COMUNICACIONES LIBRES

Genética de microorganismos

GMI 1
DETECCIÓN MOLECULAR DE Candidatus liberibacter asiaticus EN PLANTAS DE CÍTRICOS DE LA PROVINCIA DE MISIONES

Redes J.¹, J.P. Agostini¹.

¹Laboratorio de Biología Molecular, EEA INTA Montecarlo.
E-mail: jonathanfr28@hotmail.com

Candidatus Liberibacter asiaticus (CLAS) es una bacteria Gram negativa en el floema de arboles citricos que causa una enfermedad denominada Huanglongbing o HLB. Las principales vias de transmision de la bacteria son mediante un insecto vector Diaphorina citri y por material de germoplasma. En los estados avanzados de la enfermedad se observa en hojas un moteado de color amarillo con un verde irregular asimetrico, engrosamiento y aclaracion de las nervaduras y defoliacion del arbol. Las frutas pierden su eje central, hay presencia de goma en el albedo, son totalmente acidas y producen aborto de semillas, con posterior caida de frutas. El objetivo de este trabajo fue detectar la presencia del agente etiologico del HLB en muestras de plantas de citricos provenientes de diferentes localidades de la provincia de Misiones. Luego de un macerado con nitrogeno liquido de nervaduras de hojas con sintomas, se realizo una extraccion de ADN por el metodo CTAB. La deteccion molecular de la bacteria fue mediante una Nested PCR utilizando cebadores especificos para una region del gen codificador del ADN ribosomal 16S de CLAS. Los productos de PCR se visualizaron en gel de agarosa al 2 %. De un total de 112 muestras analizadas se detectaron 23 plantas positivas. El analisis de tejido vegetal mediante tecnicas moleculares es esencial para una deteccion rapida de la enfermedad, realizando asi una eliminacion temprana de los focos de infeccion y evitando epidemias.

GMI 2
APLICACIÓN DE LA TÉCNICA DE HIGH RESOLUTION MELTING PARA LA IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS DEGRADADORAS DE HIDROCARBUROS

Izzo S.A.¹, S. Quintana², M. Costagliola¹, S. Peressutti¹.

¹Gabinete de Biología Molecular y Microbiología del Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP).
²Área de Biología Molecular de Fares Taie, Instituto de Análisis.
E-mail: sizzo@inidep.edu.ar

Los hidrocarburos poliaromaticos (HPAs) representan un peligroso agente contaminante de ambientes acuaticos debido a sus propiedades toxicas, mutagenicas y carcinogenicas, y a su capacidad de bioacumularse. El Rio de la Plata es un ambiente muy productivo desde el punto de vista ecologico y pesquero. Sin embargo, el mismo se ve afectado por la presencia de diversos hidrocarburos, como HPAs, originados a partir de la actividad portuaria e industrial. La degradacion de hidrocarburos a cargo de bacterias autoctonas de un ambiente contaminado es una opcion atractiva para eliminar estos compuestos de manera natural. La deteccion de bacterias degradadoras a traves de un metodo de diagnostico rapido y eficiente, constituye una manera importante de promover la implementacion de tecnicas de biorremediacion. El objetivo de este trabajo fue evaluar el uso de la tecnica de High Resolution Melting (HRM) como metodo rapido de identificacion de bacterias degradadoras de HPAs, aisladas de la desembocadura del Rio de la Plata. Se realizo la amplificacion por PCR en tiempo real de una region del gen ARNr 16S a partir de ADN de 29 cepas, previamente identificadas por secuenciacion del ARNr 16S y evaluadas segun su capacidad de degradacion por HPLC. Mediante el analisis de HRM se lograron identificar 10 generos distintos y dentro del genero Pseudomonas se detectaron 3 patrones de HRM que logran diferenciarlas a nivel de especie. En este trabajo se logro implementar un metodo rapido y eficiente de HRM para la deteccion y diferenciacion de bacterias degradadoras de hidrocarburos en el ambiente.