYY é uma aneuploidia de cromossomos sexuais na qual o cromossomo Y extra deve-se a erro na meiose paterna. Homens 47,XYY têm alta estatura, podendo coexistir problemas neurológicos, cognitivos e comportamentais. A função gonadal é geralmente normal, e a maioria é fértil; no entanto, estudos mostram infertilidade em uma pequena parcela desses indivíduos (0,18% a 1% dos homens com esterilidade). Neste estudo relatamos o caso de um indivíduo com esterilidade, hipogonadismo hipergonadotrófco e microrquidia cujo cariótipo foi 47,XYY em 50 metáfases analisadas. Foi realizada a FISH em células de mucosa oral e em sangue periférico para investigar a presença de mosaicismo. Houve diferença da proporção entre as linhagens detectadas nos diferentes tecidos. Em metáfases, o cariótipo foi redefnido como 47,XYY.ish(DXZ1x1,DYZ3x2)[152]/48,XXYY. ish(DXZ1x2,DYZ3x2)[13], na mucosa oral, o exame revelou cerca de 60% de núcleos com duplo sinal para os cromossomos X e Y, e 28,4% de células com sinal duplo para o Y e apenas um sinal de X. Nossos resultados sugerem que o quadro de microrquidia, hipogonadismo e esterilidade esteja relacionado à presença da linhagem 48,XXYY, que poderia estar em maior proporção no tecido gonadal. De fato, as características do paciente são encontradas em homens com essa constituição cromossômica. O trabalho demonstra a importância da investigação de outra linhagem celular em homens estéreis com a síndrome 47,XYY, bem como a pertinência do uso da técnica de FISH em mucosa oral, evitando a realização de procedimentos invasivos, como biópsias de pele.

 

CH 8

DUPLICACIÓN 19Q CARACTERIZADA POR HIBRIDACIÓN GENÓMICA COMPARADA MEDIANTE ARRAY (ACGH)

Zelaya G¹, E Vallespín², J Nevado², P Arias², P Lapunzina², M Torrado¹, M Gallego¹. ¹Servicio de Genética. Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan". Buenos Aires. Argentina, ²Servicio de Genética Médica, Hospital Universitario La Paz, Madrid. España.

e-mail: glmzelaya@yahoo.es

Las duplicaciones puras del brazo largo del cromosoma 19 son raras. A nuestro conocimiento se han comunicado ocho casos de los cuales sólo seis nacieron vivos. Se presenta un niño con una duplicación de novo del brazo largo del cromosoma 19. La evaluación clínica a los 3 meses de edad mostró: retraso de crecimiento pondoestatutal y madurativo y microcefalia. Frente alta y amplia, cara triangular, enoftalmo, fltrum liso, boca grande y en carpa. Micrognatia, manos con dedos largos con línea simiana unilateral y clinodactilia, halux ancho y talón procidente. En los estudios complementarios se encontró: coloboma de iris, retina y nervio óptico, estenosis pulmonar periférica, hipoplasia de cuerpo calloso, refujo vésico-uretral y en la biopsia hepática, colestasis ductopénica. El estudio citogenético fue: 46,XY, dup(19)(q?13.1q?13.3). Se realizó la técnica de FISH utilizando las sondas wcp 9 y tel 19q. Luego se aplicó aCGH sobre la plataforma KaryoArray v 2.0. El cariotipo fue interpretado como: 46,XY,dup(19)(q13.2q13.41). ish dup(19)(q13.2q13.41)(wcp19+,tel19q+).arr19q 13.2q3.41(47714601-59071641)x3. Los cariotipos parentales fueron normales. De los casos publicados con aCGH, ninguno comparte exactamente la misma duplicación. Las características más frecuentemente descriptas son retardo mental, algunas dismorfas craneofaciales, estrabismo e hipoplasia del cuerpo calloso al igual que nuestro paciente. Destacamos la utilización de aCGH para defnir la región involucrada en la duplicación y contribuir a delinear el fenotipo clínico de dup (19q) y la correlación fenotipo-genotipo.

 

CH 9

DELECIÓN INTERSTICIAL 5P DISTAL A LA BANDA 5P15.2 DE NOVO EN DOS PACIENTES NO RELACIONADOS

Baialardo E, G Zelaya, L García de La Rosa, M Torrado, MG Obregón, M Gallego. Servicio de Genética. Hospital de Pediatría "Prof Dr. Juan P Garrahan". Buenos Aires. Argentina. e-mail: baiaed@yahoo.com.ar

Las deleciones en el brazo corto del cromosoma 5 se asocian a un amplio espectro de anomalías, la mayoría corresponden al síndrome de cri du chat (SCdC). De acuerdo a la literatura, los individuos portadores de deleción 5p que no involucra la región crítica 5p15.2, no muestran el fenotipo clásico de SCdC o son normales.

Presentamos dos niños con deleción intersticial y distal a 5p15.2. Ambos evidenciaron retraso en el lenguaje, dismorfas faciales no concordantes con las descriptas en SCdC y microcefalia, sin el llanto característico del síndrome. Se realizaron estudios cromosómicos y técnica de FISH con sondas para la región critica 5p15.2 y para la región subtelomérica 5p. Los cariotipos hallados fueron en ambos casos: 46,XY,del(5)(p15.2).ish del(5) (p15.2p15.33) (D5S23+,D5S721+,subtel 5p+). A nuestro conocimiento sólo se han descripto 2 casos, uno con deleción intersticial y otro terminal, que no incluyen la región crítica 5p15.2. Coincidentemente con nuestros pacientes, mostraron un fenotipo similar con retraso en el lenguaje, sin dismorfas faciales típicas del SCdC. Del análisis de pacientes con deleciones terminales o intersticiales distales, surgió la existencia de tres regiones: una asociada a dismorfas y retardo mental severo en 5p15.2, otra para el llanto en 5p15.3 y una zona distal asociada a retraso en el lenguaje. Estudios complementarios de citogenética molecular, serán fundamentales para determinar el tamaño y la localización del segmento delecionado y su correlación con el fenotipo.

 

CH 10

RELACIÓN ENTRE DISTRIBUCIÓN ESPACIAL Y EXPRESIÓN DE GENES RELACIONADOS CON EL SÍNDROME DE DOWN: DYRK1A Y SOD1

Paz N¹, AF Vega-Benedetti², A García-Orad¹, LA Parada². ¹Departmento de Genética, Facultad de Medicina y Odontología, Universidad del País Vasco, Barrio Sarriena s/n, Leioa, España, ²Instituto de Patología Experimental, UNSa-CONICET, Avda. Bolivia 5150, Salta, Argentina. e-mail: lparada@unsa.edu.ar

Cromosomas y genes exhiben patrones de distribución en el núcleo interfásico no aleatorios que están relacionados con la función. Loci localizados interiormente en el núcleo exhiben mayor expresión que aquellos ubicados en la periferia nuclear. Nosotros presentamos resultados sobre la posición y el nivel de expresión de los genes SOD1 y DYRK1A en el núcleo interfásico de células de paciente con Síndrome de Down. Las líneas celulares GM03714 (46;XY) y D4710-176 (47;XY,+21) se utilizaron para determinar distribución y expresión mediante Inmuno-FISH cuantitativo, RT-PCR y Western-blot. En linfocitos diploides se encontró que SOD1 y DYRK1A localizan en la región intermedia entre el centro y la membrana nuclear (60% del radio nuclear). En células trisómicas el gen DYRK1A conserva esta posición, mientras que el gen SOD1 adquiere una más periférica. Además dos alelos de los genes se encuentran próximos entre sí (~30% del diámetro nuclear) y distantes del tercero (> 50%). Las señales SOD1 y DYRK1A colocalizan en un 65% de los cromosomas 21 próximos y solo en un 46% en el cromosoma distante. El nivel de expresión de DYRK1A (mARN y proteína) es signifcativamente mayor en células trisómicas que en diploides, mientras que el de SOD1 es similar en ambos tipos celulares. Se detectó además una mayor concentración de ARN pol II en el sitio de transcripción de DYRK1A que en el de SOD1. Nuestros resultados sugieren que las diferencias en la expresión de genes involucrados en el Síndrome de Down podrían guardar relación con la distribución espacial en el núcleo interfásico.

 

CH 11

NIÑA CON ISOCROMOSOMA 18q CON RMG Y ESCASO FENOTIPO

Nazr, MB, SG de la Fuente. Programa de Genética. Hospital Dr. Arturo Oñativia. Salta. Capital. e-mail: monicanazr@hotmail.com

El isocromosoma 18q, es una anomalía estructural infrecuente. La mayor parte de los casos, se detectan prenatalmente o en el primer año por sus malformaciones cardíacas graves. Es esperable encontrar fenotipo compatible con trisomía 18q y monosomía 18p. Se presenta una niña de 4 años y 6 meses derivada por presentar RMG. Producto de la 1ª gestación de pareja no consanguínea. EM y EP 17 años a su nacimiento. Embarazo de 34 semanas de gestación controlado. Antecedentes maternos: ginecorragia entre el 4º y 5º mes. ITU al 4º mes. Serología negativa. Cesárea por SFA. Depresión neonatal, requirió oxígeno. PN: 1150 grs. Pasó a Neonatología para recuperación de peso. RMG. Antecedentes patológicos. Neumonía a VSR, a los 11 meses. Bronquiolitis. Adenoidectomía: a los 2 años. Varicela a los 3 años. Examen físico: Peso -2.5 DS. Talla: P10. PC: +1.8 DS. Dolicocefalia: Hendiduras palpebrales hacia abajo. Hipertelorismo. Estrabismo convergente de ojo derecho. Comisuras labiales horizontales. Paladar ojival. Retrognatia. Orejas de implantación normal. Hélix adherido. Cuello normal. Torax simétrico. Columna normal .Abdomen normal. Genitales externos de acuerdo a edad y sexo. Miembros superiores simétricos Miembros inferiores: Sindactilia blanda 1/3 entre 2º y 3º ortejo bilateral. Estudio citogenético: En cultivo de linfocitos de sangre periférica con técnica de bandeoG: CARIOTIPO: Niña 46, XX, iso18q. Madre 46,XX

 

CH 12

SÍNDROME 49,XXXXY: A PROPÓSITO DE DOS NUEVOS CASOS

Boywitt A^1,2, MC Fernández³, A Keselman², D Braslavsky², B Casali^1,2, R De Bellis^1,2, C Arberas³, G del Rey^1,2. ¹Laboratorio de Citogenética Humana, ²División Endocrinología, Centro de Investigaciones Endocrinológicas CEDIE-CONICET, Hospital de Niños "Ricardo Gutiérrez",GCBA, ³Sección Genética Médica Hospital de Niños "Ricardo Gutiérrez", GCBA. e-mail: boywitta77@yahoo.com.ar

El síndrome 49,XXXXY es una aneuploidía de los cromosomas sexuales que se presenta fenotípicamente con retraso de crecimiento pre y postnatal, retraso psicomotor e hipogonadismo y suele asociarse a dismorfas faciales características, defectos cardíacos, esqueléticos, cerebrales y oftalmológicos. Incidencia 1:85000 RN Análisis de marcadores permitió interpretar a la aneuploidía como resultado de dos no disyunciones sucesivas en Meiosis I y Meiosis II tanto de homólogos como de cromátides hermanas, durante la gametogénesis materna. Presentamos dos nuevos casos correlacionando sus aspectos fenotípicos y cromosómicos reconocidos para este síndrome. Pacientes I: 7,5a y II: 6m son derivados por presentar microcefalia, retraso de crecimiento pondoestatural y madurativo. Al examen físico, ambos con Talla: -2,5SD, PC: -3SD, hendiduras palpebrales hacia arriba con epicantus, puente nasal chato, clinodactilia de quintos dedos, hipotonía, retraso madurativo. (I) con sinostosis radiocubital y cardiopatía; (II) con défcit visual, hipoplasia de cuerpo calloso y micropene. Estudio citogenético en SP y bandeo G estableció en ambos, cariotipo pentasómico por tetrasomía del cromosoma X, en línea pura. Cariotipo: 49,XXXXY [50] Conclusión: Existe correlación cariotipo-fenotipo entre ambos pacientes concordante con lo previamente documentado que permitió caracterizar a esta aneuploidía como una entidad clínica. La polisomía del X conlleva a sobreexpresión de genes lo cual se sugiere como responsable del fenotipo afectado en estos pacientes, siendo hasta el momento la teoría más aceptada.